304 ଷ୍ଟେନଲେସ୍ ଷ୍ଟିଲ୍ କୋଇଲ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ ରାସାୟନିକ ଉପାଦାନ, SPACA6 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନ୍ ର ସଂରଚନାରେ ଗ୍ୟାମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ସହିତ ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନର ଏକ ସଂରକ୍ଷିତ ସୁପରଫ୍ୟାମିଲି ଥାଏ |

Nature.com ପରିଦର୍ଶନ କରିଥିବାରୁ ଧନ୍ୟବାଦ |ସୀମିତ CSS ସମର୍ଥନ ସହିତ ଆପଣ ଏକ ବ୍ରାଉଜର୍ ସଂସ୍କରଣ ବ୍ୟବହାର କରୁଛନ୍ତି |ସର୍ବୋତ୍ତମ ଅଭିଜ୍ଞତା ପାଇଁ, ଆମେ ପରାମର୍ଶ ଦେଉଛୁ ଯେ ଆପଣ ଏକ ଅପଡେଟ୍ ବ୍ରାଉଜର୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ (କିମ୍ବା ଇଣ୍ଟରନେଟ୍ ଏକ୍ସପ୍ଲୋରରରେ ସୁସଙ୍ଗତତା ମୋଡ୍ ଅକ୍ଷମ କରନ୍ତୁ) |ଏହା ସହିତ, ଚାଲୁଥିବା ସମର୍ଥନ ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ, ଆମେ ଶ yles ଳୀ ଏବଂ ଜାଭାସ୍କ୍ରିପ୍ଟ ବିନା ସାଇଟ୍ ଦେଖାଇଥାଉ |
ସ୍ଲାଇଡ୍ ପ୍ରତି ସ୍ଲାଇଡ୍ ତିନୋଟି ଆର୍ଟିକିଲ୍ ଦେଖାଉଛି |ପ୍ରତ୍ୟେକ ସ୍ଲାଇଡ୍ ଦେଇ ଗତି କରିବା ପାଇଁ ସ୍ଲାଇଡ୍ କିମ୍ବା ଶେଷରେ ସ୍ଲାଇଡ୍ କଣ୍ଟ୍ରୋଲର୍ ବଟନ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପଛ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ ବଟନ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |

SPACA6 ହେଉଛି ଏକ ଶୁକ୍ରାଣୁ-ପ୍ରକାଶିତ ପୃଷ୍ଠ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଯାହା ସ୍ତନ୍ୟପାୟୀ ଯ sexual ନ ପ୍ରଜନନ ସମୟରେ ଗାମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପାଇଁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ |ଏହି ମ fundamental ଳିକ ଭୂମିକା ସତ୍ତ୍ SP େ, SPACA6 ର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ କାର୍ଯ୍ୟ ଖରାପ ଭାବରେ ବୁ understood ାପଡେ |ଆମେ 2.2 Å ରେଜୋଲୁସନରେ SPACA6 ର ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ଡୋମେନ୍ ର ସ୍ଫଟିକ୍ ସଂରଚନାକୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ କରୁ, କ୍ୱାସି-ଫ୍ଲେକ୍ସିବଲ୍ ଲିଙ୍କର୍ ଦ୍ୱାରା ଯୋଗ ହୋଇଥିବା ଏକ ଚାରି-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ବଣ୍ଡଲ୍ ଏବଂ ଆଇଗ୍ ପରି sand- ସ୍ୟାଣ୍ଡୱିଚ୍ ଦ୍ୱାରା ଗଠିତ ଦୁଇଟି ଡୋମେନ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ପ୍ରକାଶ କରୁ |ଏହି ସଂରଚନା IZUMO1 ସହିତ ସମାନ, ଅନ୍ୟ ଏକ ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍-ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନ୍, SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ଫର୍ଟିଲାଇଜେସନ୍-ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନର ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ପ୍ରତିଷ୍ଠାତା ସଦସ୍ୟ ଭାବରେ ଏଠାରେ IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲି ଭାବରେ ସୂଚିତ |IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲି ଏହାର ମୋଡ଼ାଯାଇଥିବା ଚାରି-ହେଲିକ୍ସ ବଣ୍ଡଲ୍ ଏବଂ ଡିସଲଫାଇଡ୍-ସଂଯୁକ୍ତ CXXC ମୋଟିଫ୍ ଦ୍ୱାରା ଏକ ଗଠନମୂଳକ ଭାବରେ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଛି |ମାନବ ପ୍ରୋଟିମର ଏକ ସଂରଚନା-ଆଧାରିତ ଆଲଫା ଫୋଲ୍ଡ ସନ୍ଧାନ ଏହି ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ଅତିରିକ୍ତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସଦସ୍ୟମାନଙ୍କୁ ଚିହ୍ନଟ କଲା;ଉଲ୍ଲେଖଯୋଗ୍ୟ, ଏହି ପ୍ରୋଟିନ୍ ମଧ୍ୟରୁ ଅନେକ ଗ୍ୟାମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ସହିତ ଜଡିତ |SPACA6 ଗଠନ ଏବଂ IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ଅନ୍ୟ ସଦସ୍ୟମାନଙ୍କ ସହିତ ଏହାର ସମ୍ପର୍କ ସ୍ତନ୍ୟପାୟୀ ଗ୍ୟାମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ବିଷୟରେ ଆମର ଜ୍ଞାନରେ ନିଖୋଜ ଲିଙ୍କ୍ ପ୍ରଦାନ କରେ |
ପ୍ରତ୍ୟେକ ମାନବ ଜୀବନ ଦୁଇଟି ପୃଥକ ହାପ୍ଲଏଡ୍ ଗ୍ୟାମେଟରୁ ଆରମ୍ଭ ହୁଏ: ପିତାଙ୍କ ଶୁକ୍ରାଣୁ ଏବଂ ମାତାର ଅଣ୍ଡା |ଏହି ଶୁକ୍ରାଣୁ ହେଉଛି ଏକ ତୀବ୍ର ଚୟନ ପ୍ରକ୍ରିୟାର ବିଜେତା ଯେଉଁଥିରେ ଲକ୍ଷ ଲକ୍ଷ ଶୁକ୍ରାଣୁ କୋଷ ମହିଳା ଯ ital ନାଙ୍ଗ ଦେଇ ଯାଇଥାଏ, ବିଭିନ୍ନ ବାଧାବିଘ୍ନକୁ ଅତିକ୍ରମ କରି କ୍ୟାପିଟେସନ୍ ଦେଇଥାଏ, ଯାହା ସେମାନଙ୍କର ଗତିଶୀଳତା ଏବଂ ଭୂପୃଷ୍ଠ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକର ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ବ, ାଇଥାଏ 2,3,4 |ଶୁକ୍ରାଣୁ ଏବଂ ଓସାଇଟ୍ ପରସ୍ପରକୁ ପାଇଲେ ମଧ୍ୟ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଏପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଶେଷ ହୋଇନାହିଁ |ଓସାଇଟ୍ କୁମୁଲସ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଏକ ସ୍ତର ଏବଂ ଜୋନା ପେଲୁସିଡା ନାମକ ଏକ ଗ୍ଲାଇକୋପ୍ରୋଟେନ୍ ବ୍ୟାରେଜ୍ ଦ୍ୱାରା ଘେରି ରହିଥାଏ, ଯାହା ମାଧ୍ୟମରେ ଶୁକ୍ରାଣୁ ଓସାଇଟ୍ ଭିତରକୁ ପ୍ରବେଶ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ |ଏହି ଅନ୍ତିମ ପ୍ରତିବନ୍ଧକକୁ ଦୂର କରିବା ପାଇଁ ସ୍ପର୍ମାଟୋଜୋଆ ଭୂପୃଷ୍ଠ ଆଡେସିନ୍ ଅଣୁ ଏବଂ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍-ଜଡିତ ଏବଂ ଗୁପ୍ତ ଏନଜାଇମର ଏକ ମିଶ୍ରଣ ବ୍ୟବହାର କରେ |ଏହି ଅଣୁ ଏବଂ ଏନଜାଇମଗୁଡିକ ମୁଖ୍ୟତ the ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଏବଂ ଆକ୍ରୋସୋମାଲ୍ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସରେ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇ ରହିଥାଏ ଏବଂ ଯେତେବେଳେ ଆକ୍ରୋସୋମାଲ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟରେ ଶୁକ୍ରାଣୁର ବାହ୍ୟ br ାଞ୍ଚା ଲାଇସେଡ୍ ହୁଏ ଚିହ୍ନଟ ହୁଏ |ଏହି ତୀବ୍ର ଯାତ୍ରାର ଅନ୍ତିମ ପଦକ୍ଷେପ ହେଉଛି ଶୁକ୍ରାଣୁ-ଅଣ୍ଡା ଫ୍ୟୁଜନ୍ ଇଭେଣ୍ଟ, ଯେଉଁଥିରେ ଦୁଇଟି କୋଷ ସେମାନଙ୍କର ମେମ୍ବ୍ରାନକୁ ଫ୍ୟୁଜ୍ କରି ଏକକ ଡିପ୍ଲଏଡ୍ ଅଣୁଜୀବରେ ପରିଣତ ହୁଏ |ଯଦିଓ ଏହି ପ୍ରକ୍ରିୟା ମାନବ ପ୍ରଜନନରେ ଭୂମିପୂଜନ ଅଟେ, ଆବଶ୍ୟକୀୟ ମଲିକୁଲାର ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଖରାପ ଭାବରେ ବୁ understood ାପଡେ |
ଗ୍ୟାମେଟଗୁଡିକର ଫର୍ଟିଲାଇଜେସନ୍ ସହିତ, ଦୁଇଟି ଲିପିଡ ବିଲାୟରର ମିଶ୍ରଣର ରସାୟନ ବିଜ୍ଞାନକୁ ବ୍ୟାପକ ଭାବରେ ଅଧ୍ୟୟନ କରାଯାଇଛି |ସାଧାରଣତ ,, ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ହେଉଛି ଏକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ଅନୁକୂଳ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଯାହା ଏକ ଗଠନମୂଳକ ରୂପାନ୍ତର ପରିବର୍ତ୍ତନ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରୋଟିନ୍ କାଟାଲାଇଷ୍ଟ ଆବଶ୍ୟକ କରେ ଯାହା ଦୁଇଟି ମେମ୍ବ୍ରାନକୁ ଏକତ୍ର କରିଥାଏ, ସେମାନଙ୍କର ନିରନ୍ତରତା ଭାଙ୍ଗେ ଏବଂ ଫ୍ୟୁଜନ୍ 8,9 ସୃଷ୍ଟି କରେ |ଏହି ପ୍ରୋଟିନ୍ କାଟାଲାଇଷ୍ଟର୍ ଫ୍ୟୁଜୋଜେନ୍ ଭାବରେ ଜଣାଶୁଣା ଏବଂ ଅସଂଖ୍ୟ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ସିଷ୍ଟମରେ ମିଳିଲା |ସେଗୁଡିକ ହୋଷ୍ଟ କୋଷରେ ଭାଇରାଲ୍ ପ୍ରବେଶ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ (ଯଥା, ଏଚ୍.ଆଇ.ଭି.-୧ରେ gp160, କରୋନାଭାଇରସରେ ସ୍ପାଇକ୍, ଇନ୍‌ଫ୍ଲୁଏଞ୍ଜା ଜୀବାଣୁରେ ହେମାଗ୍ଲୁଟିନ) 10,11,12 ପ୍ଲେସେଣ୍ଟାଲ୍ (ସିନ୍ସିଟିନ୍) 13,14,15 ଏବଂ ନିମ୍ନ ଇଉକାରିଓଟ୍ସରେ ଗେମେଟ୍ ଗଠନ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ | ଉଦ୍ଭିଦ, ବିରୋଧୀ ଏବଂ ଆର୍ଥ୍ରୋପୋଡରେ HAP2 / GCS1) 16,17,18,19 |ମାନବ ଗ୍ୟାମେଟ୍ ପାଇଁ ଫ୍ୟୁଜେନ୍ସ ଏପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଆବିଷ୍କୃତ ହୋଇନାହିଁ, ଯଦିଓ ଅନେକ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଗେମେଟ୍ ସଂଲଗ୍ନ ଏବଂ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପାଇଁ ଗୁରୁତ୍ to ପୂର୍ଣ ବୋଲି ଦର୍ଶାଯାଇଛି |ଓସାଇଟ୍-ପ୍ରକାଶିତ CD9, ମାଉସ୍ ଏବଂ ମାନବ ଗ୍ୟାମେଟର ମିଶ୍ରଣ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ଟ୍ରାନ୍ସମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍, ପ୍ରଥମେ 21,22,23 ଆବିଷ୍କୃତ ହୋଇଥିଲା |ଯଦିଓ ଏହାର ସଠିକ୍ କାର୍ଯ୍ୟ ଅସ୍ପଷ୍ଟ ରହିଛି, ଆଡେସିନ୍ରେ ଏକ ଭୂମିକା, ଅଣ୍ଡା ମାଇକ୍ରୋଭିଲି ଉପରେ ଆଡେସିନ୍ ଫୋକିର ଗଠନ, ଏବଂ / କିମ୍ବା ଓସାଇଟ୍ ଭୂପୃଷ୍ଠ ପ୍ରୋଟିନଗୁଡିକର ସଠିକ୍ ଲୋକାଲାଇଜେସନ୍ ସମ୍ଭବତ 24 24,25,26 ପରି ମନେହୁଏ |ଦୁଇଟି ସାଧାରଣ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଯାହା ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପାଇଁ ଗୁରୁତ୍ are ପୂର୍ଣ୍ଣ ହେଉଛି ଶୁକ୍ରାଣୁ ପ୍ରୋଟିନ୍ IZUMO127 ଏବଂ ଓସାଇଟ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ JUNO28, ଏବଂ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପୂର୍ବରୁ ଗେମେଟ୍ ସ୍ୱୀକୃତି ଏବଂ ଆଡିଶିନ୍ରେ ସେମାନଙ୍କର ପାରସ୍ପରିକ ସଙ୍ଗଠନ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପଦକ୍ଷେପ |ପୁରୁଷ ଇଜୁମୋ 1 ନକ୍ଆଉଟ୍ ମୂଷା ଏବଂ ମହିଳା ଜୁନୋ ନକ୍ଆଉଟ୍ ମୂଷା ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ନିର୍ଜନ, ଏହି ମଡେଲଗୁଡିକରେ ଶୁକ୍ରାଣୁ ପେରିଭାଇଟେଲାଇନ୍ ସ୍ପେସ୍ ଭିତରକୁ ପ୍ରବେଶ କରନ୍ତି କିନ୍ତୁ ଗ୍ୟାମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜ୍ ହୁଏ ନାହିଁ |ସେହିଭଳି, ମଣିଷର ଭିଟ୍ରୋ ଫର୍ଟିଲାଇଜେସନ୍ ପରୀକ୍ଷଣରେ ଗ୍ୟାମେଟଗୁଡିକ ଆଣ୍ଟି- IZUMO1 କିମ୍ବା JUNO27,29 ଆଣ୍ଟିବଡି ସହିତ ଚିକିତ୍ସା କରାଯାଉଥିବାବେଳେ ମିଳନ କମିଯାଇଥିଲା |
ସମ୍ପ୍ରତି, IZUMO1 ଏବଂ JUNO20,30,31,32,33,34,35 ପରି ଶୁକ୍ରାଣୁ-ପ୍ରକାଶିତ ପ୍ରୋଟିନଗୁଡିକର ଏକ ନୂତନ ଆବିଷ୍କୃତ ଗୋଷ୍ଠୀ ଆବିଷ୍କୃତ ହୋଇଛି |ଶୁକ୍ରାଣୁ ଆକ୍ରୋସୋମାଲ୍ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍-ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନ୍ 6 (SPACA6) ଏକ ବୃହତ ଆକାରର ମୁରିନ୍ ମ୍ୟୁଟେଜେନେସିସ୍ ଅଧ୍ୟୟନରେ ଫର୍ଟିଲାଇଜେସନ୍ ପାଇଁ ଜରୁରୀ ବୋଲି ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇଛି |Spaca6 ଜିନ୍ ରେ ଟ୍ରାନ୍ସଜେନ୍ ଭର୍ତ୍ତି କରିବା ଦ୍ f ାରା ଅଣସଂଗଠିତ ଶୁକ୍ରାଣୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ହୁଏ, ଯଦିଓ ଏହି ଶୁକ୍ରାଣୁଗୁଡିକ ପେରିଭାଇଟେଲାଇନ୍ ସ୍ପେସ୍ 36 ​​ରେ ଅନୁପ୍ରବେଶ କରନ୍ତି |ମୂଷାମାନଙ୍କରେ ପରବର୍ତ୍ତୀ ନକ୍ଆଉଟ୍ ଅଧ୍ୟୟନ ନିଶ୍ଚିତ କଲା ଯେ ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ 30,32 ପାଇଁ Spaca6 ଆବଶ୍ୟକ |SPACA6 ପ୍ରାୟତ test ପରୀକ୍ଷଣରେ ପ୍ରକାଶ କରାଯାଇଥାଏ ଏବଂ IZUMO1 ପରି ଏକ ଲୋକାଲାଇଜେସନ୍ ପ୍ୟାଟର୍ ଅଛି, ଯଥା ଆକ୍ରୋସୋମାଲ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପୂର୍ବରୁ ଶୁକ୍ରାଣୁର ଅନ୍ତର ମଧ୍ୟରେ, ଏବଂ ତାପରେ ଆକ୍ରୋସୋମାଲ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା 30,32 ପରେ ସମୀକରଣ ଅଞ୍ଚଳକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ |ବିଭିନ୍ନ ସ୍ତନ୍ୟପାୟୀ ପ୍ରାଣୀ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଇଉକାରିଓଟ୍ 30 ରେ Spaca6 ହୋମୋଲୋଜ୍ ବିଦ୍ୟମାନ ଅଛି ଏବଂ ମାନବ ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପାଇଁ ଏହାର ମହତ୍ତ୍ SP SPACA6 30 ପ୍ରତିରୋଧ ଦ୍ vit ାରା ଭିଟ୍ରୋରେ ମାନବ ସାରର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି |IZUMO1 ଏବଂ JUNO ପରି, SPACA6 ର ଗଠନ, ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟର ବିବରଣୀ ଅସ୍ପଷ୍ଟ ରହିଛି |
ମାନବ ଶୁକ୍ରାଣୁ ଏବଂ ଅଣ୍ଡାର ମିଶ୍ରଣର ମ fundamental ଳିକ ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ଭଲ ଭାବରେ ବୁ To ିବା ପାଇଁ, ଯାହା ଆମକୁ ପରିବାର ଯୋଜନା ଏବଂ ପ୍ରଜନନ ଚିକିତ୍ସାରେ ଭବିଷ୍ୟତର ବିକାଶ ବିଷୟରେ ସୂଚନା ଦେବାରେ ସକ୍ଷମ କରିବ, ଆମେ SPACA6 ଗଠନମୂଳକ ଏବଂ ବାୟୋକେମିକାଲ୍ ଅଧ୍ୟୟନ କରିଥିଲୁ |SPACA6 ର ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ଡୋମେନ୍ ର ସ୍ଫଟିକ୍ ସଂରଚନା ଏକ ଚାରି-ହେଲିକାଲ୍ ବଣ୍ଡଲ୍ (4HB) ଏବଂ କ୍ୱାସି-ଫ୍ଲେକ୍ସିବଲ୍ ଅଞ୍ଚଳ ଦ୍ୱାରା ସଂଯୁକ୍ତ ଏକ ଇମ୍ୟୁନୋଗ୍ଲୋବୁଲିନ୍ ପରି (Ig-like) ଡୋମେନ୍ ଦେଖାଏ |ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନରେ ପୂର୍ବାନୁମାନ ଅନୁଯାୟୀ, 7,32,37 SPACA6 ର ଡୋମେନ୍ ଗଠନ ମାନବ IZUMO1 ସହିତ ସମାନ, ଏବଂ ଦୁଇଟି ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏକ ଅସାଧାରଣ ମୋଟିଫ୍ ଅଂଶୀଦାର କରନ୍ତି: ଏକ ତ୍ରିକୋଣୀୟ ହେଲିକାଲ୍ ପୃଷ୍ଠ ସହିତ 4HB ଏବଂ ଡିସଲଫାଇଡ୍-ସଂଯୁକ୍ତ CXXC ମୋଟିଫ୍ |ଆମେ ପ୍ରସ୍ତାବ ଦେଉଛୁ ଯେ IZUMO1 ଏବଂ SPACA6 ବର୍ତ୍ତମାନ ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ସହିତ ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନର ଏକ ବୃହତ, ଗଠନମୂଳକ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିକୁ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରେ |ସୁପରଫ୍ୟାମିଲି ପାଇଁ ଅତୁଳନୀୟ ବ features ଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡିକ ବ୍ୟବହାର କରି, ଆମେ ଆଲଫାଫୋଲ୍ଡ ଷ୍ଟ୍ରକଚରାଲ୍ ମାନବ ପ୍ରୋଟିମ୍ ପାଇଁ ଏକ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ସନ୍ଧାନ କରିଥିଲୁ, ଏହି ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ଅତିରିକ୍ତ ସଦସ୍ୟମାନଙ୍କୁ ଚିହ୍ନଟ କରି ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ଏବଂ / କିମ୍ବା ଫର୍ଟିଲାଇଜେସନ୍ ସହିତ ଜଡିତ ଅନେକ ସଦସ୍ୟଙ୍କୁ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରିଥିଲୁ |ବର୍ତ୍ତମାନ ଏହା ଦେଖାଯାଉଛି ଯେ ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ସହିତ ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନଗୁଡିକର ଏକ ସାଧାରଣ ଗଠନମୂଳକ ଫୋଲ୍ଡ ଏବଂ ସୁପରଫ୍ୟାମିଲି ଅଛି, ଏବଂ ଆମର ଗଠନ ମାନବ ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ଯନ୍ତ୍ରର ଏହି ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଦିଗର ଏକ ମଲିକୁଲାର ମାନଚିତ୍ର ପ୍ରଦାନ କରେ |
SPACA6 ହେଉଛି ଗୋଟିଏ ପାସ୍ ଟ୍ରାନ୍ସମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଯାହାକି ଗୋଟିଏ N- ସଂଯୁକ୍ତ ଗ୍ଲାଇକାନ୍ ଏବଂ six ଟି ପୁଟିଭ୍ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ (ଚିତ୍ର S1a ଏବଂ S2) ସହିତ |ଆମେ ଡ୍ରୋସୋଫିଲା S2 କୋଷରେ ମାନବ SPACA6 (ଅବଶିଷ୍ଟ 27–246) ର ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ଡୋମେନ୍ ପ୍ରକାଶ କରିଥିଲୁ ଏବଂ ନିକେଲ୍ ଆଫିନିଟି, କ୍ୟାସନ୍ ଏକ୍ସଚେଞ୍ଜ୍ ଏବଂ ସାଇଜ୍ ଏକ୍ସକ୍ଲୁସନ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି (ଚିତ୍ର S1b) ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରୋଟିନକୁ ଶୁଦ୍ଧ କରିଥିଲୁ |ଶୁଦ୍ଧ SPACA6 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନ୍ ଅତ୍ୟନ୍ତ ସ୍ଥିର ଏବଂ ସମାନ ଅଟେ |ବହୁଗୁଣିତ ଆଲୋକ ବିଛାଇବା (SEC-MALS) ସହିତ ସାଇଜ୍ ଏକ୍ସକ୍ଲୁସନ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ବ୍ୟବହାର କରି ବିଶ୍ଳେଷଣ 26.2 ± 0.5 kDa (ଚିତ୍ର S1c) ସହିତ ଗଣିତ ମଲିକୁଲାର ଓଜନ ସହିତ ଗୋଟିଏ ଶିଖରକୁ ପ୍ରକାଶ କଲା |ଏହା SPACA6 ମୋନୋମେରିକ୍ ଏକ୍ଟୋଡୋମେନର ଆକାର ସହିତ ସମାନ ଅଟେ, ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ ଶୁଦ୍ଧତା ସମୟରେ ଅଲିଗୋମେରାଇଜେସନ୍ ହୋଇନଥିଲା |ଏଥିସହ, ସର୍କୁଲାର୍ ଡିକ୍ରୋଜିମ୍ (CD) ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରସ୍କୋପି ଏକ ମିଶ୍ରିତ α / β ସଂରଚନାକୁ 51.3 ° C (ଚିତ୍ର S1d, e) ତରଳିବା ପଏଣ୍ଟ ସହିତ ପ୍ରକାଶ କରିଛି |ସିଡି ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରାର ଡେକନଭୋଲ୍ୟୁସନ୍ 38.6% α- ହେଲିକାଲ୍ ଏବଂ 15.8% β- ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ ଉପାଦାନଗୁଡିକ (ଚିତ୍ର S1d) ପ୍ରକାଶ କଲା |
SPACA6 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନକୁ ରାଣ୍ଡମ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ ବିହନ 38 ବ୍ୟବହାର କରି ସ୍ଫଟିକ କରାଯାଇଥିଲା ଯାହା ଫଳସ୍ୱରୂପ 2.2 Å ରେଜୋଲୁସନ ସହିତ ଏକ ଡାଟା ସେଟ୍ ହୋଇଥିଲା (ସାରଣୀ 1 ଏବଂ ଚିତ୍ର S3) |ସଂରଚନା ନିର୍ଣ୍ଣୟ ପାଇଁ ବ୍ରୋମାଇଡ୍ ଏକ୍ସପୋଜର ସହିତ ଖଣ୍ଡ-ଆଧାରିତ ମଲିକୁଲାର ପ୍ରତିସ୍ଥାପନ ଏବଂ SAD ଫେଜ୍ ତଥ୍ୟର ଏକ ମିଶ୍ରଣ ବ୍ୟବହାର କରି, ଚୂଡ଼ାନ୍ତ ବିଶୋଧିତ ମଡେଲରେ ଅବଶିଷ୍ଟ 27–246 ରହିଥାଏ |ଯେତେବେଳେ structure ାଞ୍ଚା ସ୍ଥିର ହେଲା, ସେଠାରେ କ exper ଣସି ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ କିମ୍ବା ଆଲଫା ଫୋଲ୍ଡ ସଂରଚନା ଉପଲବ୍ଧ ନଥିଲା |SPACA6 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନ ମାପ 20 Å × 20 Å × 85 Å, ସାତଟି ହେଲିକ୍ସ ଏବଂ ନଅ β- ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡକୁ ନେଇ ଗଠିତ, ଏବଂ ଏହାର ଏକ ବର୍ଦ୍ଧିତ ତୃତୀୟ ଫୋଲ୍ଡ ଅଛି ଯାହା six ଟି ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ଦ୍ୱାରା ସ୍ଥିର ହୋଇଛି (ଚିତ୍ର 1a, b) |Asn243 ପାର୍ଶ୍ୱ ଶୃଙ୍ଖଳାର ଶେଷରେ ଦୁର୍ବଳ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତା ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ ଏହି ଅବଶିଷ୍ଟ ଅଂଶ ହେଉଛି ଏକ N- ସଂଯୁକ୍ତ ଗ୍ଲାଇକୋସାଇଲେସନ୍ |ସଂରଚନା ଦୁଇଟି ଡୋମେନକୁ ନେଇ ଗଠିତ: ଏକ N- ଟର୍ମିନାଲ୍ ଚାରି-ହେଲିକ୍ସ ବଣ୍ଡଲ୍ (4HB) ଏବଂ ସେମାନଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ ଏକ ମଧ୍ୟବର୍ତ୍ତୀ ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳ ସହିତ ଏକ ସି-ଟର୍ମିନାଲ୍ Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ (ଚିତ୍ର 1c) |
SPACA6 ର ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ଡୋମେନ୍ ର ଏକ ଗଠନ |SPACA6 ର ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ଡୋମେନ୍ ର ଷ୍ଟ୍ରିପ୍ ଚିତ୍ର, ଶୃଙ୍ଖଳାର ରଙ୍ଗ N ରୁ C- ଟର୍ମିନାସ୍ ଗା dark ନୀଳରୁ ଗା dark ଲାଲ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ |ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡରେ ଜଡିତ ସିଷ୍ଟାଇନ୍ ମ୍ୟାଜେଣ୍ଟାରେ ହାଇଲାଇଟ୍ ହୋଇଛି |b SPACA6 ର ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ଡୋମେନ୍ ର ଟପୋଲୋଜି |ଚିତ୍ର 1a ପରି ସମାନ ରଙ୍ଗ ସ୍କିମ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |c SPACA6 ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ଡୋମେନ୍ |4HB, ହିଙ୍ଗୁ, ଏବଂ Ig ପରି ଡୋମେନ୍ ଷ୍ଟ୍ରିପ୍ ଚାର୍ଟ ଯଥାକ୍ରମେ ରଙ୍ଗୀନ କମଳା, ସବୁଜ ଏବଂ ନୀଳ |ସ୍ତରଗୁଡିକ ମାପିବା ପାଇଁ ଟାଣାଯାଏ ନାହିଁ |
Spaca6 ର 4hb ଡୋମେନ୍ ଚାରୋଟି ମୁଖ୍ୟ ହେଲିକସ୍ (ହେଲିକଲ୍ ହେଲିକ୍ସ (ଚିତ୍ର 2A) ଆକାରରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ (ଚିତ୍ର 2 ବି) |ଏକ ଛୋଟ ଅତିରିକ୍ତ ସିଙ୍ଗଲ୍ ଟର୍ନ୍ ହେଲିକ୍ସ (ହେଲିକ୍ସ ′ ′) ବଣ୍ଡଲ୍ ଉପରେ p ର୍ଦ୍ଧ୍ୱରେ ରଖାଯାଇ ହେଲିକ୍ସ and ଏବଂ with ସହିତ ଏକ ତ୍ରିରଙ୍ଗା ସୃଷ୍ଟି କରେ | ଚିତ୍ର 2a)
4HB N- ଟର୍ମିନାଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରିପ୍ ଚାର୍ଟ |b ଚାରୋଟି ହେଲିକ୍ସର ଏକ ବଣ୍ଡଲ୍ ର ଉପର ଦୃଶ୍ୟ, ପ୍ରତ୍ୟେକ ହେଲିକ୍ସ N- ଟର୍ମିନାସରେ ଗା dark ନୀଳ ଏବଂ ସି-ଟର୍ମିନାସରେ ଗା dark ଲାଲ ଆଲୋକିତ |c 4HB ପାଇଁ ଟପ୍-ଡାଉନ୍ ସ୍ପିରାଲ୍ ଚକ ଚିତ୍ର, ପ୍ରତ୍ୟେକ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶକୁ ଏକ ଅକ୍ଷର ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ କୋଡ୍ ସହିତ ଲେବଲ୍ ହୋଇଥିବା ଏକ ବୃତ୍ତ ଭାବରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି |ଚକ୍ରର ଉପରି ଭାଗରେ ଥିବା ଚାରୋଟି ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ସଂଖ୍ୟାଭୁକ୍ତ |ଅଣ-ପୋଲାର ଅବଶିଷ୍ଟଗୁଡିକ ହଳଦିଆ ରଙ୍ଗର, ପୋଲାର ଚାର୍ଜେଡ୍ ଅବଶିଷ୍ଟଗୁଡିକ ସବୁଜ ରଙ୍ଗର, ସକରାତ୍ମକ ଚାର୍ଜ ହୋଇଥିବା ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶଗୁଡିକ ନୀଳ ରଙ୍ଗର ଏବଂ ନକାରାତ୍ମକ ଭାବରେ ଚାର୍ଜ ହୋଇଥିବା ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶଗୁଡିକ ଲାଲ ରଙ୍ଗର |d 4HB ଡୋମେନ୍ ର ତ୍ରିକୋଣୀୟ ଚେହେରା, କମଳା ରଙ୍ଗରେ 4HB ଏବଂ ସବୁଜ ରଙ୍ଗରେ ହିଙ୍ଗୁଳା |ଉଭୟ ଇନସେଟଗୁଡିକ ରଡ୍ ଆକୃତିର ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ଦେଖାଏ |
4HB ଏକ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ କୋର୍ ଉପରେ ଏକାଗ୍ର ହୋଇଛି ଯାହା ମୁଖ୍ୟତ al ଆଲିଫାଟିକ୍ ଏବଂ ସୁଗନ୍ଧିତ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ (ଚିତ୍ର 2c) କୁ ନେଇ ଗଠିତ |କୋର୍ରେ Cys41 ଏବଂ Cys55 ମଧ୍ୟରେ ଏକ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ରହିଥାଏ ଯାହା ହେଲିକ୍ସ 1 ଏବଂ 2 କୁ ଏକ ଉପର ଉତ୍ତୋଳିତ ତ୍ରିରଙ୍ଗାରେ ସଂଯୋଗ କରିଥାଏ (ଚିତ୍ର 2d) |ହେଲିକ୍ସ in ରେ ଥିବା CXXC ମୋଟିଫ୍ ଏବଂ ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳରେ β- ହେୟାରପିନର ଟିପ୍ (ଚିତ୍ର 2d) ମଧ୍ୟରେ ମିଳିଥିବା ଅନ୍ୟ ଏକ CXXC ମୋଟିଫ୍ ମଧ୍ୟରେ ଦୁଇଟି ଅତିରିକ୍ତ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ଗଠନ କରାଯାଇଥିଲା |ଏକ ଅଜ୍ଞାତ କାର୍ଯ୍ୟ ସହିତ ଏକ ରକ୍ଷଣଶୀଳ ଆର୍ଜିନାଇନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ (Arg37) ହେଲିକ୍ସ 1 ′, 1, ଏବଂ 2 ଦ୍ formed ାରା ଗଠିତ ଏକ ଖାଲ ତ୍ରିରଙ୍ଗା ମଧ୍ୟରେ ଅବସ୍ଥିତ, ଆଲିଫାଟିକ୍ କାର୍ବନ ପରମାଣୁ Cβ, Cγ, ଏବଂ Cδ Arg37 ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ କୋର ସହିତ ପାରସ୍ପରିକ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରିଥାଏ ଏବଂ ଏହାର ଗୁଆନାଇଡାଇନ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ ଚକ୍ରବର୍ତ୍ତୀ ଭାବରେ ଗତି କରନ୍ତି | Thr32 ବ୍ୟାକବୋନ ଏବଂ ପାର୍ଶ୍ୱ ଶୃଙ୍ଖଳା ମଧ୍ୟରେ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ମାଧ୍ୟମରେ ହେଲିକ୍ସ 1 ′ ଏବଂ 1 ମଧ୍ୟରେ (ଚିତ୍ର S5a, b) |Tyr34 ଦୁଇଟି ଛୋଟ ଗୁହାଳ ଛାଡି ଗୁହାଳରେ ବିସ୍ତାରିତ ହୋଇଛି ଯାହା ମାଧ୍ୟମରେ Arg37 ଦ୍ରବଣକାରୀ ସହିତ ଯୋଗାଯୋଗ କରିପାରିବ |
Ig- ପରି sand- ସାଣ୍ଡୱିଚ୍ ଡୋମେନ୍ ଗୁଡିକ ହେଉଛି ପ୍ରୋଟିନ୍ ର ଏକ ବୃହତ ସୁପରଫ୍ୟାମିଲି ଯାହା ଦୁଇ କିମ୍ବା ଅଧିକ ମଲ୍ଟି ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ ଆମ୍ଫିପାଥିକ୍ ସିଟ୍ ର ଏକ ସାଧାରଣ ବ feature ଶିଷ୍ଟ୍ୟକୁ ଏକ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ କୋର ମାଧ୍ୟମରେ ପାରସ୍ପରିକ ଭାବରେ ଅଂଶୀଦାର କରିଥାଏ | ଏବଂ ଦୁଇଟି ସ୍ତର ଧାରଣ କରିଥାଏ (ଚିତ୍ର S6a) |ସିଟ୍ 1 ହେଉଛି ଚାରୋଟି ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡର β- ସିଟ୍ (D, F, H, ଏବଂ I) ଯେଉଁଠାରେ F, H, ଏବଂ ମୁଁ ଏକ ଆଣ୍ଟି-ସମାନ୍ତରାଳ ବ୍ୟବସ୍ଥା ଗଠନ କରେ, ଏବଂ I ଏବଂ D ସମାନ୍ତରାଳ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଗ୍ରହଣ କରେ |ଟେବୁଲ୍ ୨ ହେଉଛି ଏକ ଛୋଟ ଆଣ୍ଟି-ସମାନ୍ତରାଳ ଡବଲ୍-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ ବିଟା ସିଟ୍ (E ଏବଂ G) |ଇ ଶୃଙ୍ଖଳାର C- ଟର୍ମିନାସ୍ ଏବଂ H ଶୃଙ୍ଖଳାର କେନ୍ଦ୍ର (Cys170-Cys226) ମଧ୍ୟରେ ଏକ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ପରିଲକ୍ଷିତ ହୋଇଥିଲା (ଚିତ୍ର S6b) |ଏହି ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ଇମ୍ୟୁନୋଗ୍ଲୋବୁଲିନ 40,41 ର sand- ସ୍ୟାଣ୍ଡୱିଚ୍ ଡୋମେନ୍ରେ ଥିବା ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ସହିତ ସମାନ |
ଚାରି-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ β- ସିଟ୍ ଏହାର ସମଗ୍ର ଦ length ର୍ଘ୍ୟରେ ମୋଡ଼ି ହୋଇ ଅସୀମିତ ଧାର ଗଠନ କରେ ଯାହା ଆକୃତି ଏବଂ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ସରେ ଭିନ୍ନ |ପତଳା ଧାର ହେଉଛି ଏକ ସମତଳ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ପରିବେଶ ପୃଷ୍ଠ ଯାହାକି SPACA6 (ଚିତ୍ର S6b, c) ରେ ଥିବା ଅବଶିଷ୍ଟ ଅସମାନ ଏବଂ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ବିବିଧ ପୃଷ୍ଠଗୁଡ଼ିକ ତୁଳନାରେ ଛିଡା ହୋଇଛି |ଆବିଷ୍କୃତ ବ୍ୟାକବୋନ କାର୍ବନିଲ / ଆମିନୋ ଗୋଷ୍ଠୀ ଏବଂ ପୋଲାର ପାର୍ଶ୍ୱ ଶୃଙ୍ଖଳାର ଏକ ହାଲୋ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ପୃଷ୍ଠକୁ ଘେରି ରହିଥାଏ (ଚିତ୍ର S6c) |ବିସ୍ତୃତ ମାର୍ଜିନ୍ ଏକ କ୍ୟାପଡ୍ ହେଲିକାଲ୍ ସେଗମେଣ୍ଟ୍ ଦ୍ୱାରା ଆଚ୍ଛାଦିତ ହୋଇଛି ଯାହା ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ କୋରର N- ଟର୍ମିନାଲ୍ ଅଂଶକୁ ଅବରୋଧ କରିଥାଏ ଏବଂ F ଚେନ୍ ବ୍ୟାକବୋନର ଖୋଲା ପୋଲାର୍ ଗ୍ରୁପ୍ ସହିତ ତିନୋଟି ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍ ବଣ୍ଡ ସୃଷ୍ଟି କରିଥାଏ (ଚିତ୍ର S6d) |ଏହି ଧାରର ସି-ଟର୍ମିନାଲ୍ ଅଂଶ ଏକ ଆଂଶିକ ଉନ୍ମୋଚିତ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ କୋର୍ ସହିତ ଏକ ବଡ଼ ପକେଟ୍ ଗଠନ କରେ |ଡବଲ୍ ଆର୍ଜିନାଇନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟ ତିନୋଟି ସେଟ୍ (Arg162-Arg221, Arg201-Arg205 ଏବଂ Arg212-Arg214) ଏବଂ ଏକ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ ହିଷ୍ଟିଡାଇନ୍ (His220) (ଚିତ୍ର S6e) ହେତୁ ପକେଟ୍ ସକରାତ୍ମକ ଚାର୍ଜ ଦ୍ୱାରା ଘେରି ରହିଛି |
ହିଙ୍ଗ୍ ଅଞ୍ଚଳ ହେଉଛି ହେଲିକାଲ୍ ଡୋମେନ୍ ଏବଂ ଆଇଗ୍ ପରି ଡୋମେନ୍ ମଧ୍ୟରେ ଏକ କ୍ଷୁଦ୍ର ବିଭାଗ, ଗୋଟିଏ ଆଣ୍ଟିପାରାଲାଲ୍ ତିନି-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ β- ସ୍ତର (A, B ଏବଂ C), ଏକ ଛୋଟ 310 ହେଲିକ୍ସ ଏବଂ ଅନେକ ଲମ୍ବା ରାଣ୍ଡମ ହେଲିକାଲ୍ ସେଗମେଣ୍ଟକୁ ନେଇ ଗଠିତ |(ଚିତ୍ର S7)ହିଙ୍ଗ୍ ଅଞ୍ଚଳରେ କୋଭାଲାଣ୍ଟ ଏବଂ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ଯୋଗାଯୋଗର ଏକ ନେଟୱାର୍କ 4HB ଏବଂ Ig ପରି ଡୋମେନ୍ ମଧ୍ୟରେ ଆଭିମୁଖ୍ୟ ସ୍ଥିର କରିବାକୁ ଦେଖାଯାଏ |ନେଟୱାର୍କକୁ ତିନି ଭାଗରେ ବିଭକ୍ତ କରାଯାଇପାରେ |ପ୍ରଥମ ଭାଗରେ ଦୁଇଟି CXXC ମୋଟିଫ୍ (27CXXC30 ଏବଂ 139CXXC142) ଅନ୍ତର୍ଭୂକ୍ତ ହୋଇଛି ଯାହା ହିଙ୍ଗରେ β- ହେୟାରପିନ ଏବଂ 4HB ରେ 1 ′ ହେଲିକ୍ସ ମଧ୍ୟରେ ଏକ ଯୁଗଳ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ସୃଷ୍ଟି କରେ |ଦ୍ୱିତୀୟ ଭାଗରେ Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ ଏବଂ ହିଙ୍ଗୁ ମଧ୍ୟରେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |ହିଙ୍ଗୁରେ ଥିବା Glu132, Ig ​​ପରି ଡୋମେନ୍ରେ Arg233 ଏବଂ ହିଙ୍ଗରେ Arg135 ସହିତ ଏକ ଲୁଣ ସେତୁ ସୃଷ୍ଟି କରେ |ତୃତୀୟ ଭାଗରେ Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ ଏବଂ ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳ ମଧ୍ୟରେ ଏକ କୋଭାଲାଣ୍ଟ ବଣ୍ଡ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |ଦୁଇଟି ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ (Cys124-Cys147 ଏବଂ Cys128-Cys153) ହିଙ୍ଗ୍ ଲୁପ୍ କୁ ଏକ ଲିଙ୍କର୍ ସହିତ ସଂଯୋଗ କରେ ଯାହା Gln131 ଏବଂ ବ୍ୟାକବୋନ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମ ଗୋଷ୍ଠୀ ମଧ୍ୟରେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଦ୍ୱାରା ସ୍ଥିର ହୋଇଯାଏ, ପ୍ରଥମ Ig ପରି ଡୋମେନ୍ କୁ ପ୍ରବେଶ ଅନୁମତି ଦେଇଥାଏ |ଶୃଙ୍ଖଳା
ପ୍ରୋଟିନ୍ ଡାଟାବେସ୍ 42 ରେ ଷ୍ଟ୍ରକଚରାଲ୍ ସମାନ ରେକର୍ଡ ଖୋଜିବା ପାଇଁ SPACA6 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନ୍ ର ଗଠନ ଏବଂ 4HB ଏବଂ Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ ର ବ୍ୟକ୍ତିଗତ ସଂରଚନା ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା |ଉଚ୍ଚ ଡାଲୀ Z ସ୍କୋର, ଛୋଟ ମାନକ ବିଚ୍ୟୁତି, ଏବଂ ବୃହତ LALI ସ୍କୋର ସହିତ ମ୍ୟାଚ୍ ଚିହ୍ନଟ କରିଥିଲୁ (ପରବର୍ତ୍ତୀଟି ହେଉଛି ଗଠନମୂଳକ ସମାନ ଅବଶିଷ୍ଟ ସଂଖ୍ୟା) |ପୂର୍ଣ୍ଣ ଏକ୍ଟୋଡୋମେନ୍ ସନ୍ଧାନରୁ ପ୍ରଥମ 10 ଟି ହିଟ୍ (ଟେବୁଲ୍ S1) ର ଏକ ଗ୍ରହଣୀୟ Z- ସ୍କୋର> 842 ଥିବାବେଳେ କେବଳ 4HB କିମ୍ବା Ig ପରି ଡୋମେନ୍ ପାଇଁ ଏକ ସନ୍ଧାନ ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ ଏହି ହିଟ୍ଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରୁ ଅଧିକାଂଶ କେବଳ β- ସ୍ୟାଣ୍ଡୱିଚ୍ ସହିତ ଅନୁରୂପ ଥିଲା |ଅନେକ ପ୍ରୋଟିନ୍ରେ ଏକ ସର୍ବବ୍ୟାପୀ ଫୋଲ୍ଡ |ଡାଲୀରେ ସମସ୍ତ ତିନୋଟି ସନ୍ଧାନ କେବଳ ଗୋଟିଏ ଫଳାଫଳ ଫେରିଲା: IZUMO1 |
ଏହା ବହୁ ପୂର୍ବରୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି ଯେ SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ଗଠନମୂଳକ ସମାନତା 7,32,37 ଅଂଶୀଦାର କରନ୍ତି |ଯଦିଓ ଏହି ଦୁଇଟି ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍-ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନଗୁଡିକର ଏକ୍ଟୋଡୋମେନ୍ କେବଳ 21% କ୍ରମ ପରିଚୟ (ଚିତ୍ର S8a) ବାଣ୍ଟିଥାଏ, ଜଟିଳ ପ୍ରମାଣ, ସଂରକ୍ଷିତ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ପ୍ୟାଟର୍ ଏବଂ SPACA6 ରେ ଏକ ପୂର୍ବାନୁମାନିତ ସି-ଟର୍ମିନାଲ୍ Ig- ପରି ଡୋମେନ୍, ଏକ ନିର୍ମାଣ ପାଇଁ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ପ୍ରୟାସକୁ ଅନୁମତି ଦେଲା | ଏକ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ IZUMO1 ବ୍ୟବହାର କରି A SPACA6 ମାଉସ୍ ର ହୋମୋଲୋଜି ମଡେଲ୍ |ଆମର ସଂରଚନା ଏହି ଭବିଷ୍ୟବାଣୀଗୁଡ଼ିକୁ ନିଶ୍ଚିତ କରେ ଏବଂ ସମାନତାର ପ୍ରକୃତ ଡିଗ୍ରୀ ଦେଖାଏ |ବାସ୍ତବରେ, SPACA6 ଏବଂ IZUMO137,43,44 ସଂରଚନା ସମାନ ଦୁଇ-ଡୋମେନ୍ ସ୍ଥାପତ୍ୟ (ଚିତ୍ର S8b) ସମାନ 4HB ଏବଂ ଏକ ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳ ଦ୍ୱାରା ସଂଯୁକ୍ତ Ig- ସ୍ୟାଣ୍ଡୱିଚ୍ ଡୋମେନ୍ ସହିତ ଅଂଶୀଦାର କରିଥାଏ (ଚିତ୍ର S8c) |
IZUMO1 ଏବଂ SPACA6 4HB ର ପାରମ୍ପାରିକ ସ୍ପିରାଲ୍ ବଣ୍ଡଲରୁ ସାଧାରଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଅଛି |ଏଣ୍ଡୋସୋମାଲ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ 45,46 ସହିତ ଜଡିତ SNARE ପ୍ରୋଟିନ୍ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସରେ ମିଳୁଥିବା ସାଧାରଣ 4HB ଗୁଡିକ, ଏକ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ ଅକ୍ଷରେ ଏକ କ୍ରମାଗତ ବକ୍ରତା ବଜାୟ ରଖିବା ପାଇଁ ସମାନ ଭାବରେ ହେଲିକ୍ସ ବ୍ୟବଧାନ କରିଛନ୍ତି | ଏହାର ବିପରୀତରେ, ଉଭୟ IZUMO1 ଏବଂ SPACA6 ରେ ହେଲିକାଲ୍ ଡୋମେନ୍ଗୁଡ଼ିକ ବିକୃତ ବକ୍ରତା ସହିତ ବିକୃତ ହୋଇଥିଲା | ଅସମାନ ପ୍ୟାକିଂ (ଚିତ୍ର S8d) |ହେଲିକ୍ସ 1 ′, 1 ଏବଂ 2 ଦ୍ formed ାରା ଗଠିତ ତ୍ରିରଙ୍ଗା ଦ୍ probably ାରା ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା ଏହି ମୋଡ଼, IZUMO1 ଏବଂ SPACA6 ରେ ରଖାଯାଇଥାଏ ଏବଂ ହେଲିକ୍ସ 1 on ଉପରେ ସମାନ CXXC ମୋଟିଫ୍ ଦ୍ୱାରା ସ୍ଥିର କରାଯାଇଥାଏ |ଅବଶ୍ୟ, SPACA6 (Cys41 ଏବଂ Cys55 ଉପରେ ହେଲିକେଟ୍ 1 ଏବଂ 2 କୁ ସଂଯୋଗ କରୁଥିବା ଅତିରିକ୍ତ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ) ତ୍ରିରଙ୍ଗା ଶିଖରରେ ଏକ ତୀକ୍ଷ୍ଣ ଶିଖ ସୃଷ୍ଟି କରେ, ଯାହା SPACA6 କୁ IZUMO1 ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ମୋଡ଼ାଯାଇଥାଏ, ଅଧିକ ଉଚ୍ଚତା ବିଶିଷ୍ଟ ଗୁହାଳ ତ୍ରିରଙ୍ଗା ସହିତ |ଏହା ସହିତ, IZUMO1 ରେ SPACA6 ରେ ଏହି ଗୁହାଳର କେନ୍ଦ୍ରରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା Arg37 ର ଅଭାବ |ଏହାର ବିପରୀତରେ, IZUMO1 ରେ ଆଲିଫାଟିକ୍ ଏବଂ ସୁଗନ୍ଧିତ ଅବଶିଷ୍ଟଗୁଡିକର ଏକ ସାଧାରଣ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ କୋର୍ ଅଛି |
IZUMO1 ର ଏକ Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ ଅଛି ଯାହା ଏକ ଡବଲ୍-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ଏବଂ ପାଞ୍ଚ-ଷ୍ଟ୍ରେଡ୍ β- ଶୀଟ୍ 43 କୁ ନେଇ ଗଠିତ |IZUMO1 ରେ ଥିବା ଅତିରିକ୍ତ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ SPACA6 ରେ ଥିବା କୋଇଲ୍କୁ ବଦଳାଇଥାଏ, ଯାହା ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡରେ ବ୍ୟାକବୋନ ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍ ବଣ୍ଡକୁ ସୀମିତ କରିବା ପାଇଁ F ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ ସହିତ ଯୋଗାଯୋଗ କରିଥାଏ |ତୁଳନାତ୍ମକ ଏକ ଆକର୍ଷଣୀୟ ବିନ୍ଦୁ ହେଉଛି ଦୁଇଟି ପ୍ରୋଟିନର Ig- ପରି ଡୋମେନଗୁଡିକର ପୂର୍ବାନୁମାନିତ ଭୂପୃଷ୍ଠ ଚାର୍ଜ |IZUMO1 ପୃଷ୍ଠଟି SPACA6 ପୃଷ୍ଠ ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ନକାରାତ୍ମକ ଭାବରେ ଚାର୍ଜ ହୋଇଥାଏ |ଶୁକ୍ରାଣୁ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଆଡକୁ ମୁହାଁଇଥିବା ସି-ଟର୍ମିନାସ୍ ନିକଟରେ ଏକ ଅତିରିକ୍ତ ଚାର୍ଜ ଅବସ୍ଥିତ |SPACA6 ରେ, ସମାନ ଅଞ୍ଚଳଗୁଡିକ ଅଧିକ ନିରପେକ୍ଷ କିମ୍ବା ସକରାତ୍ମକ ଭାବରେ ଚାର୍ଜ କରାଯାଇଥିଲା (ଚିତ୍ର S8e) |ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ଭୂପୃଷ୍ଠ (ପତଳା ଧାର) ଏବଂ SPACA6 ରେ ସକରାତ୍ମକ ଚାର୍ଜ ହୋଇଥିବା ଗର୍ତ୍ତ (ବ୍ୟାପକ ଧାର) IZUMO1 ରେ ନକାରାତ୍ମକ ଭାବରେ ଚାର୍ଜ କରାଯାଏ |
ଯଦିଓ IZUMO1 ଏବଂ SPACA6 ମଧ୍ୟରେ ସମ୍ପର୍କ ଏବଂ ଦ୍ secondary ିତୀୟ ସଂରଚନା ଉପାଦାନଗୁଡିକ ଭଲ ଭାବରେ ସଂରକ୍ଷିତ ହୋଇଛି, Ig- ପରି ଡୋମେନଗୁଡିକର ଗଠନମୂଳକ ଆଲାଇନ୍ମେଣ୍ଟ୍ ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ ଦୁଇଟି ଡୋମେନ୍ ପରସ୍ପର ତୁଳନାରେ ସେମାନଙ୍କର ସାଧାରଣ ଆଭିମୁଖ୍ୟରେ ଭିନ୍ନ (ଚିତ୍ର S9) |IZUMO1 ର ସ୍ପିରାଲ୍ ବଣ୍ଡଲ୍ β- ସ୍ୟାଣ୍ଡୱିଚ୍ ଉପରେ ବକ୍ର ହୋଇ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ ଅକ୍ଷରୁ ପ୍ରାୟ 50 ° ରେ ପୂର୍ବରୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ “ବୁମେରାଙ୍ଗ” ଆକୃତି ସୃଷ୍ଟି କରିଥାଏ |ଏହାର ବିପରୀତରେ, SPACA6 ରେ ଥିବା ହେଲିକାଲ୍ ବିମ୍ ବିପରୀତ ଦିଗରେ ପ୍ରାୟ 10 ° କୁ ted ୁଲି ରହିଥିଲା ​​|ଏହି ଆଭିମୁଖ୍ୟଗୁଡିକର ପାର୍ଥକ୍ୟ ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳରେ ଭିନ୍ନତା ହେତୁ ସମ୍ଭବତ। |ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମ ସ୍ତରରେ, IZUMO1 ଏବଂ SPACA6 ସିଷ୍ଟାଇନ୍, ଗ୍ଲାଇସିନ୍, ଏବଂ ଆସପାର୍ଟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶକୁ ଛାଡି ହିଙ୍ଗରେ ସାମାନ୍ୟ କ୍ରମର ସମାନତା ବାଣ୍ଟିଥାଏ |ଫଳସ୍ୱରୂପ, ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍ ବଣ୍ଡ ଏବଂ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ନେଟୱାର୍କଗୁଡ଼ିକ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଭିନ୍ନ |β- ସିଟ୍ ଦ୍ secondary ିତୀୟ ସଂରଚନା ଉପାଦାନଗୁଡିକ IZUMO1 ଏବଂ SPACA6 ଦ୍ୱାରା ଅଂଶୀଦାର ହୋଇଛି, ଯଦିଓ IZUMO1 ରେ ଶୃଙ୍ଖଳା ବହୁତ ଲମ୍ବା ଏବଂ 310 ହେଲିକ୍ସ (ହେଲିକ୍ସ 5) SPACA6 ପାଇଁ ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର |ଏହି ଭିନ୍ନତା ଦୁଇଟି ଅନ୍ୟ ସମାନ ପ୍ରୋଟିନ୍ ପାଇଁ ବିଭିନ୍ନ ଡୋମେନ୍ ଆଭିମୁଖ୍ୟ ସୃଷ୍ଟି କରେ |
ଆମର ଡାଲି ସର୍ଭର ସନ୍ଧାନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଡାଟାବେସରେ ସଂରକ୍ଷିତ SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ହେଉଛି କେବଳ ଦୁଇଟି ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଭାବରେ ନିର୍ମିତ ସଂରଚନା ଯେଉଁଥିରେ ଏହି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ 4HB ଫୋଲ୍ଡ (ସାରଣୀ S1) ଅଛି |ସମ୍ପ୍ରତି, ଦୀପମାଇଣ୍ଡ (ବର୍ଣ୍ଣମାଳା / ଗୁଗୁଲ୍) ଆଲଫା ଫୋଲ୍ଡକୁ ବିକଶିତ କରିଛି, ଏକ ସ୍ନାୟୁ ନେଟୱାର୍କ ଆଧାରିତ ପ୍ରଣାଳୀ ଯାହା ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମରୁ ପ୍ରୋଟିନର 3D ସଂରଚନାକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ପୂର୍ବାନୁମାନ କରିପାରିବ |ଆମେ SPACA6 ସଂରଚନାକୁ ସମାଧାନ କରିବାର ଅଳ୍ପ ସମୟ ପରେ, ଆଲଫା ଫୋଲ୍ଡ ଡାଟାବେସ୍ ପ୍ରକାଶ ପାଇଲା, ଯାହା ମାନବ ପ୍ରୋଟିମ୍ରେ ଥିବା ସମସ୍ତ ପ୍ରୋଟିନର 98.5% କୁ ଧାରଣ କରିଥାଏ |ଏକ ସନ୍ଧାନ ମଡେଲ ଭାବରେ ଆମର ସମାଧାନ ହୋଇଥିବା SPACA6 ସଂରଚନାକୁ ବ୍ୟବହାର କରି, ଆଲଫାଫୋଲ୍ଡ ମାନବ ପ୍ରୋଟୋମରେ ମଡେଲ ପାଇଁ ଏକ ଗଠନମୂଳକ ହୋମୋଲୋଜି ସନ୍ଧାନ SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ସହିତ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ଗଠନମୂଳକ ସମାନତା ସହିତ ପ୍ରାର୍ଥୀଙ୍କୁ ଚିହ୍ନଟ କଲା |SPACA6 (ଚିତ୍ର S10a) ପୂର୍ବାନୁମାନ କରିବାରେ ଆଲଫା ଫୋଲ୍ଡର ଅବିଶ୍ୱସନୀୟ ସଠିକତାକୁ - ବିଶେଷତ our ଆମର ସମାଧାନ ହୋଇଥିବା ସଂରଚନା (ଚିତ୍ର S10b) ତୁଳନାରେ 1.1 Å rms ଏକ୍ଟୋଡୋମେନ୍ - ଆମେ ନିଶ୍ଚିତ ହୋଇପାରିବା ଯେ ଚିହ୍ନିତ SPACA6 ମ୍ୟାଚ୍ ସଠିକ୍ ହେବାର ସମ୍ଭାବନା ଅଛି |
ପୂର୍ବରୁ, PSI-BLAST IZUMO1 କ୍ଲଷ୍ଟରକୁ ଅନ୍ୟ ତିନୋଟି ଶୁକ୍ରାଣୁ ସହ ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସହିତ ଖୋଜିଥିଲା: IZUMO2, IZUMO3, ଏବଂ IZUMO450 |ଆଲଫାଫୋଲ୍ଡ ପୂର୍ବାନୁମାନ କରିଛି ଯେ ଏହି IZUMO ପରିବାର ପ୍ରୋଟିନ୍ 4HB ଡୋମେନ୍ ରେ IZUMO1 (ଚିତ୍ର 3a ଏବଂ S11) ସହିତ ସମାନ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ପ୍ୟାଟର୍ ସହିତ ଫୋଲ୍ଡ୍ ହୋଇଛି, ଯଦିଓ ସେମାନଙ୍କର ଏକ Ig ପରି ଡୋମେନ୍ ଅଭାବ |ଏହା ଅନୁମାନ କରାଯାଏ ଯେ IZUMO2 ଏବଂ IZUMO3 ହେଉଛି IZUMO1 ପରି ଏକପାଖିଆ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍, ଯେତେବେଳେ IZUMO4 ଗୁପ୍ତ ଥିବା ପରି ଦେଖାଯାଏ |ଗେମେଟ ଫ୍ୟୁଜନରେ IZUMO 2, 3, ଏବଂ 4 ପ୍ରୋଟିନ୍ ର କାର୍ଯ୍ୟ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ହୋଇନାହିଁ |ଶୁକ୍ରାଣୁ ବିକାଶ ସମୟରେ IZUMO3 ଆକ୍ରୋସୋମ ବାୟୋଜେନେସିସରେ ଏକ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରୁଥିବା ଜଣାଶୁଣା ଏବଂ IZUMO ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏକ ଜଟିଳ 50 ଗଠନ କରିବାକୁ ମିଳିଲା |ସ୍ତନ୍ୟପାୟୀ ପ୍ରାଣୀ, ସରୀସୃପ ଏବଂ ଜୀବଜନ୍ତୁମାନଙ୍କରେ IZUMO ପ୍ରୋଟିନର ସଂରକ୍ଷଣ ସୂଚିତ କରେ ଯେ ସେମାନଙ୍କର ସମ୍ଭାବ୍ୟ କାର୍ଯ୍ୟ ଅନ୍ୟ ଜଣାଶୁଣା ଗେମେଟ୍-ଫ୍ୟୁଜନ୍-ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଯେପରିକି DCST1 / 2, SOF1, ଏବଂ FIMP ସହିତ ସମାନ ଅଟେ |
IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ଡୋମେନ୍ ସ୍ଥାପତ୍ୟର ଚିତ୍ର, ଯଥାକ୍ରମେ କମଳା, ସବୁଜ ଏବଂ ନୀଳ ରଙ୍ଗରେ ହାଇଲାଇଟ୍ ହୋଇଥିବା 4HB, ହିଙ୍ଗୁ, ଏବଂ Ig ପରି ଡୋମେନ୍ ସହିତ |IZUMO4 ର ଏକ ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର ସି-ଟର୍ମିନାଲ୍ ଅଞ୍ଚଳ ଅଛି ଯାହା କଳା ଦେଖାଯାଏ |ନିଶ୍ଚିତ ଏବଂ ପୁଟିଭ୍ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡଗୁଡିକ ଯଥାକ୍ରମେ କଠିନ ଏବଂ ବିନ୍ଦୁ ରେଖା ଦ୍ୱାରା ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୁଏ |b IZUMO1 (PDB: 5F4E), SPACA6, IZUMO2 (ଆଲଫା ଫୋଲ୍ଡ DB: AF-Q6UXV1-F1), IZUMO3 (ଆଲଫା ଫୋଲ୍ଡ DB: AF-Q5VZ72-F1), IZUMO4 (ଆଲଫାଫୋଲ୍ଡ DB: AF-Q1ZYL8-F1), DB: AF-Q1ZYL8-F1): AF-Q1ZYL8-F1): AF-Q3KNT9-F1) ସମାନ ରଙ୍ଗ ପରିସରରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି ଯେପରି ପ୍ୟାନେଲ୍ A. ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ମ୍ୟାଜେଣ୍ଟାରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି |TMEM95, IZUMO2 ଏବଂ IZUMO3 ଟ୍ରାନ୍ସମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ହେଲିକ୍ସ ଦେଖାଯାଉନାହିଁ |
IZUMO ପ୍ରୋଟିନ୍ ପରି, ଅନ୍ୟ SPACA ପ୍ରୋଟିନ୍ (ଅର୍ଥାତ୍ SPACA1, SPACA3, SPACA4, SPACA5, ଏବଂ SPACA9) SPACA6 (ଚିତ୍ର S12) ଠାରୁ ଗଠନମୂଳକ ଭାବରେ ଭିନ୍ନ ବୋଲି ଚିନ୍ତା କରାଯାଏ |କେବଳ SPACA9 ର 4HB ଅଛି, କିନ୍ତୁ ଏହାର ସମାନ୍ତରାଳ-ଆଣ୍ଟି-ସମାନ୍ତରାଳ ଆଭିମୁଖ୍ୟ କିମ୍ବା SPACA6 ସହିତ ସମାନ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ହେବାର ଆଶା କରାଯାଏ ନାହିଁ |କେବଳ SPACA1 ର ସମାନ Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ ଅଛି |ଆଲଫା ଫୋଲ୍ଡ ପୂର୍ବାନୁମାନ କରିଛି ଯେ SPACA3, SPACA4 ଏବଂ SPACA5 ର SPACA6 ଅପେକ୍ଷା ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଭିନ୍ନ ଗଠନ ଅଛି |କ Interest ତୁହଳର ବିଷୟ, ଶୁକ୍ରାଣୁ ଏବଂ ଓସାଇଟ୍ ଜୋନା ପେଲୁସିଡା 52 ମଧ୍ୟରେ ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ସୁଗମ କରିବା ପରିବର୍ତ୍ତେ, SPACA4 ଫର୍ଟିଲାଇଜେସନ୍ରେ ଏକ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରୁଥିବା ଜଣାଶୁଣା, କିନ୍ତୁ SPACA6 ଠାରୁ ଅଧିକ ପରିମାଣରେ |
ଆମର ଆଲଫା ଫୋଲ୍ଡ ସନ୍ଧାନ IZUMO1 ଏବଂ SPACA6 4HB, TMEM95 ପାଇଁ ଆଉ ଏକ ମେଳ ପାଇଲା |TMEM95, ଏକକ ଶୁକ୍ରାଣୁ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଟ୍ରାନ୍ସମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍, 32,33 ଅବ୍ଲିଟ୍ ହୋଇଥିବାବେଳେ ପୁରୁଷ ମୂଷାମାନଙ୍କୁ ବନ୍ଧ୍ୟା କରିଥାଏ |TMEM95 ଅଭାବରୁ ଶୁକ୍ରାଣୁରେ ସାଧାରଣ ମର୍ଫୋଲୋଜି, ଗତିଶୀଳତା ଏବଂ ଜୋନା ପେଲୁସିଡା ଭିତରକୁ ପ୍ରବେଶ କରିବା ଏବଂ ଅଣ୍ଡାର ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ସହିତ ବାନ୍ଧିବାର କ୍ଷମତା ଥିଲା, କିନ୍ତୁ ଓସାଇଟ୍ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ସହିତ ଫ୍ୟୁଜ୍ ହୋଇପାରିଲା ନାହିଁ |ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ TMEM95 IZUMO133 ସହିତ ଗଠନମୂଳକ ସମାନତା ବାଣ୍ଟିଥାଏ |ପ୍ରକୃତରେ, ଆଲଫାଫୋଲ୍ଡ ମଡେଲ୍ ନିଶ୍ଚିତ କରିଛି ଯେ TMEM95 ହେଉଛି 4HB, IZUMO1 ଏବଂ SPACA6 ସହିତ ସମାନ ଯୋଡି CXXC ମୋଟିଫ୍ ଏବଂ SPACA6 (ଚିତ୍ର 3a ଏବଂ S11) ରେ ମିଳୁଥିବା ହେଲିକ୍ସ 1 ଏବଂ 2 ମଧ୍ୟରେ ସମାନ ଅତିରିକ୍ତ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ |ଯଦିଓ TMEM95 ରେ ଏକ Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ ଅଭାବ, ଏହାର ଏକ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ପ୍ୟାଟର୍ ସହିତ SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳ (ଚିତ୍ର 3b) ପରି ଏକ ଅଞ୍ଚଳ ଅଛି |ଏହି ପାଣ୍ଡୁଲିପି ପ୍ରକାଶନ ସମୟରେ, ପ୍ରିଣ୍ଟ ପ୍ରିଣ୍ଟ ସର୍ଭର TMEM95 ର ଗଠନ ବିଷୟରେ ଜଣାଇଲା, ଆଲଫା ଫୋଲ୍ଡ 53 ଫଳାଫଳକୁ ନିଶ୍ଚିତ କରେ |TMEM95 SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ସହିତ ଅତ୍ୟନ୍ତ ସମାନ ଏବଂ ଏହା ଆମ୍ଫିବିଆନ୍ (ଚିତ୍ର 4 ଏବଂ S13) ରେ ବିବର୍ତ୍ତନ ଭାବରେ ସଂରକ୍ଷିତ |
PSI-BLAST ସନ୍ଧାନ NCBI SPACA6, IZUMO1-4, TMEM95, DCST1, DCST2, FIMP, ଏବଂ SOF1 ଡାଟାବେସ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଜୀବନ ଗଛରେ ଏହି କ୍ରମର ସ୍ଥିତି ନିର୍ଣ୍ଣୟ କଲା |ଶାଖା ପଏଣ୍ଟଗୁଡିକ ମଧ୍ୟରେ ଦୂରତା ମାପିବା ପାଇଁ ଦେଖାଯାଏ ନାହିଁ |
SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ମଧ୍ୟରେ ଚମତ୍କାର ସାମଗ୍ରିକ ଗଠନମୂଳକ ସମାନତା ସୂଚିତ କରେ ଯେ ସେମାନେ ଏକ ସଂରକ୍ଷିତ ଷ୍ଟ୍ରକଚରାଲ୍ ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ସଦସ୍ୟ ଅଟନ୍ତି ଯେଉଁଥିରେ TMEM95 ଏବଂ IZUMO 2, 3, ଏବଂ 4 ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |ଜଣାଶୁଣା ସଦସ୍ୟ: IZUMO1, SPACA6 ଏବଂ TMEM95 |କାରଣ କେବଳ ଅଳ୍ପ କିଛି ସଦସ୍ୟ Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ ଧାରଣ କରନ୍ତି, IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ହଲମାର୍କ ହେଉଛି 4HB ଡୋମେନ୍, ଯେଉଁଥିରେ ଏହି ସମସ୍ତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ପାଇଁ ସାଧାରଣ ବ features ଶିଷ୍ଟ୍ୟ ରହିଛି: 1) ଆଣ୍ଟି-ସମାନ୍ତରାଳ / ସମାନ୍ତରାଳ ବିକଳ୍ପରେ ବ୍ୟବହୃତ ହେଲିକ୍ସ ସହିତ 4HB କୁଣ୍ଡିତ | । 5a), 2) ବଣ୍ଡଲରେ ଏକ ତ୍ରିକୋଣୀୟ ଚେହେରା ଅଛି ଯାହା ବଣ୍ଡଲ ମଧ୍ୟରେ ଦୁଇଟି ହେଲିକ୍ସ ଏବଂ ଏକ ତୃତୀୟ ଭୂଲମ୍ବ ହେଲିକ୍ସ (ଚିତ୍ର କୀ କ୍ଷେତ୍ର (ଚିତ୍ର 5c)) ଧାରଣ କରିଥାଏ | ରେଡକ୍ସ ସେନ୍ସର ଭାବରେ 54,55,56, ଯେତେବେଳେ IST ପରିବାର ସଦସ୍ୟଙ୍କ ମୋଟିଫ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ଆଇସୋମେରାସ୍ ସହିତ ଜଡିତ ହୋଇପାରେ ଯେପରିକି ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନରେ ERp57 | ଭୂମିକା 57,58 ସହିତ ଜଡିତ |
IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ସଦସ୍ୟମାନେ 4HB ଡୋମେନ୍ ର ତିନୋଟି ଚରିତ୍ରଗତ ବ features ଶିଷ୍ଟ୍ୟ ଦ୍ defined ାରା ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଛି: ସମାନ୍ତରାଳ ଏବଂ ଆଣ୍ଟିପାରାଲେଲ୍ ଆରିଏଣ୍ଟେସନ୍, ବା-ତ୍ରିକୋଣୀୟ ହେଲିକାଲ୍ ବଣ୍ଡଲ୍ ଚେହେରା ଏବଂ ଛୋଟ ଅଣୁଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା ଏକ CXXC ଡବଲ୍ ମୋଟିଫ୍ ମଧ୍ୟରେ ଚାରୋଟି ହେଲିକ୍ସ |) N- ଟର୍ମିନାଲ ହେଲିକ୍ସ (କମଳା) ଏବଂ ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳ β- ହେୟାରପିନ (ସବୁଜ) |
SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ମଧ୍ୟରେ ସମାନତାକୁ ଦେଖି, IZUMO1 କିମ୍ବା JUNO ସହିତ ବାନ୍ଧିବାର ପୂର୍ବର କ୍ଷମତା ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇଥିଲା |ବାୟୋଲାୟର୍ ଇଣ୍ଟରଫେରୋମେଟ୍ରି (BLI) ହେଉଛି ଏକ ଗତିଜ-ଆଧାରିତ ବନ୍ଧନ ପ୍ରଣାଳୀ ଯାହା ପୂର୍ବରୁ IZUMO1 ଏବଂ JUNO ମଧ୍ୟରେ ପାରସ୍ପରିକ ସମ୍ପର୍କକୁ ପରିମାଣ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |IZUMO1 ସହିତ ବାୟୋଟିନ୍-ଲେବଲ୍ ସେନ୍ସର ଇନକ୍ୟୁବେସନ ପରେ, JUNO ଆନାଲିଟ୍ର ଅଧିକ ଏକାଗ୍ରତା ସହିତ ଏକ ବାଇଟ୍ ଭାବରେ, ଏକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ସଙ୍କେତ ଚିହ୍ନଟ ହେଲା (ଚିତ୍ର S14a), ଯାହା ସେନ୍ସର ଟିପ୍ ସହିତ ଲାଗିଥିବା ଜ om ବ ପଦାର୍ଥର ଘନତାରେ ଏକ ବାଧ୍ୟତାମୂଳକ ପରିବର୍ତ୍ତନକୁ ସୂଚାଇଥାଏ |ସମାନ ସଙ୍କେତଗୁଡିକ (ଅର୍ଥାତ୍, JUNO IZUMO1 ଆନାଲିଟ୍ ବିରୁଦ୍ଧରେ ଏକ ଟୋପି ଭାବରେ ସେନ୍ସର ସହିତ ଯୋଡି ହୋଇଗଲା) (ଚିତ୍ର S14b) |ଯେତେବେଳେ SPACA6 ସେନ୍ସର-ବନ୍ଧା IZUMO1 କିମ୍ବା ସେନ୍ସର-ବନ୍ଧା JUNO (ଚିତ୍ର S14a, b) ବିରୁଦ୍ଧରେ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହେଲା, କ No ଣସି ସଙ୍କେତ ଚିହ୍ନଟ ହେଲା ନାହିଁ |ଏହି ସଙ୍କେତର ଅନୁପସ୍ଥିତି ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ SPACA6 ର ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ଡୋମେନ୍ IZUMO1 କିମ୍ବା JUNO ର ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ଡୋମେନ୍ ସହିତ କାର୍ଯ୍ୟ କରେ ନାହିଁ |
କାରଣ BLI ଅନୁଧ୍ୟାନ ବାଇଟ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଉପରେ ମାଗଣା ଲାଇସେନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶର ବାୟୋଟିନାଇଲେସନ୍ ଉପରେ ଆଧାରିତ, ଯଦି ଲାଇସେନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟରେ ଜଡିତ ହୁଏ ତେବେ ଏହି ପରିବର୍ତ୍ତନ ବନ୍ଧନକୁ ରୋକିପାରେ |ଏହା ସହିତ, ସେନ୍ସର ସହିତ ବାନ୍ଧୁଥିବା ଆଭିମୁଖ୍ୟ ଷ୍ଟେରିକ୍ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ସୃଷ୍ଟି କରିପାରିବ, ତେଣୁ ରେକମ୍ବିନାଣ୍ଟ SPACA6, IZUMO1 ଏବଂ JUNO ଏକ୍ଟୋଡୋମେନରେ ପାରମ୍ପାରିକ ପଲ୍-ଡାଉନ୍ ଆସେସ୍ ମଧ୍ୟ କରାଯାଇଥିଲା |ଏହା ସତ୍ତ୍ SP େ, SPACA6 ତାଙ୍କର ଟ୍ୟାଗ୍ ହୋଇଥିବା IZUMO1 କିମ୍ବା His- ଟ୍ୟାଗ୍ ହୋଇଥିବା JUNO (ଚିତ୍ର S14c, d) ସହିତ ପ୍ରବାହିତ ହୋଇନଥିଲା, ଯାହା BLI ପରୀକ୍ଷଣରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା କ action ଣସି ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ସୂଚୀତ କରେ ନାହିଁ |ଏକ ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ, ଆମେ ତାଙ୍କର IZUMO1 (ଚିତ୍ର S14e ଏବଂ S15) ନାମକ JUNO ର ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ନିଶ୍ଚିତ କରିଥିଲୁ |
SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ମଧ୍ୟରେ ଗଠନମୂଳକ ସମାନତା ସତ୍ତ୍, େ, JUNO କୁ ବାନ୍ଧିବାରେ SPACA6 ର ଅକ୍ଷମତା ଆଶ୍ଚର୍ଯ୍ୟଜନକ ନୁହେଁ |ମାନବ IZUMO1 ର ପୃଷ୍ଠରେ 20 ରୁ ଅଧିକ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ ଅଛି ଯାହା JUNO ସହିତ ଯୋଗାଯୋଗ କରିଥାଏ, ତିନୋଟି ଅଞ୍ଚଳର ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶକୁ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରି (ଯଦିଓ ସେମାନଙ୍କ ମଧ୍ୟରୁ ଅଧିକାଂଶ ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳରେ ଅବସ୍ଥିତ) (ଚିତ୍ର S14f) |ଏହି ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶଗୁଡିକ ମଧ୍ୟରୁ କେବଳ ଗୋଟିଏ SPACA6 (Glu70) ରେ ସଂରକ୍ଷିତ |ଯେତେବେଳେ ଅନେକ ଅବଶିଷ୍ଟ ପ୍ରତିସ୍ଥାପନଗୁଡିକ ସେମାନଙ୍କର ମୂଳ ବାୟୋକେମିକାଲ୍ ଗୁଣଗୁଡିକ ବଜାୟ ରଖିଥିଲେ, IZUMO1 ରେ ଅତ୍ୟାବଶ୍ୟକ Arg160 ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶକୁ SPACA6 ରେ ନକାରାତ୍ମକ ଚାର୍ଜ ହୋଇଥିବା Asp148 ଦ୍ୱାରା ବଦଳାଯାଇଥିଲା |ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ IZUMO1 ରେ Arg160Glu ମ୍ୟୁଟେସନ୍ JUNO43 ସହିତ ବାନ୍ଧିବା ପ୍ରାୟତ completely ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ବନ୍ଦ କରିଦିଏ |ଏହା ସହିତ, IZUMO1 ଏବଂ SPACA6 ମଧ୍ୟରେ ଡୋମେନ୍ ଆରିଏଣ୍ଟେସନ୍ରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ SPACA6 (ଚିତ୍ର S14g) ରେ ସମାନ ଅଞ୍ଚଳର JUNO- ବାଇଣ୍ଡ ସାଇଟର ଭୂପୃଷ୍ଠକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ବୃଦ୍ଧି କରିଥିଲା ​​|
ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପାଇଁ SPACA6 ର ଜଣାଶୁଣା ଆବଶ୍ୟକତା ଏବଂ IZUMO1 ସହିତ ଏହାର ସମାନତା ସତ୍ତ୍ SP େ, SPACA6 ର ସମାନ JUNO ବନ୍ଧନ କାର୍ଯ୍ୟ ଥିବା ପରି ଦେଖାଯାଏ ନାହିଁ |ତେଣୁ, ଆମେ ଆମର ଗଠନମୂଳକ ତଥ୍ୟକୁ ବିବର୍ତ୍ତନଶୀଳ ଜୀବବିଜ୍ଞାନ ଦ୍ provided ାରା ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଥିବା ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରମାଣ ସହିତ ମିଶ୍ରଣ କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରିଛୁ |SPACA6 ହୋମୋଲୋଜିଗୁଡିକର କ୍ରମ ଆଲାଇନ୍ମେଣ୍ଟ ସ୍ତନ୍ୟପାୟୀ ପ୍ରାଣୀମାନଙ୍କ ଅପେକ୍ଷା ସାଧାରଣ ସଂରଚନାର ସଂରକ୍ଷଣକୁ ଦର୍ଶାଏ |ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ସିଷ୍ଟାଇନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶଗୁଡିକ ଦୂର ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଆମ୍ଫିବିଆନ୍ମାନଙ୍କରେ ମଧ୍ୟ ଉପସ୍ଥିତ (ଚିତ୍ର 6a) |ConSurf ସର୍ଭର ବ୍ୟବହାର କରି, 66 କ୍ରମର ଏକାଧିକ କ୍ରମ ଆଲାଇନ୍ମେଣ୍ଟ ଧାରଣ ତଥ୍ୟ SPACA6 ପୃଷ୍ଠରେ ମ୍ୟାପ୍ ହୋଇଥିଲା |ଏହି ପ୍ରକାରର ବିଶ୍ଳେଷଣ ଦର୍ଶାଇପାରେ ଯେ ପ୍ରୋଟିନ୍ ବିବର୍ତ୍ତନ ସମୟରେ କେଉଁ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ ସଂରକ୍ଷିତ ହୋଇଛି ଏବଂ କେଉଁ ଭୂପୃଷ୍ଠ ଅଞ୍ଚଳ କାର୍ଯ୍ୟରେ ଏକ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିଥାଏ ତାହା ସୂଚିତ କରିପାରିବ |
CLUSTAL OMEGA ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରସ୍ତୁତ 12 ଟି ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରଜାତିର SPACA6 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନର ଏକ କ୍ରମ ଆଲାଇନ୍ମେଣ୍ଟ |କନସର୍ଫ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଅନୁଯାୟୀ, ଅଧିକାଂଶ ରକ୍ଷଣଶୀଳ ପଦବୀ ନୀଳ ରଙ୍ଗରେ ଚିହ୍ନିତ ହୋଇଛି |ସିଷ୍ଟାଇନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶଗୁଡିକ ଲାଲ ରଙ୍ଗରେ ହାଇଲାଇଟ୍ ହୋଇଛି |ଡୋମେନ୍ ସୀମା ଏବଂ ଦ୍ secondary ିତୀୟ ସଂରଚନା ଉପାଦାନଗୁଡିକ ଆଲାଇନ୍ମେଣ୍ଟର ଉପରି ଭାଗରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି, ଯେଉଁଠାରେ ତୀରଗୁଡ଼ିକ β- ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ ଏବଂ ତରଙ୍ଗ ହେଲିକ୍ସ ସୂଚାଇଥାଏ |କ୍ରମ ଧାରଣ କରିଥିବା NCBI ଆକ୍ସେସ୍ ଆଇଡେଣ୍ଟିଫାୟର୍ସ ହେଉଛି: ମାନବ (ହୋମୋ ସାପିଏନ୍ସ, NP_001303901), ମାଣ୍ଡ୍ରିଲ୍ (ମାଣ୍ଡ୍ରିଲସ୍ ଲ୍ୟୁକୋଫାୟସ୍, XP_011821277), କାପୁଚିନ୍ ମାଙ୍କଡ଼ (ସେବସ୍ ମିମିକ୍, XP_017359366), ଘୋଡା (ଇକ୍ୟୁସ୍ କ୍ୟାବାଲସ୍, XP_02350610 34) |), ମେଣ୍ (ା (Ovis aries, XP_014955560), ହାତୀ (Loxodonta africana, XP_010585293), କୁକୁର (Canis lupus familyis, XP_025277208), ମାଉସ୍ , 61_89 ଏବଂ ବୁଲଫ୍ରୋଗ୍ (ବୁଫୋ ବୁଫୋ, XP_040282113) |ସଂଖ୍ୟାକରଣ ମାନବ କ୍ରମ ଉପରେ ଆଧାରିତ |b ଉପରେ 4HB ଏବଂ ନିମ୍ନରେ Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ ସହିତ SPACA6 ସଂରଚନାର ସର୍ଫେସ୍ ଉପସ୍ଥାପନା, କନସର୍ଫ ସର୍ଭରରୁ ସଂରକ୍ଷଣ ଆକଳନ ଉପରେ ଆଧାର କରି ରଙ୍ଗ |ସର୍ବୋତ୍ତମ ସଂରକ୍ଷିତ ଅଂଶଗୁଡିକ ନୀଳ ରଙ୍ଗରେ, ମଧ୍ୟମ ଭାବରେ ସଂରକ୍ଷିତ ଅଂଶଗୁଡିକ ଧଳା ଏବଂ ସର୍ବନିମ୍ନ ସଂରକ୍ଷିତ ଅଂଶଗୁଡିକ ହଳଦିଆ ରଙ୍ଗର |ବାଇଗଣୀ ସିଷ୍ଟାଇନ୍ |ଏକ ଉଚ୍ଚ ସ୍ତରର ସୁରକ୍ଷା ପ୍ରଦର୍ଶନ କରୁଥିବା ତିନୋଟି ଭୂପୃଷ୍ଠ ପ୍ୟାଚ୍ ଇନସେଟରେ ଲେବଲ୍ ହୋଇଥିବା ପ୍ୟାଚ୍ 1, 2 ଏବଂ 3 ରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି | ଏକ 4HB କାର୍ଟୁନ୍ ଉପର ଡାହାଣରେ ଥିବା ଇନସେଟରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି (ସମାନ ରଙ୍ଗ ସ୍କିମ୍) |
SPACA6 ସଂରଚନାରେ ତିନୋଟି ଅତ୍ୟଧିକ ସଂରକ୍ଷିତ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ଅଛି (ଚିତ୍ର 6 ବି) |ପ୍ୟାଚ୍ 1 4HB ଏବଂ ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳ ବିସ୍ତାର କରେ ଏବଂ ଏଥିରେ ଦୁଇଟି ସଂରକ୍ଷିତ CXXC ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବ୍ରିଜ୍, ଏକ Arg233-Glu132-Arg135-Ser144 ହିଙ୍ଗ୍ ନେଟୱାର୍କ (ଚିତ୍ର S7) ଏବଂ ତିନୋଟି ସଂରକ୍ଷିତ ବାହ୍ୟ ସୁଗନ୍ଧିତ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ (Phe31, Tyr73, Phe137) ରହିଥାଏ |Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ ର ଏକ ବିସ୍ତୃତ ରିମ୍ (ଚିତ୍ର S6e), ଯାହା ଶୁକ୍ରାଣୁ ପୃଷ୍ଠରେ ଅନେକ ସକାରାତ୍ମକ ଚାର୍ଜିତ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ |କ Interest ତୁହଳର ବିଷୟ, ଏହି ପ୍ୟାଚରେ ଏକ ଆଣ୍ଟିବଡି ଏପିଟୋପ୍ ଥାଏ ଯାହାକି ପୂର୍ବରୁ SPACA6 30 କାର୍ଯ୍ୟରେ ବାଧା ସୃଷ୍ଟି କରିବାକୁ ଦର୍ଶାଯାଇଥିଲା |ଅଞ୍ଚଳ 3 ହିଙ୍ଗୁଳା ଏବଂ Ig ପରି ଡୋମେନ୍ ର ଗୋଟିଏ ପାର୍ଶ୍ୱକୁ ବିସ୍ତାର କରେ;ଏହି ଅଞ୍ଚଳରେ ସଂରକ୍ଷିତ ପ୍ରୋଲାଇନ୍ସ (Pro126, Pro127, Pro150, Pro154) ଏବଂ ବାହ୍ୟ ମୁହାଁ ପୋଲାର / ଚାର୍ଜ ଅବଶିଷ୍ଟ ରହିଥାଏ |ଆଶ୍ଚର୍ଯ୍ୟର ବିଷୟ, 4HB ପୃଷ୍ଠରେ ଥିବା ଅଧିକାଂଶ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶଗୁଡିକ ଅତ୍ୟଧିକ ପରିବର୍ତ୍ତନଶୀଳ (ଚିତ୍ର 6b), ଯଦିଓ ଫୋଲ୍ଡଟି SPACA6 ହୋମୋଲୋଜିରେ ସଂରକ୍ଷିତ (ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ବଣ୍ଡଲ୍ କୋରର ରକ୍ଷଣଶୀଳତା ଦ୍ୱାରା ସୂଚିତ) ଏବଂ IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲି ବାହାରେ |
ଯଦିଓ ଏହା SPACA6 ର ସବୁଠାରୁ କ୍ଷୁଦ୍ରତମ ଅଞ୍ଚଳ ଯାହାକି ସର୍ବନିମ୍ନ ଚିହ୍ନଟ ଯୋଗ୍ୟ ଦଳୀୟ ସଂରଚନା ଉପାଦାନ ସହିତ, ଅନେକ ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳର ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶଗୁଡିକ (ଅଞ୍ଚଳ 3 ଅନ୍ତର୍ଭୂକ୍ତ କରି) SPACA6 ହୋମୋଲୋଜ୍ ମଧ୍ୟରେ ଅତ୍ୟଧିକ ସଂରକ୍ଷିତ, ଯାହା ସୂଚାଇପାରେ ଯେ ହେଲିକାଲ୍ ବଣ୍ଡଲ୍ ଏବଂ β- ସ୍ୟାଣ୍ଡୱିଚ୍ ର ଆଭିମୁଖ୍ୟ ଏକ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିଥାଏ |ରକ୍ଷଣଶୀଳ ଭାବରେ |ତଥାପି, SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ର ହିଙ୍ଗ୍ ଅଞ୍ଚଳରେ ବ୍ୟାପକ ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍ ବଣ୍ଡିଂ ଏବଂ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ନେଟୱାର୍କ ସତ୍ତ୍ I େ, IZUMO137,43,44 ର ଏକାଧିକ ଅନୁମତିପ୍ରାପ୍ତ ସଂରଚନାଗୁଡ଼ିକର ଆଲାଇନ୍ମେଣ୍ଟରେ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ନମନୀୟତାର ପ୍ରମାଣ ଦେଖିବାକୁ ମିଳେ |ବ୍ୟକ୍ତିଗତ ଡୋମେନଗୁଡିକର ଶ୍ରେଣୀବଦ୍ଧତା ଭଲ ଭାବରେ ଅଲଗା ହୋଇଗଲା, କିନ୍ତୁ ପରସ୍ପର ସହିତ ଥିବା ଡୋମେନଗୁଡିକର ଆଭିମୁଖ୍ୟ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ ଅକ୍ଷରୁ 50 ° ରୁ 70 ° ମଧ୍ୟରେ ଭିନ୍ନ ହେଲା (ଚିତ୍ର S16) |ସମାଧାନରେ SPACA6 ର ଗଠନମୂଳକ ଗତିଶୀଳତାକୁ ବୁ To ିବାକୁ, SAXS ପରୀକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା (ଚିତ୍ର S17a, b) |SPACA6 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନର ଅବ ଇନିଟିଓ ପୁନ struction ନିର୍ମାଣ ଏକ ରଡ୍ ସ୍ଫଟିକ୍ ସଂରଚନା (ଚିତ୍ର S18) ସହିତ ଅନୁରୂପ ଥିଲା, ଯଦିଓ କ୍ରାଟକି ପ୍ଲଟ୍ କିଛି ମାତ୍ରାରେ ନମନୀୟତା ଦେଖାଇଲା (ଚିତ୍ର S17b) |ଏହି ରୂପାନ୍ତର IZUMO1 ସହିତ ଭିନ୍ନ ଅଟେ, ଯେଉଁଥିରେ ଅବିଭକ୍ତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଉଭୟ ଲାଟାଇସ୍ ଏବଂ ସମାଧାନରେ ବୁମେରାଙ୍ଗ ଆକୃତି ଅନୁମାନ କରିଥାଏ |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଭାବରେ ନମନୀୟ ଅଞ୍ଚଳକୁ ଚିହ୍ନଟ କରିବାକୁ, ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍-ଡ୍ୟୁଟେରିୟମ୍ ଏକ୍ସଚେଞ୍ଜ୍ ମାସ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରସ୍କୋପି (H-DXMS) SPACA6 ରେ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଏହା ପୂର୍ବରୁ IZUMO143 (ଚିତ୍ର 7a, b) ରେ ପ୍ରାପ୍ତ ତଥ୍ୟ ସହିତ ତୁଳନା କରାଯାଇଥିଲା |IZUMO1 ଅପେକ୍ଷା SPACA6 ସ୍ପଷ୍ଟ ଭାବରେ ଅଧିକ ନମନୀୟ, ଯେହେତୁ 100,000 s ବିନିମୟ ପରେ ସଂରଚନାରେ ଉଚ୍ଚ ଡିୟୁଟେରିୟମ୍ ବିନିମୟ ଦ୍ୱାରା ଏହା ପ୍ରମାଣିତ |ଉଭୟ ସଂରଚନାରେ, ହିଙ୍ଗୁ ଅଞ୍ଚଳର ସି-ଟର୍ମିନାଲ୍ ଅଂଶ ଏକ ଉଚ୍ଚ ସ୍ତରର ବିନିମୟ ଦେଖାଏ, ଯାହା ବୋଧହୁଏ ପରସ୍ପର ସହିତ 4HB ଏବଂ Ig ପରି ଡୋମେନ୍ ର ସୀମିତ ଘୂର୍ଣ୍ଣନକୁ ଅନୁମତି ଦେଇଥାଏ |କ Interest ତୁହଳର ବିଷୟ, 147CDLPLDCP154 ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶକୁ ନେଇ SPACA6 ହିଙ୍ଗର ସି-ଟର୍ମିନାଲ୍ ଅଂଶ, ଏକ ଅତ୍ୟଧିକ ସଂରକ୍ଷିତ ଅଞ୍ଚଳ 3 (ଚିତ୍ର 6b), ସମ୍ଭବତ ind ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ ଆନ୍ତ d ରାଜ୍ୟ ନମନୀୟତା SPACA6 ର ଏକ ବିବର୍ତ୍ତନ ଭାବରେ ସଂରକ୍ଷିତ ବ feature ଶିଷ୍ଟ୍ୟ |ନମନୀୟତା ବିଶ୍ଳେଷଣ ଅନୁଯାୟୀ, ସିଡି ଥର୍ମାଲ୍ ତରଳ ତଥ୍ୟ ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ IZUMO1 (Tm = 62.9 ° C) (ଚିତ୍ର S1e ଏବଂ S19) ଅପେକ୍ଷା SPACA6 (Tm = 51.2 ° C) କମ୍ ସ୍ଥିର ଅଟେ |
SPACA6 ଏବଂ b IZUMO1 ର ଏକ H-DXMS ପ୍ରତିଛବି |ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ସମୟ ପଏଣ୍ଟରେ ଶତକଡ଼ା ଡ୍ୟୁଟେରିୟମ୍ ବିନିମୟ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା |ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍-ଡ୍ୟୁଟେରିୟମ୍ ବିନିମୟର ସ୍ତରଗୁଡିକ ନୀଳ (10%) ରୁ ଲାଲ୍ (90%) ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ସ୍କେଲରେ ରଙ୍ଗ ଦ୍ୱାରା ସୂଚିତ କରାଯାଇଛି |କଳା ବାକ୍ସଗୁଡ଼ିକ ଉଚ୍ଚ ବିନିମୟର କ୍ଷେତ୍ରଗୁଡିକ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ |ସ୍ଫଟିକ୍ ସଂରଚନାରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା 4HB, ହିଙ୍ଗୁ ଏବଂ ଆଇଗ୍ ପରି ଡୋମେନ୍ ର ସୀମା ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମ ଉପରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି |10 s, 1000 s, ଏବଂ 100,000 s ରେ ଡ୍ୟୁଟେରିୟମ୍ ବିନିମୟ ସ୍ତର SPACA6 ଏବଂ IZUMO1 ର ସ୍ୱଚ୍ଛ ମଲିକୁଲାର ପୃଷ୍ଠରେ ସୁପରମିଡ୍ ହୋଇଥିବା ଏକ ଷ୍ଟ୍ରିପ୍ ଚାର୍ଟରେ ଷଡଯନ୍ତ୍ର କରାଯାଇଥିଲା |% ୦% ରୁ କମ୍ ଡିୟୁଟେରିୟମ୍ ବିନିମୟ ସ୍ତର ସହିତ ସଂରଚନାର ଅଂଶଗୁଡ଼ିକ ଧଳା ରଙ୍ଗର |50% H-DXMS ବିନିମୟ ଉପରେ ଥିବା କ୍ଷେତ୍ରଗୁଡିକ ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ସ୍କେଲରେ ରଙ୍ଗୀନ |
CRISPR / Cas9 ଏବଂ ମାଉସ୍ ଜିନ୍ ନକ୍ଆଉଟ୍ ଜେନେଟିକ୍ ରଣନୀତିର ବ୍ୟବହାର ଶୁକ୍ରାଣୁ ଏବଂ ଅଣ୍ଡା ବନ୍ଧନ ଏବଂ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପାଇଁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଅନେକ କାରଣ ଚିହ୍ନଟ କରିପାରିଛି |IZUMO1-JUNO ଏବଂ CD9 ସଂରଚନାର ସୁ-ବର୍ଣ୍ଣିତ ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟ ବ୍ୟତୀତ, ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ସହିତ ଜଡିତ ଅଧିକାଂଶ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଗଠନମୂଳକ ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମ ଭାବରେ ଚିତ୍ତାକର୍ଷକ ରହିଥାଏ |SPACA6 ର ବାୟୋଫିଜିକାଲ୍ ଏବଂ ଗଠନମୂଳକ ଚରିତ୍ରକରଣ ହେଉଛି ଫର୍ଟିଲାଇଜେସନ୍ ସମୟରେ ଆଡେସିନ୍ / ଫ୍ୟୁଜନ୍ ମଲିକୁଲାର ପଜଲ୍ ର ଅନ୍ୟ ଏକ ଅଂଶ |
SPACA6 ଏବଂ IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ଅନ୍ୟ ସଦସ୍ୟମାନେ ସ୍ତନ୍ୟପାୟୀ ପ୍ରାଣୀ ତଥା ବ୍ୟକ୍ତିଗତ ପକ୍ଷୀ, ସରୀସୃପ ଏବଂ ଜୀବଜନ୍ତୁମାନଙ୍କରେ ଅତ୍ୟଧିକ ସଂରକ୍ଷିତ ଥିବା ପରି ଦେଖାଯାଏ;ପ୍ରକୃତରେ, ଏହା ଚିନ୍ତା କରାଯାଏ ଯେ ଜେବ୍ରାଫିସ୍ 59 ରେ ଫର୍ଟିଲାଇଜେସନ୍ ପାଇଁ SPACA6 ମଧ୍ୟ ଆବଶ୍ୟକ | ଏହି ବଣ୍ଟନ ଅନ୍ୟ ଜଣାଶୁଣା ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍-ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସହିତ ସମାନ, ଯେପରିକି DCST134, DCST234, FIMP31, ଏବଂ SOF132, ଏହି କାରଣଗୁଡିକ HAP2- ଅଭାବ ବୋଲି ମଧ୍ୟ ସୂଚିତ କରେ | GCS1 ଭାବରେ ଜଣାଶୁଣା) ପ୍ରୋଟିନ୍ ଯାହା ଅନେକ ବିରୋଧୀଙ୍କ ଅନୁଗାମୀ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ପାଇଁ ଦାୟୀ |, ଉଦ୍ଭିଦ ଏବଂ ଆର୍ଥ୍ରୋପୋଡ୍ |ଫର୍ଟିଲାଇଜଡ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ 60, 61।ଅଧିକ ବିସ୍ତୃତ ଭାବରେ, ଫ୍ୟୁଜନର ଆଡେସିନ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ଜଣାଶୁଣା ଶୁକ୍ରାଣୁ ପ୍ରୋଟିନ୍ ମଧ୍ୟରୁ କ red ଣସିଟି ଅନାବଶ୍ୟକ ନୁହେଁ |
ଏହା ଏକ ଖୋଲା ପ୍ରଶ୍ନ ହୋଇ ରହିଥାଏ କି SPACA6 (ଏବଂ IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ଅନ୍ୟ ସଦସ୍ୟମାନେ) ଇଣ୍ଟରଗାମେଟିକ୍ ଜଙ୍କସନ୍ରେ ଅଂଶଗ୍ରହଣ କରନ୍ତି, ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପଏଣ୍ଟରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରୋଟିନ୍ ନିଯୁକ୍ତ କରିବା ପାଇଁ ଇଣ୍ଟ୍ରାଗାମେଟିକ୍ ନେଟୱାର୍କ ଗଠନ କରନ୍ତି, କିମ୍ବା ବୋଧହୁଏ ଫ୍ୟୁଜେନ୍ସ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରନ୍ତି |HEK293T କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ସହ-ପ୍ରତିରୋପଣ ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ ପୂର୍ଣ୍ଣ ଦ length ର୍ଘ୍ୟ IZUMO1 ଏବଂ SPACA632 ମଧ୍ୟରେ ଏକ ପାରସ୍ପରିକ ସମ୍ପର୍କକୁ ପ୍ରକାଶ କଲା |ଅବଶ୍ୟ, ଆମର ରେକମ୍ବିନାଣ୍ଟ ଏକ୍ଟୋଡୋମେନଗୁଡିକ ଭିଟ୍ରୋରେ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା କରିନଥିଲେ, ନୋଡା ଇତ୍ୟାଦିରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ସୂଚିତ କରେ |ଉଭୟ ନିର୍ମାଣରେ ବିଲୋପ କରାଯାଇଥିଲା (IZUMO1 ର ସାଇଟୋପ୍ଲାଜାମିକ୍ ଲାଞ୍ଜକୁ ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ, ଯାହା ଫର୍ଟିଲାଇଜେସନ୍ ପାଇଁ ଅନାବଶ୍ୟକ ବୋଲି ଦର୍ଶାଯାଇଛି 62) |ବ ly କଳ୍ପିକ ଭାବରେ, IZUMO1 ଏବଂ / କିମ୍ବା SPACA6 ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବନ୍ଧନ ପରିବେଶ ଆବଶ୍ୟକ କରିପାରନ୍ତି ଯାହାକୁ ଆମେ ଭିଟ୍ରୋରେ ପୁନ oduc ଉତ୍ପାଦନ କରୁନାହୁଁ, ଯେପରିକି ଶାରୀରିକ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଗଠନ କିମ୍ବା ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଧାରଣ କରିଥିବା ମଲିକୁଲାର କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ (ଜଣାଶୁଣା କିମ୍ବା ଏପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଆବିଷ୍କୃତ ହୋଇନାହିଁ) |ଯଦିଓ IZUMO1 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନ ପେରିଭାଇଟେଲାଇନ୍ ସ୍ପେସରେ ଅଣ୍ଡା ସହିତ ଶୁକ୍ରାଣୁ ସଂଲଗ୍ନର ମଧ୍ୟସ୍ଥତା ବୋଲି ବିଶ୍ believed ାସ କରାଯାଏ, SPACA6 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନର ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ଅସ୍ପଷ୍ଟ |
SPACA6 ର ସଂରଚନା ଅନେକ ସଂରକ୍ଷିତ ପୃଷ୍ଠଗୁଡିକୁ ପ୍ରକାଶ କରିଥାଏ ଯାହା ପ୍ରୋଟିନ୍-ପ୍ରୋଟିନ୍ ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟରେ ଜଡିତ ହୋଇପାରେ |ହିଙ୍ଗ୍ ଅଞ୍ଚଳର ସଂରକ୍ଷିତ ଅଂଶ ତୁରନ୍ତ CXXC ମୋଟିଫ୍ ସହିତ ସଂଲଗ୍ନ ହୋଇଛି (ଉପରେ ନିର୍ମିତ ପ୍ୟାଚ୍ 1) ଅନେକ ବାହ୍ୟ ମୁହାଁ ସୁଗନ୍ଧିତ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ ଅଛି ଯାହା ବାୟୋମୋଲ୍ୟୁକୁଲ୍ ମଧ୍ୟରେ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ଏବଂ π- ଷ୍ଟାକିଂ ପାରସ୍ପରିକ ସମ୍ପର୍କ ସହିତ ଜଡିତ |Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ (ଅଞ୍ଚଳ 2) ର ବିସ୍ତୃତ ପାର୍ଶ୍ highly ଗୁଡ଼ିକ ଅତ୍ୟଧିକ ସଂରକ୍ଷିତ ଆର୍ଗ ଏବଂ ତାଙ୍କର ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ ସହିତ ଏକ ସକରାତ୍ମକ ଚାର୍ଜ ହୋଇଥିବା ଖୋଳା ସୃଷ୍ଟି କରେ ଏବଂ ଏହି ଅଞ୍ଚଳ ବିରୁଦ୍ଧରେ ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡିକ ପୂର୍ବରୁ ଗେମେଟ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ 30 କୁ ଅବରୋଧ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |ଆଣ୍ଟିବଡି ର line ଖ୍ୟ ଏପିଟୋପ୍ 212RIRPAQLTHRGTFS225 କୁ ଚିହ୍ନିଥାଏ, ଯେଉଁଥିରେ six ଟି ଆର୍ଜିନାଇନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ ମଧ୍ୟରୁ ତିନୋଟି ଅଛି ଏବଂ His220 ଅତ୍ୟଧିକ ସଂରକ୍ଷିତ |ଏହି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶଗୁଡିକ କିମ୍ବା ସମଗ୍ର ଅଞ୍ଚଳ ଅବରୋଧ ହେତୁ ଏହି ଅସୁବିଧା ସ୍ପଷ୍ଟ ନୁହେଁ |ଏହି ଫାଙ୍କର ଅବସ୍ଥାନ β- ସ୍ୟାଣ୍ଡୱିଚ୍ ର ସି-ଟର୍ମିନାସ୍ ନିକଟରେ ପଡୋଶୀ ଶୁକ୍ରାଣୁ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସହିତ ସିସ୍-ପାରସ୍ପରିକ ସମ୍ପର୍କକୁ ସୂଚିତ କରେ, କିନ୍ତୁ ଓସାଇଟ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସହିତ ନୁହେଁ |ଅଧିକନ୍ତୁ, ହିଙ୍ଗୁଳା ମଧ୍ୟରେ ଏକ ଅତ୍ୟଧିକ ନମନୀୟ ପ୍ରୋଲାଇନ୍-ସମୃଦ୍ଧ ଟାଙ୍ଗଲ୍ (ସାଇଟ୍)) ର ସଂରକ୍ଷଣ ଏକ ପ୍ରୋଟିନ୍-ପ୍ରୋଟିନ୍ ପାରସ୍ପରିକ ପାରସ୍ପରିକ ସ୍ଥାନ ହୋଇପାରେ କିମ୍ବା ଅଧିକ ସମ୍ଭାବନା, ଦୁଇଟି ଡୋମେନ୍ ମଧ୍ୟରେ ନମନୀୟତା ବଜାୟ ରଖିବା ସୂଚାଇଥାଏ |SPACA6 ର ଅଜ୍ଞାତ ଭୂମିକା ପାଇଁ ଲିଙ୍ଗ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ |ଗ୍ୟାମେଟର ମିଶ୍ରଣ |
SPACA6 ରେ ଇଣ୍ଟରସେଲୁଲାର୍ ଆଡେସିନ୍ ପ୍ରୋଟିନର ଗୁଣ ଅଛି, Ig- ପରି sand- ସାଣ୍ଡୱିଚ୍ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରି |ଅନେକ ଆଡେସିଭ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ (ଯଥା, କ୍ୟାଡେରିନ୍, ଇଣ୍ଟିଗ୍ରିନ୍ସ, ଆଡେସିନ୍, ଏବଂ IZUMO1) ଗୋଟିଏ କିମ୍ବା ଅଧିକ β- ସାଣ୍ଡୱିଚ୍ ଡୋମେନ୍ ଧାରଣ କରିଥାଏ ଯାହାକି କୋଷର ମେମ୍ବ୍ରାନରୁ ପ୍ରୋଟିନ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ସେମାନଙ୍କ ପରିବେଶ ଲକ୍ଷ୍ୟ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ 63,64,65 ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବିସ୍ତାର କରିଥାଏ |SPACA6 ର Ig- ପରି ଡୋମେନ୍ ମଧ୍ୟ ଏକ ମୋଟିଫ୍ ଧାରଣ କରିଥାଏ ଯାହାକି ସାଧାରଣତ ad ଆଡିଶିନ୍ ଏବଂ ମିଳନ ର sand- ସ୍ୟାଣ୍ଡୱିଚ୍ ରେ ମିଳିଥାଏ: β- ସ୍ୟାଣ୍ଡୱିଚ୍ ଶେଷରେ ସମାନ୍ତରାଳ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡର ଦୁଇଗୁଣ, ଯାନ୍ତ୍ରିକ କ୍ଲମ୍ପ୍ସ 66 ଭାବରେ ଜଣାଶୁଣା |ବିଶ୍ mot ାସ କରାଯାଏ ଯେ ଏହି ମୋଟିଫ୍ ଶିଅର୍ ଫୋର୍ସ ପ୍ରତିରୋଧକୁ ବ increases ାଇଥାଏ, ଯାହା ଆନ୍ତ inter- ପାରସ୍ପରିକ ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟରେ ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ପାଇଁ ମୂଲ୍ୟବାନ ଅଟେ |ଅବଶ୍ୟ, ଆଡେସିନ୍ ସହିତ ଏହି ସମାନତା ସତ୍ତ୍ SP େ, SPACA6 ଅଣ୍ଡାର ଧଳା ରଙ୍ଗ ସହିତ କଥାବାର୍ତ୍ତା କରିବାର କ evidence ଣସି ପ୍ରମାଣ ନାହିଁ |SPACA6 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନ୍ JUNO ସହିତ ବାନ୍ଧିବାରେ ଅସମର୍ଥ, ଏବଂ SPACA6- ଅଭିବ୍ୟକ୍ତ HEK293T କୋଷଗୁଡ଼ିକ, ଏଠାରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ଜୋନା 32 ର ଅଭାବ ଥିବା ଓସାଇଟ୍ ସହିତ କ inter ଣସି ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା କରିଥାଏ |ଯଦି SPACA6 ଇଣ୍ଟରଗାମେଟିକ୍ ବଣ୍ଡ ପ୍ରତିଷ୍ଠା କରେ, ତେବେ ଏହି ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ପରବର୍ତ୍ତୀ ଅନୁବାଦ ଆବଶ୍ୟକ କିମ୍ବା ଅନ୍ୟ ଶୁକ୍ରାଣୁ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଦ୍ୱାରା ସ୍ଥିର ହୋଇପାରେ |ପରବର୍ତ୍ତୀ ଅନୁମାନକୁ ସମର୍ଥନ କରି, IZUMO1- ଅଭାବୀ ସ୍ପର୍ମାଟୋଜୋଆ ଓସାଇଟ୍ ସହିତ ବାନ୍ଧେ, ଏହା ଦର୍ଶାଏ ଯେ IZUMO1 ବ୍ୟତୀତ ଅଣୁଗୁଡ଼ିକ ଗେମେଟ୍ ଆଡେସିନ୍ ଷ୍ଟେପ୍ 27 ରେ ଜଡିତ |
ଅନେକ ଭାଇରାଲ୍, ସେଲୁଲାର୍ ଏବଂ ଡେଭଲପମେଣ୍ଟାଲ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ଗୁଡ଼ିକର ଗୁଣ ଅଛି ଯାହା ଫ୍ୟୁଜେନ୍ସ ଭାବରେ ସେମାନଙ୍କର କାର୍ଯ୍ୟକୁ ପୂର୍ବାନୁମାନ କରିଥାଏ |ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଭାଇରାଲ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ଗ୍ଲାଇକୋପ୍ରୋଟେନ୍ (ଶ୍ରେଣୀ I, II ଏବଂ III) ରେ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ କିମ୍ବା ଲୁପ୍ ଥାଏ ଯାହା ପ୍ରୋଟିନ୍ ଶେଷରେ ହୋଷ୍ଟ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ରେ ଭର୍ତ୍ତି କରାଯାଇଥାଏ |IZUMO143 ର ହାଇଡ୍ରୋଫିଲିସିଟି ମାନଚିତ୍ର ଏବଂ IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ଗଠନ (ନିର୍ଣ୍ଣୟ ଏବଂ ପୂର୍ବାନୁମାନ) କ hyd ଣସି ସ୍ପଷ୍ଟ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ଦେଖାଇଲା ନାହିଁ |ଏହିପରି, ଯଦି IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିରେ କ any ଣସି ପ୍ରୋଟିନ୍ ଫ୍ୟୁଜୋଜେନ୍ ଭାବରେ କାର୍ଯ୍ୟ କରେ, ସେମାନେ ଅନ୍ୟ ଜଣାଶୁଣା ଉଦାହରଣଠାରୁ ଭିନ୍ନ manner ଙ୍ଗରେ ତାହା କରନ୍ତି |
ପରିଶେଷରେ, ଗ୍ୟାମେଟ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ସହିତ ଜଡିତ ପ୍ରୋଟିନଗୁଡିକର IST ସୁପରଫ୍ୟାମିଲିର ସଦସ୍ୟମାନଙ୍କର କାର୍ଯ୍ୟ ଏକ ରହସ୍ୟମୟ ରହସ୍ୟ ହୋଇ ରହିଥାଏ |ଆମର ବର୍ଣ୍ଣିତ SPACA6 ରେକମ୍ବିନାଣ୍ଟ ଅଣୁ ଏବଂ ଏହାର ସମାଧାନ ହୋଇଥିବା ସଂରଚନା ଏହି ଅଂଶୀଦାରୀ ସଂରଚନା ମଧ୍ୟରେ ସମ୍ପର୍କ ଏବଂ ଗେମେଟ ସଂଲଗ୍ନ ଏବଂ ଫ୍ୟୁଜନରେ ସେମାନଙ୍କର ଭୂମିକା ବିଷୟରେ ଅନ୍ତର୍ନିହିତ ସୂଚନା ପ୍ରଦାନ କରିବ |
ପୂର୍ବାନୁମାନ କରାଯାଇଥିବା ମାନବ SPACA6 ଏକ୍ଟୋଡୋମେନ୍ (NCBI ଯୋଗଦାନ ସଂଖ୍ୟା NP_001303901.1; ଅବଶିଷ୍ଟ 27–246) ସହିତ ଥିବା DNA କ୍ରମକୁ ଡ୍ରୋସୋଫିଲା ମେଲାନୋଗାଷ୍ଟର S2 କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ପାଇଁ କୋଡନ୍-ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ କୋଜାକ (ୟୁରୋଫିନ୍ସ ଜେନୋମିକ୍ସ) ସହିତ ଏକ ଜିନ୍ ଖଣ୍ଡ ଭାବରେ ସିନ୍ଥାଇଜ୍ କରାଯାଇଥିଲା |, ବିପି ସିକ୍ରେସନ୍ ସିଗ୍ନାଲ୍ ଏବଂ ସଂପୃକ୍ତ 5 ′ ଏବଂ 3 ′ ଏହି ଜିନ୍ ର pMT ଏକ୍ସପ୍ରେସନ୍ ଭେକ୍ଟରରେ ଲିଗେସନ୍-ସ୍ independent ାଧୀନ କ୍ଲୋନିଂ ପାଇଁ ଶେଷ ହୁଏ, ଯାହା ପୁରୋମାଇସିନ୍ (pMT-puro) ସହିତ ଚୟନ ପାଇଁ ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଏକ ମେଟାଲୋଥିଅନିନ୍ ପ୍ରୋମୋଟର୍ ଉପରେ ଆଧାରିତ |PMT-puro ଭେକ୍ଟର ଏକ ଥ୍ରୋମ୍ବିନ କ୍ଲାଭେଜ୍ ସାଇଟ୍ ଏନକୋଡ୍ କରେ ଏବଂ ତା’ପରେ 10x-His C- ଟର୍ମିନାଲ୍ ଟ୍ୟାଗ୍ (ଚିତ୍ର S2) |
D. melanogaster S2 (Gibco) କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ SPACA6 pMT-puro ଭେକ୍ଟରର ସ୍ଥିର ସଂକ୍ରମଣ IZUMO1 ଏବଂ JUNO43 ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ସହିତ ସମାନ ଭାବରେ କରାଯାଇଥିଲା |ସ୍ନାଇଡରର ମାଧ୍ୟମ (ଗିବକୋ) ରେ S2 କୋଷଗୁଡିକ ଥୋଇ ଦିଆଯାଇଥିଲା ଏବଂ ବ grown ଼ିଥିଲା ​​10% (v / v) ଉତ୍ତାପ-ନିଷ୍କ୍ରିୟ ଭ୍ରୂଣ ବାଛୁରୀ ସେରମ୍ (ଗିବକୋ) ଏବଂ 1X ଆଣ୍ଟିମାଇକୋଟିକ୍ ଆଣ୍ଟିବାୟୋଟିକ୍ (ଗିବକୋ) |ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ପାସ୍ କୋଷଗୁଡିକ (3.0 x 106 କୋଷଗୁଡିକ) 6-କୂଅ ପ୍ଲେଟ୍ (କର୍ନିଙ୍ଗ୍) ର ବ୍ୟକ୍ତିଗତ କୂଅରେ ଆବୃତ କରାଯାଇଥିଲା |27 ° C ରେ 24 ଘଣ୍ଟା ଇନକ୍ୟୁବେସନ ପରେ, ଉତ୍ପାଦକଙ୍କ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଅନୁଯାୟୀ 2 ମିଗ୍ରା SPACA6 pMT-puro ଭେକ୍ଟର ଏବଂ ଇଫେକ୍ଟିନ୍ ଟ୍ରାନ୍ସଫେକ୍ସନ୍ ରିଜେଣ୍ଟ୍ (କିଆଗେନ୍) ର ମିଶ୍ରଣ ସହିତ କୋଷଗୁଡିକ ଟ୍ରାନ୍ସଫେକ୍ଟ କରାଯାଇଥିଲା |ଟ୍ରାନ୍ସଫେକ୍ଟେଡ୍ କୋଷଗୁଡିକ 72 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଇନ୍କ୍ୟୁବ୍ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ତା’ପରେ 6 ମିଗ୍ରା / ମିଲ୍ ପୁରୋମାଇସିନ୍ ସହିତ ଅମଳ କରାଯାଇଥିଲା |ସେଲ୍ ଗୁଡିକ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ସ୍ନାଇଡର୍ ମାଧ୍ୟମରୁ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ହୋଇ ବୃହତ ପରିମାଣର ପ୍ରୋଟିନ୍ ଉତ୍ପାଦନ ପାଇଁ ସେରମ୍ ମୁକ୍ତ କୀଟ- XPRESS ମାଧ୍ୟମ (ଲୋଞ୍ଜା) ରେ ରଖାଗଲା |S L ସେଲ୍ ସଂସ୍କୃତିର 1 L ବ୍ୟାଚ୍ 2 L ଭେଣ୍ଟିଲେଟେଡ୍ ଫ୍ଲାଟ-ବଟମ୍ଡ ପଲିପ୍ରୋପିଲିନ ଏର୍ଲେନମିୟର ଫ୍ଲାସ୍କରେ 8-10 × 106 ମିଲି -1 କୋଷରେ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା ଏବଂ ତା’ପରେ 500 µM CuSO4 (ମିଲିପୋର ସିଗମା) ଏବଂ ଷ୍ଟେରାଇଲ ଫିଲ୍ଟରରେ ଚୂଡ଼ାନ୍ତ ଏକାଗ୍ରତା ସହିତ ନିର୍ଗତ ହେଲା |ପ୍ରେରିତଚାରି ଦିନ ପାଇଁ 120 rpm ରେ 27 ° C ରେ ପ୍ରବର୍ତ୍ତିତ ସଂସ୍କୃତିଗୁଡିକ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା |
SPACA6 ଧାରଣ କରିଥିବା କଣ୍ଡିଶନ୍ ମାଧ୍ୟମ 5660 × g ରେ 4 ° C ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ଦ୍ isol ାରା ପୃଥକ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ତା’ପରେ 10 କେଡିଏ MWCO ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ସହିତ ସେଣ୍ଟ୍ରାମେଟ୍ ଟାଙ୍ଗେସିଆଲ୍ ଫ୍ଲୋ ଫିଲ୍ଟରେସନ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ (ପଲ୍ କର୍ପ) |SPACA6 ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକାଗ୍ର ମାଧ୍ୟମକୁ 2 ମିଲି Ni-NTA ଅଗରୋଜ ରଜନୀ (କିଆଗେନ୍) ସ୍ତମ୍ଭରେ ପ୍ରୟୋଗ କରନ୍ତୁ |Ni-NTA ରଜନୀକୁ 10 ସ୍ତମ୍ଭ ଭଲ୍ୟୁମ୍ (CV) ବଫର୍ A ସହିତ ଧୋଇ ଦିଆଗଲା ଏବଂ ତା’ପରେ 50 CV ର ଏକ ଅନ୍ତିମ ଇମିଡାଜୋଲ୍ ଏକାଗ୍ରତା ଦେବା ପାଇଁ 1 CV ବଫର୍ A ଯୋଗ କରାଯାଇଥିଲା |SPACA6 କୁ 10 ମିଲି ମିଟର ବଫର୍ ସହିତ ବ uted ଼ାଯାଇଥିଲା A imidazole ସହିତ 500 mM ର ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା ସହିତ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟ କରାଯାଇଥିଲା |ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଶ୍ରେଣୀ ଥ୍ରୋମ୍ବିନ (ମିଲିପୋର ସିଗମା) ସିଧାସଳଖ ଡାଏଲିସିସ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ (MWCO 12-14 kDa) ରେ 1 ମିଗ୍ରା SPACA6 ବନାମ 1 L 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 ଏବଂ 150 mM NaCl (ବଫର୍ ବି) ରେ ଡାଏଲିସିସ୍ ପାଇଁ ଯୋଗ କରାଯାଇଥିଲା |48 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 4 ° C ରେ |ଥ୍ରୋମ୍ବିନ-ଖଣ୍ଡିତ SPACA6 ତାପରେ ଲୁଣର ଏକାଗ୍ରତାକୁ ହ୍ରାସ କରିବା ପାଇଁ ତିନିଗୁଣ ମିଶ୍ରିତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 10 ମିମି ଟ୍ରାଇସ୍- HCl, pH 7.5 ସହିତ ସନ୍ତୁଳିତ 1 ମିଲି ମୋନୋଏସ୍ 5/50 GL କାଟେସନ୍ ଏକ୍ସଚେଞ୍ଜ୍ ସ୍ତମ୍ଭ (ସାଇଟିଭା / ଜି) ଉପରେ ଲୋଡ୍ କରାଯାଇଥିଲା |କାଟେନ୍ ଏକ୍ସଚେ ger ୍ଜର୍ 3 CV 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 ସହିତ ଧୋଇଗଲା, ତାପରେ SPACA6 କୁ 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 ରେ 10 ରୁ 500 mM NaCl ର ଏକ ରେଖାଗତ ଗ୍ରେଡ଼େଣ୍ଟ ସହିତ ବ uted ାଯାଇଥିଲା |ଆୟନ ବିନିମୟ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ପରେ, SPACA6 କୁ 1 ମିଲିରେ ଏକାଗ୍ର କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଏକ ENrich SEC650 10 x 300 ସ୍ତମ୍ଭ (BioRad) ରୁ ବଫର୍ ବି ସହିତ ସମାନ୍ତରାଳ ଭାବରେ ପୃଥକ କରାଯାଇଥିଲା | କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାମ୍, ପୁଲ୍ ଏବଂ SPACA6 ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକାଗ୍ର ଭଗ୍ନାଂଶ ଅନୁଯାୟୀ |16% SDS- ପଲିୟାକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ ଜେଲରେ କୁମାସି-ଦାଗିତ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ଦ୍ୱାରା ଶୁଦ୍ଧତା ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ହୋଇଥିଲା |ବିୟର-ଲାମବର୍ଟ ନିୟମ ଏବଂ ତତ୍ତ୍ୱିକ ମୋଲାର ବିଲୁପ୍ତ କୋଏଫିସିଣ୍ଟେଣ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରି 280 nm ରେ ଅବଶୋଷଣ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏକାଗ୍ରତା ପରିମାଣ କରାଯାଇଥିଲା |
ଶୁଦ୍ଧ SPACA6 ରାତାରାତି 10 ମିଟର ସୋଡିୟମ୍ ଫସଫେଟ୍, pH 7.4 ଏବଂ 150 mM NaF ବିରୁଦ୍ଧରେ ଡାଏଲିଜ୍ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସିଡି ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରସ୍କୋପି ଦ୍ analysis ାରା ବିଶ୍ଳେଷଣ ପୂର୍ବରୁ 0.16 ମିଗ୍ରା / ମି.ଲି.185 ରୁ 260 nm ର ତରଙ୍ଗ ଦ eng ର୍ଘ୍ୟ ବିଶିଷ୍ଟ CD ର ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରାଲ୍ ସ୍କାନିଂ ଜାସ୍କୋ J-1500 ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋପୋଲାରାଇମିଟରରେ 1 ମିମି ଅପ୍ଟିକାଲ୍ ପଥ ଦ length ର୍ଘ୍ୟ (ହେଲମା) ସହିତ 50 nm / ମିନିଟ୍ ହାରରେ କ୍ୱାର୍ଟଜ୍ କୁଭେଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା |ସିଡି ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରାକୁ ବେସଲାଇନ୍ ସଂଶୋଧିତ କରାଯାଇଥିଲା, ହାରାହାରି 10 ରୁ ଅଧିକ ଅଧିଗ୍ରହଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଡିଗ୍ରୀ cm2 / dmol ରେ ଅବଶିଷ୍ଟ ଏଲିପଟିସିଟି (θMRE) ରେ ରୂପାନ୍ତରିତ ହେଲା:
ଯେଉଁଠାରେ MW ହେଉଛି Da ରେ ପ୍ରତ୍ୟେକ ନମୁନାର ମଲିକୁଲାର୍ ଓଜନ;N ହେଉଛି ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ସଂଖ୍ୟା;mill ହେଉଛି ମିଲିଡ୍ରିଗ୍ରିରେ ଏଲିପିଟିସିଟି;d ସେମିରେ ଅପ୍ଟିକାଲ୍ ପଥର ଦ length ର୍ଘ୍ୟ ସହିତ ଅନୁରୂପ ଅଟେ;ୟୁନିଟ୍ ଗୁଡିକରେ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏକାଗ୍ରତା |