ରାସାୟନିକ ଶିଳ୍ପ ରାସାୟନିକ ଉପାଦାନ ପାଇଁ ASTM A790 2507/2255 1.4462 / 1.4410 ଡୁପ୍ଲେକ୍ସ ୱେଲଡେଡ୍ ଟ୍ୟୁବ୍, SPECC1L ର ଅଭାବ ଦ୍ spl ାରା ବିଭାଜିତ ଗଣ୍ଠିର ସ୍ଥିରତା ବ and ଼ିଯାଏ ଏବଂ କ୍ରାନିଆଲ୍ ସ୍ନାୟୁ କ୍ରେଷ୍ଟ କୋଷଗୁଡ଼ିକର shed ାଳିବା କମିଯାଏ |

Nature.com ପରିଦର୍ଶନ କରିଥିବାରୁ ଧନ୍ୟବାଦ |ସୀମିତ CSS ସମର୍ଥନ ସହିତ ଆପଣ ଏକ ବ୍ରାଉଜର୍ ସଂସ୍କରଣ ବ୍ୟବହାର କରୁଛନ୍ତି |ସର୍ବୋତ୍ତମ ଅଭିଜ୍ଞତା ପାଇଁ, ଆମେ ପରାମର୍ଶ ଦେଉଛୁ ଯେ ଆପଣ ଏକ ଅପଡେଟ୍ ବ୍ରାଉଜର୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ (କିମ୍ବା ଇଣ୍ଟରନେଟ୍ ଏକ୍ସପ୍ଲୋରରରେ ସୁସଙ୍ଗତତା ମୋଡ୍ ଅକ୍ଷମ କରନ୍ତୁ) |ଏହା ସହିତ, ଚାଲୁଥିବା ସମର୍ଥନ ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ, ଆମେ ଶ yles ଳୀ ଏବଂ ଜାଭାସ୍କ୍ରିପ୍ଟ ବିନା ସାଇଟ୍ ଦେଖାଇଥାଉ |

ରାସାୟନିକ ଶିଳ୍ପ ପାଇଁ ASTM A790 2507/2205 1.4462 / 1.4410 ଡୁପ୍ଲେକ୍ସ ୱେଲଡେଡ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ |

ଲିଆଓଚେଙ୍ଗ୍ ସିହେ ଏସ୍ ମ୍ୟାଟେରିଆଲ୍ କୋ।ଏକ ଅଗ୍ରଣୀ ଉତ୍ପାଦକ ଯିଏ ଷ୍ଟେନଲେସ୍ ଷ୍ଟିଲ୍ ବିହୀନ ପାଇପ୍, ଉଜ୍ଜ୍ୱଳ ଆନ୍ଲେଡ୍ ଟ୍ୟୁବ୍, ବିହୀନ କୋଇଲିଡ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ ଇତ୍ୟାଦିରେ ବିଶେଷଜ୍ଞ |ଗ୍ରାହକଙ୍କୁ ସୁବିଧା କରିବା ପାଇଁ, ଆମେ ପାଇପ୍ ଏବଂ ଟ୍ୟୁବ୍ ମଧ୍ୟ ୱେଲ୍ଡ କରିଛୁ |ଲିଆଓଚେଙ୍ଗ୍ ସିହେ ଏସ୍ ମ୍ୟାଟେରିଆଲ୍ କୋ।ସବୁଠାରୁ ଉନ୍ନତ ଉତ୍ପାଦନ ଏବଂ ପରୀକ୍ଷଣ ଉପକରଣ ଅଛି |ଆମେ ତୁମର ଆବଶ୍ୟକତାକୁ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ପୂରଣ କରିପାରିବା |ଷ୍ଟାଣ୍ଡାର୍ଡକୁ ଅତି କଠୋର ଭାବରେ, ଆମ ଦ୍ୱାରା ଉତ୍ପାଦିତ ଟ୍ୟୁବ୍ ସବୁବେଳେ ସଠିକ୍ OD ଏବଂ WT ସହନଶୀଳତା ଥାଏ |ସହନଶୀଳତା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ମାନକ ଉତ୍ପାଦନ ପାଇଁ କଠୋର ଅଟେ |ଆମର ଉତ୍ପାଦ ସବୁବେଳେ ଗ୍ରାହକଙ୍କ ଉପରେ ସନ୍ତୁଷ୍ଟ |ଗ୍ରାହକମାନେ ଆମର ଉତ୍ପାଦ କ୍ରୟ କଲେ ଅଧିକ ଲାଭ ସୃଷ୍ଟି କଲେ |
କ) OD (ବାହ୍ୟ ବ୍ୟାସ): 3.18 ମିମି ରୁ 101.6 ମିମି |
b) WT (କାନ୍ଥ ମୋଟା): 0.5mm ରୁ 20mm
ଗ) ଦ Length ର୍ଘ୍ୟ: ଗ୍ରାହକଙ୍କ ଆବଶ୍ୟକତା ଅନୁଯାୟୀ |
ଘ) ମାନକ: ASTM A312;ASTM A269;ASTM A789;ASTM A790 ଇତ୍ୟାଦି |
ଇ) ପ୍ରକ୍ରିୟା ପଦ୍ଧତି: ERW, EFW ଇତ୍ୟାଦି |

ସ୍ଲାଇଡ୍ ପ୍ରତି ସ୍ଲାଇଡ୍ ତିନୋଟି ଆର୍ଟିକିଲ୍ ଦେଖାଉଛି |ପ୍ରତ୍ୟେକ ସ୍ଲାଇଡ୍ ଦେଇ ଗତି କରିବା ପାଇଁ ସ୍ଲାଇଡ୍ କିମ୍ବା ଶେଷରେ ସ୍ଲାଇଡ୍ କଣ୍ଟ୍ରୋଲର୍ ବଟନ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପଛ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ ବଟନ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |
କ୍ରାନିଆଲ୍ ନ୍ୟୁରାଲ୍ କ୍ରେଷ୍ଟ୍ କୋଷଗୁଡିକ (CNCC) ଭ୍ରୁଣୀୟ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡଗୁଡିକୁ ବନ୍ଦ କରି ଫାରିନେଜ୍ ଆର୍ଚକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ ହୁଏ, ଯାହା ଅଧିକାଂଶ ମଧ୍ୟଭାଗ ସଂରଚନା ଗଠନ କରିଥାଏ |ଏକ ସାଧାରଣ ଜନ୍ମଗତ ବିକୃତି, ଓରୋଫ୍ୟାସିଆଲ୍ କ୍ଲିଫ୍ଟର ଇତିଓଲୋଜିରେ CNCC ଅସୁବିଧା ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିଥାଏ |ଆଟିପିକାଲ୍ ଏବଂ ସିଣ୍ଡ୍ରୋମିକ୍ କ୍ଲିଫ୍ଟ ରୋଗୀଙ୍କଠାରେ ହେଟେରୋଜାଇଗସ୍ SPECC1L ମ୍ୟୁଟେସନ୍ ଦେଖିବାକୁ ମିଳିଛି |ଏଠାରେ, ଆମେ କାନୋନିକାଲ୍ ଆଡେସିଭ୍ ଜଙ୍କସନ୍ (AJ) ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକର ଉନ୍ନତ ଦାଗ, ସାଂସ୍କୃତିକ SPECC1L ନକ୍ଡାଉନ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ cat- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଏବଂ ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ୍ ରିପୋର୍ଟ କରୁ, ଏବଂ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ରାଫ୍ AJ ର ଆପିକାଲ୍-ବେସାଲ୍ ବିସ୍ତାର ଦେଖାଏ |କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ମର୍ଫୋଜେନେସିସରେ SPECC1L ର ଭୂମିକା ବୁ To ିବାକୁ, ଆମେ ଏକ Specc1l ଅଭାବୀ ମାଉସ୍ ମଡେଲ୍ ସୃଷ୍ଟି କରିଛୁ |ହୋମୋଜାଇଗସ୍ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟଗୁଡିକ ଭ୍ରୁଣ ସାଂଘାତିକ ଏବଂ ଦୁର୍ବଳ ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ ଏବଂ CNCC ଲାମିନେସନ୍ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ |ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ AJ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଦାଗ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଥାଏ |ଏହି AJ ତ୍ରୁଟି CNCC ବିଳମ୍ବରେ ଥିବା ଏକ ତ୍ରୁଟି ସହିତ ସମାନ, AJ ବିଲୋପ ଆବଶ୍ୟକ କରେ |ଏହା ସହିତ, Specc11 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟଗୁଡିକ PI3K-AKT ସଙ୍କେତକୁ ହ୍ରାସ କରିଛି ଏବଂ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ବୃଦ୍ଧି କରିଛି |ଭିଟ୍ରୋ, ବନ୍ୟ ପ୍ରକାର କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ PI3K-AKT ସଙ୍କେତର ସାମାନ୍ୟ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ AJ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଆଣିବା ପାଇଁ ଯଥେଷ୍ଟ ଥିଲା |ଗୁରୁତ୍ ly ପୂର୍ଣ ଭାବରେ, SPECC1L ନକ୍ଡାଉନ୍ ଦ୍ uc ାରା ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା AJ ପରିବର୍ତ୍ତନଗୁଡିକ PI3K-AKT ପଥ ସକ୍ରିୟ ହେବା ଦ୍ୱାରା ଓଲଟା ହୋଇପାରେ |ଏକାଠି ନିଆଗଲା, ଏହି ତଥ୍ୟଗୁଡିକ ସୂଚିତ କରେ ଯେ ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ ଏବଂ CNCC ସ୍ତରକରଣ ପାଇଁ PI3K-AKT ସିଗନାଲ୍ ଏବଂ AJ ଜୀବବିଜ୍ଞାନର ଏକ ଉପନ୍ୟାସ ନିୟନ୍ତ୍ରକ ଭାବରେ SPECC1L ଆବଶ୍ୟକ |
କ୍ରାନିଆଲ୍ ନ୍ୟୁରାଲ୍ କ୍ରେଷ୍ଟ୍ କୋଷଗୁଡିକ (CNCCs) ଡୋରସାଲ୍ ନ୍ୟୁରୋଏକ୍ଟୋଡର୍ମକୁ ଲୋକାଲାଇଜ୍ କରେ ଏବଂ ଏପିଥେଲିଆଲ୍-ମେସେଞ୍ଚାଇମାଲ୍ ଟ୍ରାନ୍ସମିସନ୍ (EMT) ସହିତ ଜଡିତ ଏକ ପ୍ରକ୍ରିୟା ମାଧ୍ୟମରେ ବିକାଶଶୀଳ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡର ନ୍ୟୁରୋପିଥେଲିୟମରୁ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ହୁଏ |ପ୍ରିମିଟେରିଙ୍ଗ୍ ଏପିଥେଲିଆଲ୍ CNCC ଗୁଡିକ ଆନ୍ତ cell ସେଲ୍ୟୁଲାର୍ ଜଙ୍କସନ୍ ଗୁଡିକୁ ବ୍ୟାହତ କରେ ଏବଂ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ ମେସେଞ୍ଚାଇମାଲ୍ CNCC ଗୁଡ଼ିକରେ ପରିଣତ ହୁଏ ଯାହା ପ୍ରଥମ ଏବଂ ଦ୍ୱିତୀୟ ଫାରିନେଜ୍ ତୀରଗୁଡିକ ପୂରଣ କରେ ଏବଂ ଅଧିକାଂଶ କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ କାର୍ଟିଲେଜ୍ ଗଠନ କରେ |ଏହିପରି, CNCC କାର୍ଯ୍ୟକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରିତ କରୁଥିବା ଜିନ୍ ଗୁଡିକ କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ଜନ୍ମଗତ ଆନୋମାଲିର ଇରିଓଲୋଜିରେ ବାଧାପ୍ରାପ୍ତ ହୁଏ ଯେପରିକି ଓରୋଫ୍ୟାସିଆଲ୍ କ୍ଲିଫ୍ଟ, ସାଧାରଣତ only କେବଳ ଆମେରିକାରେ 1/800 ଜନ୍ମକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିଥାଏ |ଜନ୍ମଗତ ବିକଳାଙ୍ଗ ମଧ୍ୟରୁ ଗୋଟିଏ |
ମୂଷାମାନଙ୍କରେ ଭ୍ରୁଣ ବିକାଶର .5..5 ରୁ .5..5 ଦିନ ମଧ୍ୟରେ ଥିବା ପୂର୍ବବର୍ତ୍ତୀ ନ୍ୟୁରାଲ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ ହେବା ସହିତ ସି.ଏନ୍.ସି.ସି.ଅନେକ ମାଉସ୍ ଓରୋଫ୍ୟାସିଆଲ୍ କ୍ଲିଫ୍ଟ-ଜଡିତ ଜିନ୍ ର ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟଗୁଡିକ ମଧ୍ୟ କେତେକ ପ୍ରକାରର ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ତ୍ରୁଟି ପ୍ରଦର୍ଶନ କରନ୍ତି, ଯେପରିକି Irf69,10, Ghrl310, Cfl111, ଏବଂ Pdgfrα12 |ଅବଶ୍ୟ, ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ ଏବଂ CNCC ଷ୍ଟ୍ରାଟାଇଫେସନ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ସ୍ independent ାଧୀନ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଇପାରେ, କାରଣ ସ୍ପ୍ଲୋଚ୍ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ମାଉସ୍ (ପ୍ୟାକ୍ସ 3) CNCC ସ୍ତରକରଣ କିମ୍ବା ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ ଉପରେ କ effect ଣସି ପ୍ରଭାବ ନକରି ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦରେ ତ୍ରୁଟି ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିଥାଏ |CNCC ଡିସେକସନ ଏବଂ ନ୍ୟୁରାଲ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦରେ ତ୍ରୁଟି ଥିବା ଅତିରିକ୍ତ ମାଉସ୍ ମଡେଲଗୁଡିକ ଏହି ଦୁଇଟି ପ୍ରକ୍ରିୟାର ସାଧାରଣ ମଲିକୁଲାର ଆଧାରକୁ ବିସ୍ତାର କରିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିବ |
ନ୍ୟୁରୋପିଥେଲିଆଲ୍ କୋଷରୁ CNCC ର ବିଚ୍ଛିନ୍ନତା ଆଡେସିଭ୍ ଜଙ୍କସନ୍ (AJs) ର ବିଲୋପ ଆବଶ୍ୟକ କରେ, ଯାହା ପ୍ରୋଟିନ୍ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସରେ ଗଠିତ, ଅନ୍ୟମାନଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ୍, β- କ୍ୟାଟେନିନ୍, α- ଇ-କ୍ୟାଟେନିନ୍, ଏବଂ act- ଆକ୍ଟିଟିନ୍ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟସ୍ 2 ସହିତ ଜଡିତ | ଅତ୍ୟଧିକ ସଙ୍କୋଚନ ଅଧ୍ୟୟନ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ୍ CNCC ବିଳମ୍ବରେ ହ୍ରାସ କିମ୍ବା ବିଳମ୍ବ ଦେଖାଇଲା |ଅପରପକ୍ଷେ, ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ୍ର ଦମନ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ସ୍ତରକରଣ 15,16 ରେ ପରିଣତ ହୁଏ |CNCC ଷ୍ଟ୍ରାଟାଇଫେସନ୍ ସମୟରେ EMT କୁ ମଧ୍ୟସ୍ଥ କରୁଥିବା ଅନେକ କାରଣ ହେଉଛି ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ଫ୍ୟାକ୍ଟର୍ (AP2α, Id2, FOXD3, SNAIL, TWIST, SOX10) ଏବଂ ଏକ୍ସଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ (ECM) ରିମୋଡେଲିଂ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଯେପରିକି ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ ମେଟାଲୋପ୍ରୋଟେନାଜ୍ (MMPs), ତଥାପି CNCC ଗୁଡିକ ସିଧାସଳଖ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟାଲ୍ AJ ନିୟନ୍ତ୍ରକ | ଏପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଜଣା ନାହିଁPI3K-AKT ପଥ ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ ସ୍ତରକୁ ବିରୋଧ କରେ, ମୁଖ୍ୟତ cancer କର୍କଟ ଅନୁସନ୍ଧାନରୁ |ସାମ୍ପ୍ରତିକ ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ମୂଷାମାନଙ୍କରେ PDGFα- ଆଧାରିତ PI3K-AKT ସଙ୍କେତର କ୍ଷତି କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ଅସ୍ୱାଭାବିକତାକୁ ନେଇଥାଏ, ଖଣ୍ଡ ଖଣ୍ଡ ଏବଂ ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ତ୍ରୁଟି 12 |ତଥାପି, PI3K-AKT ପଥ ଏବଂ CNCC ସ୍ତରକରଣ ଉପରେ AJ ସ୍ଥିରତା ମଧ୍ୟରେ ସମ୍ପର୍କ ଅସ୍ପଷ୍ଟ |
ଆମେ ପୂର୍ବରୁ SPECC1L କୁ ଦୁଇ ଜଣଙ୍କର ପ୍ରଥମ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଜିନ୍ ଭାବରେ ଚିହ୍ନଟ କରିଥିଲୁ ଯାହା ଏକ ଘୋର ଖଣ୍ଡ ଯାହା ପାଟିରୁ ଆଖି ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବ୍ୟାପିଥାଏ, ଯାହା ଓଲିକ୍ କ୍ଲିଫ୍ (ଓବିଏଫସି) କିମ୍ବା ଟେସିଅର୍ IV18 କ୍ଲଫ୍ଟ ଭାବରେ ଜଣାଶୁଣା |ଦୁଇଟି ବହୁମୁଖୀ ପରିବାରରେ ଅଟୋସୋମାଲ୍ ପ୍ରାଧାନ୍ୟବାଦୀ ଓପିଜ୍ ଜି / ବିବିବି ସିଣ୍ଡ୍ରୋମ (OMIM # 145410) ସହିତ SPECC1L ମ୍ୟୁଟେସନ୍ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଛି, ଯେଉଁଥିରେ ପ୍ରଭାବିତ ବ୍ୟକ୍ତିମାନେ ହାଇପରଡିଷ୍ଟାନ୍ସ ଏବଂ କ୍ଲିପ୍ ଲିପ୍ / ପାଲେଟ୍ 19 ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିଥିଲେ ଏବଂ ଗୋଟିଏ ପରିବାରରେ ଟିବି ଓଭରଡିଷ୍ଟାନ୍ସ ସିଣ୍ଡ୍ରୋମ (OMIM # 145420) 20 ।ଓପିଜ୍ ଜି / ବିବିବି ସିଣ୍ଡ୍ରୋମର ଅଧାରୁ ଅଧିକ ମାମଲା X- ଲିଙ୍କ୍ (OMIM # 300000) ଏବଂ MID1 ଜିନ୍ ରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ହେତୁ ଘଟିଥାଏ, ଯାହା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ସହ ଜଡିତ କୋଷ କଙ୍କାଳର ପ୍ରୋଟିନ୍ 22 କୁ ଏନକୋଡ୍ କରିଥାଏ |ଆମେ ଅନୁମାନ କରୁଛୁ ଯେ SPECC1L, ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ଏବଂ ଆକ୍ଟିନ୍ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ ସହିତ ଜଡିତ ଏକ ପ୍ରୋଟିନ୍, ସେଲ୍ ଆଡିଶିନ୍ ଏବଂ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ ସମୟରେ ଆକ୍ଟିନ୍ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ ରିମୋଡେଲିଂ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ସଙ୍କେତ ମଧ୍ୟସ୍ଥ କରିପାରେ |ଭିଟ୍ରୋ ଏବଂ ଭିଭୋ ଅଧ୍ୟୟନ ମାଧ୍ୟମରେ, ଆମେ ବର୍ତ୍ତମାନ SPECC1L କୁ PI3K-AKT ସଙ୍କେତ ମାଧ୍ୟମରେ AJ ସ୍ଥିରତାର ଏକ ଉପନ୍ୟାସ ନିୟନ୍ତ୍ରକ ଭାବରେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରୁ |ସେଲୁଲାର୍ ସ୍ତରରେ, SPECC1L ଅଭାବରୁ ପାନ୍- AKT ପ୍ରୋଟିନ୍ ସ୍ତର ହ୍ରାସ ପାଇଲା ଏବଂ AJ ର ଆପିକାଲ୍-ବେସାଲ୍ ବିଚ୍ଛେଦ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା, ଯାହା AKT ରାସ୍ତାର ରାସାୟନିକ ସକ୍ରିୟତା ଦ୍ୱାରା ବିଲୋପ ହେଲା |ଭିଭୋରେ, Specc11- ଅଭାବୀ ଭ୍ରୁଣଗୁଡ଼ିକ ଦୁର୍ବଳ ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ ଏବଂ CNCC ବିଭାଜନକୁ ହ୍ରାସ କରେ |ଏହିପରି, ମୁଖ ମର୍ଫୋଜେନେସିସ୍ ସମୟରେ ସାଧାରଣ CNCC କାର୍ଯ୍ୟ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକୀୟ ଉଚ୍ଚ ନିୟନ୍ତ୍ରିତ କୋଷ ଆଡେସିନ୍-ଆଧାରିତ ସିଗନାଲରେ SPECC1L କାର୍ଯ୍ୟ କରିଥାଏ |
ସେଲୁଲାର୍ ସ୍ତରରେ SPECC1L ର ଭୂମିକାକୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ କରିବାକୁ, ଆମେ SPECC1L18 ରେ ପୂର୍ବରୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ ସ୍ଥିର ଅଷ୍ଟିଓସ୍କାରୋମା ସେଲ୍ ଲାଇନ୍ U2OS ଅଭାବକୁ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲୁ |SPECC1L (kd) ନକ୍ଡାଉନ୍ ସହିତ ଏହି ସ୍ଥିର U2OS କୋଷଗୁଡ଼ିକ SPECC1L ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସ୍ତରରେ ମଧ୍ୟମ (60-70%) ହ୍ରାସ ପାଇଲା, ଆକ୍ଟିନ୍ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ ର ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ ଏବଂ ପୁନର୍ଗଠନରେ ତ୍ରୁଟି ସହିତ 18 ଏହାର ବିପରୀତରେ, ଏକ କ୍ଷଣସ୍ଥାୟୀ ହ୍ରାସ | SPECC1L ମାଇଟୋଟିକ୍ ତ୍ରୁଟି 23 କୁ ନେଇଥିବାର ଦେଖାଯାଇଛି |ପରବର୍ତ୍ତୀ ଚରିତ୍ରବୋଧ ପରେ, ଆମେ ଜାଣିଲୁ ଯେ ଆମର ସ୍ଥିର SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକ ବହୁ ଉଚ୍ଚ ସ୍ତରରେ ମିର୍ଫୋଲୋଜି ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିଛନ୍ତି (ଚିତ୍ର 1) |ସ୍ୱଳ୍ପ ସଂଯୋଗରେ ବ୍ୟକ୍ତିଗତ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କୋଷ ଏବଂ kd କୋଷଗୁଡ଼ିକ ସମାନ ଦେଖାଯାଉଥିଲା (ଚିତ୍ର 1 ଏ, ଡି) |ଫ୍ୟୁଜନର 24 ଘଣ୍ଟା ପରେ, କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ସେମାନଙ୍କର କ୍ୟୁବାଇଡାଲ୍ ଆକୃତି (ଚିତ୍ର 1 ବି, ଇ) ବଜାୟ ରଖିଥିବାବେଳେ SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକ ବିସ୍ତାରିତ (ଚିତ୍ର 1C, F) |ସେଲ୍ ଆକୃତିର ଏହି ପରିବର୍ତ୍ତନର ପରିମାଣ କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ ସେଲ୍ ଏବଂ kd କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଭିଭୋ ଲାଇଭ୍ ଇମେଜିଙ୍ଗ୍ ଦ୍ୱାରା ଧରାଯାଇଥିଲା (ଚଳଚ୍ଚିତ୍ର 1) |ସମ୍ମିଳିତ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ SPECC1L ର ଭୂମିକା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବାକୁ, ଆମେ ପ୍ରଥମେ ଏହାର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ପରୀକ୍ଷା କରିଥିଲୁ |ଆମେ ଜାଣିଲୁ ଯେ ଫ୍ୟୁଜନ୍ (ଚିତ୍ର 1G) ଉପରେ SPECC1L ପ୍ରୋଟିନ୍ ସ୍ତର ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା, ଯେଉଁଠାରେ SPECC1L ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପ୍ଟ ସ୍ତର ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା ନାହିଁ (ଚିତ୍ର 1H) |ଏହା ସହିତ, କୋଷର ଘନତା ବ increased ଼ିବା ସହିତ, SPECC1L ପ୍ରୋଟିନ୍ ଇଣ୍ଟରସେଲୁଲାର୍ ସୀମାରେ ଜମା ହୋଇଗଲା (ଚିତ୍ର 2A-E), ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ସହିତ ଜଡିତ cat- କ୍ୟାଟେନିନ୍ (ଚିତ୍ର 2A'-E ') ସହିତ ଏକ pattern ାଞ୍ଚା ଓଭରଲିପ୍ ହୋଇ |ଆକ୍ଟିନ୍ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ 18,23 ସହିତ SPECC1L ର ଆସୋସିଏସନ୍ ପ୍ରଦାନ କରି ଆମେ ଅନୁମାନ କରିଛୁ ଯେ SPECC1L ଆକ୍ଟିନ୍-ଆଧାରିତ ଆଡେସିଭ୍ ଜଙ୍କସନ୍ (AJ) ସହିତ ଯୋଗାଯୋଗ କରେ |
(AF) SPECC1L ନକଡାଉନ୍ (DF) କୋଷଗୁଡ଼ିକ U2OS କୋଷଗୁଡିକ (AC) ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ତୁଳନାରେ ଉଚ୍ଚ ମିଳନ (F) ରେ ବିସ୍ତାରିତ |ଏଠାରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି ଛଅ ସମୟ ପଏଣ୍ଟ ମଧ୍ୟରୁ ତିନୋଟି (T1, T3, T6) ଯାହାକୁ ଆମେ ବିଭିନ୍ନ ସେଲ୍ ସାନ୍ଧ୍ରତା ପାଇଁ ଚୟନ କରିଛୁ |(ଜି) ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲଟ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଦର୍ଶାଉଛି ଯେ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ କମ୍ ଡିଗ୍ରୀ ମିଳନ ତୁଳନାରେ SPECC1L ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏକ ଉଚ୍ଚ ସ୍ତରରେ ମିଳନ ସ୍ଥଳରେ ସ୍ଥିର ହୋଇଛି |SPECC1L ର ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲଟ୍ ଆଶା କରାଯାଉଥିବା 120 kDa ବ୍ୟାଣ୍ଡ ଏବଂ ଏକ ଉଚ୍ଚ ମଲିକୁଲାର୍ ଓଜନ ବ୍ୟାଣ୍ଡ ଦେଖାଏ, ସମ୍ଭବତ post ଅନୁବାଦ ପରେ ରୂପାନ୍ତରିତ (*) |ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲଟ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ନିମ୍ନ ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ମିଳନ ପାଇଁ ସମାନ ଅବସ୍ଥାରେ କରାଯାଇଥିଲା |ନିମ୍ନ ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ମିଳନସ୍ଥଳରେ SPECC1L ଦେଖାଉଥିବା ଚିତ୍ରଗୁଡ଼ିକ ସମାନ ବ୍ଲଟରୁ ନିଆଯାଇଥିଲା |ସମାନ ବ୍ଲଟ୍ ଅପସାରିତ ହୋଇ β- ଆକ୍ଟିନ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି ସହିତ ପୁନ exam ପରୀକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |(ଜ) ପରିମାଣିକ RT-PCR ବିଶ୍ଳେଷଣ SPECC1L ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପ୍ଟ ସ୍ତରରେ କ significant ଣସି ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଦେଖାଇଲା ନାହିଁ |ଚାରୋଟି ସ୍ independent ାଧୀନ ପରୀକ୍ଷଣରୁ ତ୍ରୁଟି ଦଣ୍ଡିକା SEM କୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ |
(AE) ସେଲ୍ ଆକୃତିର ବିଶ୍ଳେଷଣକୁ ସ୍ ize ାଭାବିକ କରିବା ପାଇଁ ଏବଂ SPECC1L ନକ୍ଡାଉନ୍ (kd) ସହିତ U2OS କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ AJ ପରିବର୍ତ୍ତନକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରିବା ପାଇଁ ଆମେ ଛଅ ସମୟ ପଏଣ୍ଟ (T1-T6) କୁ ବାଛିଲୁ |ଏହି ସମୟ ପଏଣ୍ଟଗୁଡିକର ପ୍ରଥମ ପାଞ୍ଚଟିରେ ଏକକ କୋଷଗୁଡ଼ିକ (T1), ଛୋଟ ସେଲ୍ କ୍ଲଷ୍ଟରଗୁଡିକର 50-70% ଫ୍ୟୁଜନ୍, kd କୋଷଗୁଡିକ (T3) ପୁନ h ଆକୃତି ବିନା ଫ୍ୟୁଜନ୍, kd କୋଷଗୁଡିକ (T4) ଏବଂ 24 ଘଣ୍ଟା ପରିବର୍ତ୍ତନ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |kd (T5) କକ୍ଷଗୁଡ଼ିକର ପରବର୍ତ୍ତୀ ରୂପରେ |SPECC1L ପ୍ରୋଟିନ୍ ମୁଖ୍ୟତ T ସାଇଟୋପ୍ଲାଜ୍ ରେ T1 (A) ରେ ବିସର୍ଜନ କରାଯାଇଥିଲା, କିନ୍ତୁ ଏହାର ଜମା ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟ ପଏଣ୍ଟରେ (B - E, ତୀର) ଇଣ୍ଟରସେଲୁଲାର୍ ସୀମାରେ ଦେଖାଗଲା |(FJ) cat- କ୍ୟାଟେନିନ୍ AJ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ ସହିତ ଜଡିତ ଇଣ୍ଟରସେଲୁଲାର୍ ସୀମାରେ ସମାନ ଜମା ଦେଖାଏ |(A'-E ') SPECC1L ଏବଂ β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଉଚ୍ଚ ସେଲ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତା (ତୀର) ରେ ସେଲ୍ ସୀମାରେ ଓଭରଲିପ୍ ଦାଗ ଦେଖାଏ |(F'-J ') SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ, β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଦାଗ କମ୍ କୋଷର ଘନତାରେ (F'-H') ସାଧାରଣ ଦେଖାଯାଏ, କିନ୍ତୁ କୋଷ ଆକୃତିର ପରିବର୍ତ୍ତନ (I ', J'; ତୀର) ରେ ବିସ୍ତାର ହୁଏ, ଯାହା ଦର୍ଶାଏ ଯେ AJ | ପରିବର୍ତ୍ତନ ହୋଇଛି |ବାର୍ = 10 µm
ତା’ପରେ ଆମେ AJ ଉପରେ SPECC1L ଅଭାବର ପ୍ରଭାବ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କଲୁ |କାନୋନିକାଲ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ F-actin, myosin IIb, β-catenin, ଏବଂ E-cadherin24,25,26,27 କୁ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରି ଆମେ ଅନେକ AJ- ଜଡିତ ମାର୍କର୍ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲୁ |ପୂର୍ବରୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ ପରି SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଆକ୍ଟିନ୍ ଷ୍ଟ୍ରେସ୍ ଫାଇବର ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା (ଚିତ୍ର 3A, B) 18 |ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟ ସହିତ ଜଡିତ ମାୟୋସିନ୍ IIb, ଭିଟ୍ରୋରେ SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ସମାନ ବୃଦ୍ଧି ଦେଖାଇଲା (ଚିତ୍ର 3C, D) |AJ- ଜଡିତ cat- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ସେଲ୍ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ରେ କ୍ୟାଡେରିନ୍ ସହିତ ବାନ୍ଧେ, ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କ୍ୟୁବୋସାଇଟ୍ସରେ ଏକ ସାଧାରଣ “ମହୁଫେଣା” ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ପ୍ୟାଟର୍ ଦେଖାଏ (ଚିତ୍ର 3E, G) |କ Interest ତୁହଳର ବିଷୟ, କନଫୋକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ବ୍ୟବହାର କରି ଫ୍ଲାଟ ଚିତ୍ରଗୁଡ଼ିକରେ β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ (ଚିତ୍ର 3E, F) ଏବଂ ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ୍ (ଚିତ୍ର 3G, H) ମିଳିତ SPECC1L- ଅଭାବୀ କୋଷଗୁଡ଼ିକର କୋଷ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଉପରେ ଦାଗ ବିସ୍ତାରିତ ଦାଗର ପ୍ରମୁଖ ନମୁନା ଦେଖାଇଲା |Kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ AJ- ସହ ଜଡିତ cat- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଦାଗର ଏହି ସମ୍ପ୍ରସାରଣ ମିଳନ ସମୟରେ ଅଧିକ ସ୍ପଷ୍ଟ ହୋଇଥିଲା, କିନ୍ତୁ କୋଷ ଆକାରରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପୂର୍ବରୁ ଦେଖାଗଲା (ଚିତ୍ର 2F-J, F'-J ') |ଏହି ବିସ୍ତାରିତ AJ ଦାଗର ଭ physical ତିକ ପ୍ରକୃତି ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବାକୁ, ଆମେ ଟ୍ରାନ୍ସମିସନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି (TEM) (ଚିତ୍ର 3I, J) ଦ୍ୱାରା SPECC1L-kd U2OS କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଆପିକାଲ୍-ବେସାଲ୍ ପୃଷ୍ଠରେ କୋଷ ସୀମା ପରୀକ୍ଷା କରିଥିଲୁ |କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ ସେଲ୍ (ଚିତ୍ର 3I) ର ବିପରୀତରେ, ଯେଉଁଥିରେ AJ (ତୀର) ର ପୃଥକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ଘନ ଅଞ୍ଚଳ ରହିଥିଲା, kd କୋଷଗୁଡ଼ିକ (ଚିତ୍ର 3J) ଆପିକୋବାସାଲ୍ ବିମାନରେ AJ ର ଉଚ୍ଚ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତା ସୂଚକ ବୃହତ, ସଂଲଗ୍ନ ଅଞ୍ଚଳ ଦେଖାଇଲା |।ଏହା ସହିତ, ଟ୍ରାନ୍ସଭର୍ସ ବିଭାଗରେ, ଆମେ kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ବିସ୍ତୃତ ସେଲ୍ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଫୋଲ୍ଡଗୁଡିକ ଦେଖିଲୁ (ଚିତ୍ର S1A, B), ଯାହା β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଏବଂ ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ୍ ଦାଗ ବ୍ୟାଣ୍ଡ (ଚିତ୍ର 3F, H) ର ବିସ୍ତାରିତ pattern ାଞ୍ଚାକୁ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରେ |AJ ରେ SPECC1L ର ଭୂମିକାକୁ ସମର୍ଥନ କରି, β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ମିଳିତ U2OS କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଲାଇସେଟ୍ରେ SPECC1L ସହିତ ସହ-ପ୍ରତିରୋପଣ କରାଯାଇଥିଲା (ଚିତ୍ର 3K) |AJ ମାର୍କରଗୁଡିକ ପାଇଁ ବିସ୍ତାରିତ ପ୍ରତିରୋପଣ ସହିତ, TEM ବିଶ୍ଳେଷଣ ଆମର ଅନୁମାନ ସହିତ ସମାନ ଥିଲା ଯେ SPECC1L ଅଭାବ AJ ଆପିକାଲ୍-ବେସାଲ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତା ଏବଂ ଭିନ୍ନତା ବ increases ାଇଥାଏ |
(AH) 48 ଘଣ୍ଟା ପୋଷ୍ଟ ଫ୍ୟୁଜନ୍ (T6; A, B) ରେ kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ F-actin ଦାଗ ବୃଦ୍ଧି |F-actin (C, D) ସହିତ ଜଡିତ ମାୟୋସିନ୍ IIb ର ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଦାଗ |SPECC1L-kd (F, H) କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ control- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଏବଂ ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ୍ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଦାଗର ସୁଗମ pattern ାଞ୍ଚା (E, G) ରେ ଦାଗିତ |ବାର୍ = 10 µm(I - J) ଆପିକାଲ୍-ବେସାଲ୍ ଇଣ୍ଟରସେଲୁଲାର୍ ଜଙ୍କସନ୍ ଉପରେ ନଜର ରଖିଥିବା ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ରାଫ୍ |କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଷ୍ଟିକି ଜଙ୍କସନ୍ (I, ତୀର) କୁ ସୂଚିତ କରୁଥିବା ଭିନ୍ନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍-ଘନ ଅଞ୍ଚଳ ଦେଖାଏ |ଏହାର ବିପରୀତରେ, SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଥିବା ସମଗ୍ର ଆପିକାଲ୍-ବେସାଲ୍ ଜଙ୍କସନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ଘନ (J, ତୀର) ପରି ଦେଖାଗଲା, ଯାହା ଆଡେସିଭ୍ ଜଙ୍କସନଗୁଡିକର ଘନତା ଏବଂ ବିସ୍ତାରକୁ ସୂଚାଇଥାଏ |(କ) β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ମିଳିତ U2OS ସେଲ୍ ଲାଇସେଟ୍ସରେ SPECC1L ସହିତ ସହ-ପ୍ରତିରୋପଣ କରାଯାଇଥିଲା |ଚାରୋଟି ସ୍ independent ାଧୀନ ପରୀକ୍ଷଣ ମଧ୍ୟରୁ ଗୋଟିଏକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରୁଥିବା ଗୋଟିଏ ସ୍ଥାନରୁ ପ୍ରତିଛବି ନିଆଯାଇଛି |
କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ମର୍ଫୋଜେନେସିସରେ SPECC1L ର ଭୂମିକା ବୁ To ିବା ପାଇଁ, ଆମେ ଦୁଇଟି ସ୍ independent ାଧୀନ ES ଟ୍ରାପ୍ ସେଲ୍ ଲାଇନ୍, DTM096 ଏବଂ RRH048 (BayGenomics, CA) ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ Specc1l ଅଭାବୀ ମାଉସ୍ ମଡେଲ୍ ସୃଷ୍ଟି କରିଥିଲୁ, ଯାହା ଇଣ୍ଟ୍ରନ୍ 1 ଏବଂ Specc1l ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ 15 ରେ ଧରାଯାଇଥିଲା | ।4A, ଚିତ୍ର S2) |ଡିକୋ ଭେକ୍ଟର ସନ୍ନିବେଶର ଜେନୋମିକ୍ ଅବସ୍ଥାନ ପୁରା ଜିନୋମ୍ କ୍ରମ ଦ୍ determined ାରା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ PCR (ଚିତ୍ର S2) ଦ୍ୱାରା ନିଶ୍ଚିତ କରାଯାଇଥିଲା |ଉଭୟ ଜିନ୍ ଟ୍ରାପ୍ ଡିଜାଇନ୍ ମଧ୍ୟ ଧରିବା ପରେ Specc11-lacZ ସାମ୍ବାଦିକମାନଙ୍କର ଇନ୍-ଫ୍ରେମ୍ ଫ୍ୟୁଜନ୍ ପାଇଁ ଅନୁମତି ଦେଲା |ତେଣୁ, X-gal ଦାଗ ଦ୍ୱାରା ସ୍ଥିର ହୋଇଥିବା lacZ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି Specc11 ଅଭିବ୍ୟକ୍ତିର ସୂଚକ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହେଲା |ଉଭୟ ଆଲେଲ୍ ସମାନ lacZ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି s ାଞ୍ଚା ଦେଖାଇଲେ, ଇଣ୍ଟ୍ରନ୍ 1 ରେ DTM096 ଜିନ୍ ଟ୍ରାପ୍ ସହିତ ଇଣ୍ଟ୍ରନ୍ 15 ରେ RRH048 ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ଦେଖାଗଲା (ଦେଖାଯାଇନଥାଏ) |ଅବଶ୍ୟ, Specc1l ବହୁଳ ଭାବରେ ପ୍ରକାଶିତ ହୋଇଛି, ବିଶେଷତ E E8.5 (ଚିତ୍ର 4B) ରେ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ, ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ଏବଂ E9.5 ଏବଂ E10.5 (ଚିତ୍ର 4C, D) ଏବଂ ମୁଖର ବିକାଶରେ | E10 ରେ5 ଏବଂ ଆଖି (ଚିତ୍ର 4D) |ଆମେ ପୂର୍ବରୁ ରିପୋର୍ଟ କରିଥିଲୁ ଯେ E10.5 ରେ ପ୍ରଥମ ଫାରିନେଜାଲ୍ ଆର୍ଚରେ SPECC1L ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ଏପିଥେଲିୟମ୍ ଏବଂ ଅନ୍ତର୍ନିହିତ ମେସେଞ୍ଚାଇମ୍ 18 ରେ ଉପସ୍ଥିତ ଥିଲା, CNCC ବଂଶ ସହିତ ସମାନ |CNCC ରେ SPECC1L ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ପରୀକ୍ଷା କରିବାକୁ, ଆମେ E8.5 ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡ (ଚିତ୍ର 4E-J) ଏବଂ E9.5 ଖପୁରୀ ବିଭାଗ (ଚିତ୍ର 4K-) ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିଥିଲୁ |E8.5 ରେ, SPECC1L ନ୍ୟୁରାଲ୍ ଫୋଲ୍ଡଗୁଡିକ (ଚିତ୍ର 4E, H) ଦାଗିତ, NCC ମାର୍କର (ଚିତ୍ର 4G, J) ସହିତ ଦାଗଯୁକ୍ତ କୋଷଗୁଡିକ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରେ |E9.5 ରେ, SPECC1L (ଚିତ୍ର 4K, N) ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ CNCC କୁ AP2A (ଚିତ୍ର 4L, M) କିମ୍ବା SOX10 (ଚିତ୍ର 4O, P) ସହିତ ମିଳିତ ଭାବରେ ଦାଗିତ |
(କ) ES DTM096 (ଇଣ୍ଟ୍ରନ୍ 1) ଏବଂ RRH048 (ଇଣ୍ଟ୍ରନ୍ 15) ସେଲ୍ କ୍ଲୋନରେ ଡିକୋ ଭେକ୍ଟର ସନ୍ନିବେଶ ଦେଖାଉଥିବା ମାଉସ୍ Specc11 ଜିନ୍ ର ସ୍କିଜେଟିକ୍ ଉପସ୍ଥାପନା |(BD) ହେଟେରୋଜାଇଗସ୍ Specc1lDTM096 ଭ୍ରୁଣର lacZ ଦାଗ E8.5 ରୁ E10.5 ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ Specc1l ଅଭିବ୍ୟକ୍ତିକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ |NE = neuroectoderm, NF = ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡ, PA1 = ପ୍ରଥମ ଫାରିନେଜାଲ୍ ଆର୍।(EP) SPECC1L ଇମ୍ୟୁନୋଷ୍ଟାଇନ୍ NCC ମାର୍କର AP2A ଏବଂ SOX10 ସହିତ E8.5 (NF; EJ) ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡ ଏବଂ E9.5 (KP) ଖପୁରୀ ବିଭାଗରେ |SPECC1L ଦାଗ ବହୁଳ ଭାବରେ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡ E8.5 (E, H; ତୀର ମୁଣ୍ଡ) ରେ ଦେଖାଗଲା, AP2A (F, G; ତୀର ମୁଣ୍ଡ) ଏବଂ SOX10 (I, J; ତୀର ମୁଣ୍ଡ) ସହିତ ଲେବଲ୍ ହୋଇଥିବା କୋଷଗୁଡିକ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରି |E9.5 ରେ, SPECC1L AP2A (L, M; ତୀର) ଏବଂ SOX10 (O, P; ତୀର) ନାମକ CNCCs (K, N; ତୀର) କୁ ଦୃ strongly ଭାବରେ ଦାଗିତ କଲା |
ହେଟେରୋଜାଇଗସ୍ Specc1lDTM096 / + ଏବଂ Specc1lRRH048 / + ମୂଷା ମଧ୍ୟରେ ଅତିକ୍ରମ କରିବା ଦର୍ଶାଏ ଯେ ଦୁଇଟି ଜିନ୍ ଟ୍ରାପ୍ ଆଲେଲ୍ ସଂପନ୍ନ ନୁହେଁ ଏବଂ ଜିନ୍ ଟ୍ରାପ୍ ଆଲେଲ୍ ପାଇଁ ଯ ound ଗିକ ହେଟେରୋଜାଇଗୋଟସ୍ ଏବଂ ଭ୍ରୁଣିକ ହୋମୋଜାଇଗୋଟଗୁଡିକ ଭ୍ରୁଣିକ ସାଂଘାତିକ (ସାରଣୀ S1) |ମେଣ୍ଡେଲିଆନ୍ ଅନୁପାତ ଜନ୍ମ ସମୟରେ ହେଟେରୋଜାଇଗୋଟ୍ର ବଞ୍ଚିବାର ହାର ହ୍ରାସ କରିବାକୁ ସୂଚିତ କରିଥିଲା ​​(ଆଶା କରାଯାଉଥିବା 1.34 ବନାମ 2.0) |ଆମେ ହେଟେରୋଜାଇଗୋଟସ୍ ମଧ୍ୟରେ କମ୍ ପେରିନାଟାଲ୍ ମୃତ୍ୟୁହାର ଲକ୍ଷ୍ୟ କରିଥିଲୁ, କେତେକଙ୍କର କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ଆନୋମାଲିସ୍ (ଚିତ୍ର S3) ଥିଲା |ଅବଶ୍ୟ, ଏହି ପେରିନାଟାଲ୍ କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ଫେନୋଟାଇପ୍ସର ନିମ୍ନ ଅନୁପ୍ରବେଶ ସେମାନଙ୍କ ଅନ୍ତର୍ନିହିତ ପାଥୋଫିଜୋଲୋଜିକାଲ୍ ଯନ୍ତ୍ରକ study ଶଳ ଅଧ୍ୟୟନ କରିବା କଷ୍ଟକର କରିଥାଏ |ତେଣୁ, ଆମେ ହୋମୋଜାଇଗସ୍ ସ୍ପେକ୍ 11 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟର ଭ୍ରୁଣିକ ସାଂଘାତିକ ଫେନୋଟାଇପ୍ ଉପରେ ଧ୍ୟାନ ଦେଲୁ |
ଅଧିକାଂଶ ଯ ound ଗିକ ହେଟେରୋଜାଇଗସ୍ କିମ୍ବା ହୋମୋଜାଇଗସ୍ Specc1lDTM096 / RRH048 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣ E9.5–10.5 (ଚିତ୍ର 5A - D) ପରେ ବିକଶିତ ହୋଇନଥିଲା, ଏବଂ ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ପୂର୍ବ ଦିଗରେ ବନ୍ଦ ହୋଇନଥିଲା (ଚିତ୍ର 5B, D) ଏବଂ ବେଳେବେଳେ ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ ବନ୍ଦ (ଦେଖାଯାଇ ନାହିଁ) | ।।ଏହି କ୍ରାନିଆଲ୍ ନ୍ୟୁରାଲ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ ତ୍ରୁଟି ଅଧିକାଂଶ CNCC ଚିହ୍ନିତ DLX2 ସହିତ E10.5 ରେ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ ଅବଶିଷ୍ଟ ରହିଥିଲା, ଏଥିରେ କ dis ଣସି ବିଚ୍ଛେଦ ନଥିଲା (ଚିତ୍ର 5A'-D ') |CNCC ର ସାମଗ୍ରିକ ଆକାର ମଧ୍ୟ ହ୍ରାସ ହୋଇଛି କି ନାହିଁ ତାହା ସ୍ଥିର କରିବାକୁ, ଆମେ Wnt1-Cre ଏବଂ ROSAmTmG ସହିତ ଆମର ଜିନ୍ ଟ୍ରାପ୍ ଲାଇନରେ GFP ସହିତ CNCC ଲାଇନଗୁଡ଼ିକୁ ଟ୍ୟାଗ୍ କରିଛୁ |ଆମେ ପୁରା ଭ୍ରୁଣରୁ GFP + NCC ଏବଂ GFP- (RFP +) ଅଣ- NCC କୁ ସଜାଇଥାଉ |E9.5 ରେ, ଫ୍ଲୋ-ସର୍ଟ ହୋଇଥିବା GFP- ଲେବଲ୍ ହୋଇଥିବା CNCC ଗୁଡ଼ିକର ଅନୁପାତ WT ଏବଂ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣ ମଧ୍ୟରେ ବିଶେଷ ପରିବର୍ତ୍ତନ ହୋଇନଥିଲା, ସାଧାରଣ CNCC ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ ସୂଚାଇଥାଏ |ତେଣୁ, ଆମେ ଅନୁମାନ କରିଛୁ ଯେ ଉନ୍ମୁକ୍ତ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ ଅବଶିଷ୍ଟ Wnt1-Cre ଏବଂ DLX2 ଦାଗ (ଚିତ୍ର 5B ') ତ୍ରୁଟିପୂର୍ଣ୍ଣ CNCC ସ୍ତର ହେତୁ ସମ୍ଭବତ SP AJ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଘନତା କିମ୍ବା ବିଚ୍ଛେଦ ହେତୁ SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଦେଖାଯାଏ |ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ CNCC ର ଉପସ୍ଥିତି ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ ଆମେ NCC ମାର୍କର SOX10, AP2A, ଏବଂ DLX2 ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲୁ (ଚିତ୍ର 5E-R) |E8.5 ରେ, ସମସ୍ତ ତିନୋଟି ଏନସିସି ମାର୍କର ପାଇଁ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡ ଦାଗ WT (ଚିତ୍ର 5E, G, I) ଏବଂ Specc1l ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ (ଚିତ୍ର 5F, H, J) ବିଭାଗରେ ଦେଖାଗଲା |E9.5 ରେ, ଯେତେବେଳେ NCC ମାର୍କରଗୁଡିକ WT ବିଭାଗରେ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ NCC ଦାଗ (ଚିତ୍ର 5 ମି, ଓ, Q), ଅବଶିଷ୍ଟ NCC ଦାଗ Specc1l ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣର ଖୋଲା ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ ଦେଖାଗଲା (ଚିତ୍ର 5N, P, R) |କାରଣ SOX10 ଏବଂ DLX2 CNCC ଗୁଡ଼ିକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ କରେ, ଏହି ଫଳାଫଳ ସୂଚିତ କରେ ଯେ SPECC1L- ଅଭାବୀ CNCC ଗୁଡିକ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ ପରେ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ ହାସଲ କରନ୍ତି କିନ୍ତୁ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କରିବାରେ ବିଫଳ ହୁଅନ୍ତି |
Specc11 ର ଅଭାବ ତ୍ରୁଟିପୂର୍ଣ୍ଣ ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ, କ୍ରାନିଆଲ୍ ସ୍ନାୟୁ କ୍ରେଷ୍ଟ୍ କୋଷ ଏବଂ AJ ଗୁଡ଼ିକର ବିଲୋପକୁ ନେଇଥାଏ |
(A, B ') E9.5 WT (A) ଭ୍ରୁଣ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ କ୍ରାନିଆଲ୍ ସ୍ନାୟୁ କ୍ରେଷ୍ଟ କୋଷଗୁଡିକ (CNCC) Wnt1-Cre (A') ସହିତ ଲେବଲ୍ ହୋଇଛି |ଏହାର ବିପରୀତରେ, Specc11 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣଗୁଡ଼ିକ ଖୋଲା ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡ (B), ତୀର ମୁଣ୍ଡ) ଏବଂ CNCC ଗୁଡ଼ିକୁ ଦେଖାଏ ଯାହା ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ ହୋଇନାହିଁ (B ', ତୀର ମୁଣ୍ଡ) |(C, D ') ଉଜ୍ଜ୍ୱଳ କ୍ଷେତ୍ର ପ୍ରତିଛବିଗୁଡିକ (C, D') ଏବଂ CN10 ମାର୍କର DLX2 ର E10.5 WT ଭ୍ରୁଣ (C, C ') ଏବଂ Specc1l (D, D') ର ପ୍ରତିରୋପଣ (C ', D') |WT E10.5 ଭ୍ରୁଣରେ, DLX2- ପଜିଟିଭ୍ CNCC ଗିଲ୍ ଆର୍ଚ (C ', ତୀର) କୁ ଉପନିବେଶ କରିଥାଏ, ଯେତେବେଳେ କି ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟରେ, ଖୋଲା ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ (D', ତୀର) ଏବଂ ପ୍ରଥମ ଫାରିନେଜ୍ ଆର୍ଚରେ (D ',) ଦେଖାଯାଏ | ତୀର)କିଛି ଦାଗ (ତୀର) ସହିତ CNCC ର ଖରାପ ବିଳମ୍ବ ଏବଂ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣକୁ ସୂଚାଇଥାଏ |ER) E8.5 (E - L) ଏବଂ E9.5 (M - R) ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ WT ଏବଂ Specc1l ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣର ବିଭାଗଗୁଡିକ NCC ମାର୍କର SOX10 (E, F, M, N), AP2A (G, H, O, P) ଏବଂ DLX2 (I, J, Q, R) |E8.5 ରେ, ବନ୍ୟ ପ୍ରକାର ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡ (NF) ଏବଂ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ବିଭାଗରେ NCC ଦାଗ ଦେଖାଗଲା |E8.5 WT (K) ଏବଂ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ (L) ରେ SOX10 ଏବଂ β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ର ମିଳିତ ଦାଗ, ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ କୋଷ ସୀମାରେ β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଦାଗ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା |E9.5 ରେ, ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ CNCCs (M, O, Q) ର ବନ୍ୟ ପ୍ରକାରର ଦାଗ ଦେଖାଯାଇଥିବାବେଳେ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟରେ, ଅଣସଂଗଠିତ CNCC ଗୁଡିକ ଖୋଲା ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡ (N, P, R) ଦାଗିତ |(S - Z) E9.5 ମ୍ୟୁଟେସନ୍ ସହିତ WT ଏବଂ Specc11DTM096 / RRH048 ଭ୍ରୁଣର କରୋନାଲ୍ ବିଭାଗରେ ଭିଭୋ AJ ଲେବେଲିଂ ବିଶ୍ଳେଷଣ |ଉପର ଡାହାଣ କୋଣରେ ଏକ ଆନୁମାନିକ ବିଭାଗୀୟ ବିମାନ ଦେଖାଯାଏ |ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଟିସୁ ବିଭାଗରେ, F-actin (S, T) ଏବଂ myosin IIb (U, V) ର ଦାଗ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା |ଚିତ୍ର in ରେ ଥିବା ଭିଟ୍ରୋ ଫଳାଫଳ ପରି, ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣରେ β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ (ଡବ୍ଲୁ, ଏକ୍ସ) ଏବଂ ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ୍ (Y, Z) ପାଇଁ ବର୍ଦ୍ଧିତ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଦାଗ ପରିଲକ୍ଷିତ ହୋଇଥିଲା |(AA-BB) ଆପିକାଲ୍-ବେସାଲ୍ କୋଷର ସୀମା ବାହାରେ ଦେଖାଯାଉଥିବା ଏକ ବନ୍ୟ ପ୍ରକାର ଭ୍ରୁଣର ଏକ ବିଭାଗର ଏକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ରାଫ୍ ଆଡେସିଭ୍ ଜଙ୍କସନ୍ (AA, ତୀର) ର ଏକ ଭିନ୍ନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍-ଘନ ଅଞ୍ଚଳକୁ ଦର୍ଶାଏ |ଏହାର ବିପରୀତରେ, Specc11 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣ (ବିବି, ତୀର) ବିଭାଗରେ, ସମଗ୍ର ଆପିକୋବାସାଲ୍ ଜଙ୍କସନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ଘନ ଅଟେ, ଯାହା ଆଡେସିଭ୍ ଜଙ୍କସନ୍ ର ବର୍ଦ୍ଧିତ ଘନତା ଏବଂ ବିଚ୍ଛେଦକୁ ସୂଚାଇଥାଏ |
ଆମର ଅନୁମାନ ପରୀକ୍ଷା କରିବାକୁ ଯେ ପରିବର୍ତ୍ତିତ AJ ହେତୁ ସ୍ତର ହ୍ରାସ ହୋଇଛି, ଆମେ Specc1l ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣର ଖୋଲା ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ AJ ଲେବେଲିଂ ପରୀକ୍ଷା କରିଛୁ (ଚିତ୍ର 5S-Z) |ଆମେ ଆକ୍ଟିନ୍ ଷ୍ଟ୍ରେସ୍ ଫାଇବରର ବୃଦ୍ଧି (ଚିତ୍ର 5S, T) ଏବଂ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫାଇବର (ଚିତ୍ର 5U, V) ଉପରେ ମାୟୋସିନ୍ IIB ଦାଗର ଏକ ସମନ୍ୱିତ ଲୋକାଲାଇଜେସନ୍ ଦେଖିଲୁ |ଗୁରୁତ୍ ly ପୂର୍ଣ ଭାବରେ, ଆମେ ଇଣ୍ଟରସେଲୁଲାର୍ ସୀମାରେ β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ (ଚିତ୍ର 5W, X) ଏବଂ ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ୍ (ଚିତ୍ର 5Y, Z) ର ବର୍ଦ୍ଧିତ ଦାଗ ଦେଖିଲୁ |ଆମେ ମଧ୍ୟ E8.5 ଭ୍ରୁଣର ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ NCC ର cat- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଦାଗ ପରୀକ୍ଷା କରିଥିଲୁ (ଚିତ୍ର 5K, L) |AJ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଆରମ୍ଭ ହୋଇଥିବାର ସୂଚାଇ ସ୍ପେକ୍ସ 1 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ (ଚିତ୍ର 5L ଏବଂ K) β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଦାଗ ଅଧିକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ମନେହୁଏ |E9.5 ଭ୍ରୁଣର ଖପୁରୀ ବିଭାଗର ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ରାଫ୍ ରେ, ଆମେ WT (ଚିତ୍ର 5AA, BB ଏବଂ S1E-H) ତୁଳନାରେ Specc1l ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣରେ ବର୍ଦ୍ଧିତ ବିସ୍ତାରିତ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍-ଘନ ଦାଗ ଦେଖିଲୁ |ଏକାଠି ନିଆଗଲା, ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ SPECC1L-kd U2OS କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଆମର ଭିଟ୍ରୋ ଫଳାଫଳକୁ ସମର୍ଥନ କରେ ଏବଂ ପରାମର୍ଶ ଦେଇଥାଏ ଯେ ଆମର ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣରେ CNCC ସ୍ତରକରଣ ପୂର୍ବରୁ ଅବିରାଣ୍ଟ AJ ଦାଗ |
AKT କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ ଇ-କ୍ୟାଡେରିନ୍ ସ୍ଥିରତା ମଧ୍ୟରେ ଜଣାଶୁଣା ବିରୋଧୀ ସମ୍ପର୍କକୁ ଦେଖି, 17,28 ଆମେ PI3K-AKT ସଙ୍କେତର ଜଡିତତାକୁ ଅନୁମାନ କରିଛୁ |ଏହା ସହିତ, ଆମେ ଆମର କିଛି ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣରେ ସବପିଡର୍ମାଲ୍ ଫୁଲିବା ଦେଖିଲୁ ଯାହା E9.5-10.5 ରେ ସାଂଘାତିକତା (<5%) ରୁ ରକ୍ଷା ପାଇଲା ଏବଂ ଏହା ବଦଳରେ E13.5 (ଚିତ୍ର S3) ରେ ସ୍ଥିର ହେଲା |PDGFRα12 ଉପରେ ଆଧାରିତ PI3K-AKT ସଙ୍କେତର ସବେପିଡର୍ମାଲ୍ ଭେସିକଲ୍ |Fantauzzo et al।(2014) ରିପୋର୍ଟ କରିଛି ଯେ PdgfraPI3K / PI3K ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣରେ PDGFRα- ଆଧାରିତ PI3K ଆକ୍ଟିଭେସନ୍ ବ୍ୟାଘାତ ଦ୍ sub ାରା ସବପିଡର୍ମାଲ୍ ଭେସିକଲ୍, ସ୍ନାୟୁ ନଳୀ ତ୍ରୁଟି ଏବଂ ଖଣ୍ଡ ପାଲଟ୍ ଫେନୋଟାଇପ୍ ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ |ପ୍ରକୃତରେ, ପାନ- AKT ଏବଂ ସକ୍ରିୟ ଫସଫୋରାଇଟେଡ୍ Ser473-AKT ର ସ୍ତର ସ୍ପେକ୍ସ 1 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଟିସୁରେ ଭିଭୋରେ E9.5 ଭ୍ରୁଣ ଗିରଫ (ଚିତ୍ର 6A-D) କୁ ହ୍ରାସ ପାଇଲା |ଫସଫୋରାଇଟେଡ୍ Ser473-AKT ସ୍ତରର ହ୍ରାସ ସମ୍ପୁର୍ଣ୍ଣ ଭାବରେ ଭିଭୋ (FIG। 6E) ଏବଂ ଭିଟ୍ରୋ (FIG। 6F) ରେ ପାନ- AKT ସ୍ତର ହ୍ରାସ ହେତୁ ହୋଇପାରେ |ଏକ ଭିଟ୍ରୋ ହ୍ରାସ ଦେଖାଗଲା ଯେତେବେଳେ U2OS କୋଷଗୁଡ଼ିକ କୋଷର ଆକାର ଏବଂ AJ ଘନତାରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ସହିତ ଦୃ strongly ଭାବରେ ମିଳିତ ହେଲେ (ଚିତ୍ର 6D) |ଏହିପରି, ଆମର ତଥ୍ୟ ସୂଚିତ କରେ ଯେ SPECC1L ହେଉଛି କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ମର୍ଫୋଜେନେସିସରେ PI3K-AKT ସଙ୍କେତର ଏକ ଉପନ୍ୟାସ ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରକ |
(A - E) E8.5 (A, B) ଏବଂ E9.5 (C, D) ଖପୁରୀ ବିଭାଗ କିମ୍ବା Specc1l ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣରୁ E9.5 ଲାଇସେଟ୍ ସକ୍ରିୟ ଫସଫୋରାଇଟେଡ୍ S473-AKT ଏବଂ ପାନ୍- AKT ପ୍ରୋଟିନ୍ ହ୍ରାସ ସ୍ତର ଦେଖାଏ | , WT ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ତୁଳନାରେ |ସମାନ ଅବସ୍ଥାରେ ୱାଇଲ୍ଡ-ଟାଇପ୍ ଲାଇସେଟ୍ ଏବଂ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଲାଇସେଟ୍ ଉପରେ ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲୋଟିଂ କରାଯାଇଥିଲା |SPECC1L ପାଇଁ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ଚିତ୍ରଗୁଡ଼ିକ ଗୋଟିଏ ବ୍ଲଟରୁ ନିଆଯାଇଛି |ସମାନ ବ୍ଲଟ୍ ଅପସାରଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଆଣ୍ଟି-ପ୍ୟାନ୍-ଏସିଟି ଏବଂ β- ଆକ୍ଟିନ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି ସହିତ ପୁନ exam ପରୀକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |E8.5 ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ ପାନ- AKT ସ୍ତର ଏବଂ E9.5 ଖପୁରୀ ବିଭାଗରେ ଫସଫୋରାଇଟେଡ୍ S473-AKT ର ସ୍ତର ଯଥେଷ୍ଟ ହ୍ରାସ ପାଇଲା |(ଚ) ପାନ୍- AKT ସ୍ତର ସମାନ ଭାବରେ ଉଚ୍ଚ ମିଳନ ସମୟରେ ଅମଳ ହୋଇଥିବା SPECC1L-kd U2OS କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଲାଇସେଟ୍ରେ ହ୍ରାସ ପାଇଲା |ତ୍ରୁଟି ଦଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକ ତିନୋଟି ସ୍ independent ାଧୀନ ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲଟ୍ ପରିମାଣରୁ SEM ଗୁଡ଼ିକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ |(GJ) E9.5 ରେ WT ଭ୍ରୁଣର ବିଭାଗଗୁଡ଼ିକ ଯଥାକ୍ରମେ KI67 ଏବଂ ଖଣ୍ଡିଆ କାସପେଜ୍ 3 ସହିତ ଦାଗଯୁକ୍ତ, କୋଷ ବିସ୍ତାର (G, G ') ଏବଂ ସାମାନ୍ୟ ଆପୋପୋଟୋଟିକ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ (H, H') ଦେଖାଏ |Specc11 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣଗୁଡ଼ିକ ତୁଳନାତ୍ମକ କୋଷ ବିସ୍ତାର (I) ଦେଖାଏ, କିନ୍ତୁ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ରୋଗରେ ଆକ୍ରାନ୍ତ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ସଂଖ୍ୟା ଯଥେଷ୍ଟ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା (J) |
ତା’ପରେ ଆମେ ବିସ୍ତାର ଏବଂ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ର ମାର୍କର୍ ପରୀକ୍ଷା କଲୁ |ଆମେ E9.5 ଭ୍ରୁଣର ବିସ୍ତାରରେ କ difference ଣସି ପାର୍ଥକ୍ୟ ଦେଖିଲୁ ନାହିଁ (ଚିତ୍ର 6E, G ତୁଳନାରେ I ତୁଳନାରେ) WT ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ପାଇଁ ବିସ୍ତାର ସୂଚକାଙ୍କ 82.5% ଏବଂ KI67 ଦାଗ ଦ୍ୱାରା ମାପାଯାଇଥିବା Specc1l ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ପାଇଁ 86.5% (p <0.56, ଫିସର) ପ୍ରକୃତ ପରୀକ୍ଷା)ସେହିପରି ଭାବରେ, ଆମେ ଆପୋପ୍ଟୋସିସରେ କ difference ଣସି ପାର୍ଥକ୍ୟ ଦେଖିଲୁ ନାହିଁ ଯାହା E8.5 ରେ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ ଖଣ୍ଡ ଖଣ୍ଡ ହୋଇ ଦାଗ ଦ୍ୱାରା ମାପ କରାଯାଇଥାଏ, ଯେପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଭ୍ରୁଣ ଗିରଫ ନହେବା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ (ଦେଖାଯାଇନଥାଏ) |ଏହାର ବିପରୀତରେ, ସମସ୍ତ E9.5 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣରେ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ଯଥେଷ୍ଟ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା (ଚିତ୍ର 6F, H ଏବଂ J) |ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ର ଏହି ସାମଗ୍ରିକ ବୃଦ୍ଧି ହ୍ରାସ ହୋଇଥିବା PI3K-AKT ସଙ୍କେତ ଏବଂ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଭ୍ରୁଣ ଜନିତ ମୃତ୍ୟୁ 29,30,31 ସହିତ ସମାନ ଅଟେ |
ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ, ଆମର kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ AJ ପରିବର୍ତ୍ତନରେ PI3K-AKT ସିଗନାଲ୍ ପାଇଁ ଏକ କାରଣ ଭୂମିକା ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ, ଆମେ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ରାସାୟନିକ ଭାବରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିଛୁ (ଚିତ୍ର 7A-F) |ଆମେ ଏକ ମାର୍କର୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ସେଲ୍ ଆକୃତି ପରିବର୍ତ୍ତନ ଫେନୋଟାଇପ୍, ଯାହାକୁ ଆମେ ଲମ୍ବା ଆକାର (ଦ length ର୍ଘ୍ୟ) ର ଅନୁପାତକୁ ଅନୁରୂପ ଭୂଲମ୍ବ ଆକାର (ମୋଟେଇ) ବ୍ୟବହାର କରି ପରିମାଣ କରିଥିଲୁ |ଅପେକ୍ଷାକୃତ ଗୋଲାକାର କିମ୍ବା କ୍ୟୁବାଇଡାଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ପାଇଁ 1 ର ଅନୁପାତ ଆଶା କରାଯାଏ (ଚିତ୍ର 7G) |କୋଷ ଆକୃତି ସହିତ, ଆମେ β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଦାଗ (ଚିତ୍ର 7A'-F ') ଦ୍ୱାରା AJ ଉପରେ ଏହାର ପ୍ରଭାବକୁ ନିଶ୍ଚିତ କରିଥିଲୁ |ୱର୍ଟମ୍ୟାନ୍ ବ୍ୟବହାର କରି PI3K-AKT ରାସ୍ତାର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ କୋଷର ଆକାର ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିବା ପାଇଁ ଯଥେଷ୍ଟ ଥିଲା (ଚିତ୍ର 7A, C) ଏବଂ AJ (ଚିତ୍ର 7A ') |PI3K-AKT ଆକ୍ଟିଭେଟର୍ SC-79 କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ ସେଲ୍ ଗୁଡିକରେ ସେଲ୍ ଆକୃତି (FIG। 7A, E) କିମ୍ବା AJ ବିସ୍ତାର (FIG। 7A ') କୁ ପ୍ରଭାବିତ କଲା ନାହିଁ |SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ, PI3K-AKT ପଥକୁ ଅଧିକ ଦମନ କରିବା ଦ୍ ap ାରା ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ (ଚିତ୍ର 7B, D) ଏବଂ β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଦାଗ (ଚିତ୍ର 7B ') ରେ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ବୃଦ୍ଧି ଘଟିଥିଲା, ଯାହା ଆମର ଭିଭୋ ଭାରୀ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ସହିତ ସମାନ |ଗୁରୁତ୍ ly ପୂର୍ଣ ଭାବରେ, PI3K-AKT ରାସ୍ତାର ସକ୍ରିୟତା କୋଷ ଆକୃତି (ଚିତ୍ର 7 ବି, ଏଫ୍) ଏବଂ ଏଜି ଫେନୋଟାଇପ୍ (ଚିତ୍ର 7 ବି ”) କୁ ଯଥେଷ୍ଟ ଉନ୍ନତ କରିଥିଲା ​​|ସେଲ୍ ଆକୃତିର ପରିବର୍ତ୍ତନଗୁଡିକ ସେଲ୍ ରାଉଣ୍ଡେନ୍ସ ଅନୁପାତ (CCR) ଭାବରେ ପରିମାଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଉପରୋକ୍ତ ବର୍ଣ୍ଣନା ଅନୁଯାୟୀ ମହତ୍ତ୍ for ପାଇଁ ତୁଳନା କରାଯାଇଥିଲା (FIG। 7G) |ପ୍ରକୃତରେ, କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ କୋଷଗୁଡିକରେ (ଚିତ୍ର 7G, CCR = 1.56), ୱର୍ଟମ୍ୟାନ୍ ଚିକିତ୍ସା କୋଷର ଆକାରକୁ (ଚିତ୍ର 7G, CCR = 3.61, p <2.4 × 10-9) ଯଥେଷ୍ଟ ପରିମାଣରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିବା ପାଇଁ ଯଥେଷ୍ଟ ଥିଲା | SPECC1L ରେ |-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକ (ଚିତ୍ର 7G, CCR = 3.46) |SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକର ୱର୍ଟମ୍ୟାନ୍ ଚିକିତ୍ସା (ଚିତ୍ର 7G, CCR = 3.60, ଅବହେଳିତ) ଚିକିତ୍ସା ହୋଇନଥିବା kd କୋଷଗୁଡ଼ିକ (ଚିତ୍ର 7G, CCR = 3.46, ଅବହେଳିତ) କିମ୍ବା ୱର୍ଟମ୍ୟାନ୍-ଚିକିତ୍ସିତ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କୋଷଗୁଡ଼ିକ (ଚିତ୍ର 7G) ଠାରୁ ଅଧିକ ମହତ୍ .ପୂର୍ଣ ନୁହେଁ |, CCR = 3.46, ଅବହେଳିତ) ଅତିରିକ୍ତ ଭାବରେ କୋଷ ବିସ୍ତାରକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରେ (7G, CCR = 3.61, ଅବହେଳିତ) |ସବୁଠାରୁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ କଥା ହେଉଛି, SC-79 AKT ଆକ୍ଟିଭେଟର୍ SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକର ବିସ୍ତାରିତ ଫେନୋଟାଇପ୍ ପୁନ restored ସ୍ଥାପିତ କରିଛି (ଚିତ୍ର 7G, CCR = 1.74, p <6.2 × 10-12) |ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ନିଶ୍ଚିତ କରେ ଯେ SPECC1L PI3K-AKT ସଙ୍କେତକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିଥାଏ ଏବଂ ପରାମର୍ଶ ଦେଇଥାଏ ଯେ SPECC1L ର ମଧ୍ୟମ ହ୍ରାସ ସେଲ୍ ଆଡିଶିନ୍ ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ, ଯେତେବେଳେ ଏକ ଦୃ strong ହ୍ରାସ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ (ଚିତ୍ର 8) କୁ ନେଇଥାଏ |
(A - F ') କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ (A, C, E) ଏବଂ SPECC1L-kd (B, D, F) କୋଷଗୁଡିକ PI3K-AKT ପାଥୱେ ଇନହିବିଟର ୱର୍ଟମ୍ୟାନ୍ (C, D) କିମ୍ବା SC-79 ଆକ୍ଟିଭେଟର୍ (E, F) ଚିକିତ୍ସା ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ | ଚିକିତ୍ସା ହୋଇନଥିବା କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ହେଉଛି ସାଧାରଣ cat- ବିଲେଇ ସେଲୁଲାର୍ ଦାଗ (A ') ସହିତ କ୍ୟୁବାଇଡାଲ୍ (A), ଯେତେବେଳେ କିଡି କୋଷଗୁଡ଼ିକ ବର୍ଦ୍ଧିତ β- ବିଲେଇ ଦାଗ (B) ସହିତ ବ ong ଼ିଥାଏ |PI3K-AKT ପଥପଥକୁ ଦମନ କରିବା ପରେ, ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କକ୍ଷଗୁଡ଼ିକ (C) β- କ୍ୟାଟ୍ ବିସ୍ତାର (C ') ସହିତ ବ ong ଼ିଗଲା, ଯେତେବେଳେ କିଡି କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ (D) ଅତିକ୍ରମ କରିବାକୁ ଲାଗିଲେ, ଯାହା ଆମର ଅତ୍ୟଧିକ ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଭ୍ରୁଣ ପରି ଏବଂ ଅତ୍ୟଧିକ ବର୍ଦ୍ଧିତ β- ବିଲେଇ ଦେଖାଏ |ଦାଗ (D ') |PI3K-AKT ପାଥ୍ ସକ୍ରିୟ ହେବା ପରେ, କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକ କ୍ୟୁବାଇଡାଲ୍ (E) ରହିଲା ଏବଂ ସାଧାରଣ β- ବିଲେଇ (E ') ଦାଗ ରହିଲା, ଯେତେବେଳେ କିଡି କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଯଥେଷ୍ଟ ଉନ୍ନତ ସେଲ୍ ଆକୃତି (F) ଏବଂ β- ବିଲେଇ (F') ଦାଗ ଦେଖାଇଲେ | (ଜି) ଦୀର୍ଘତମ ଆକାର (ଦ length ର୍ଘ୍ୟ) ର ସେଲ୍ ରାଉଣ୍ଡେନ୍ସ ଅନୁପାତ (CCR) ଏବଂ ମେଟା ମର୍ଫ୍ ସଫ୍ଟୱେର୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଅନୁରୂପ ଭୂଲମ୍ବ ଆକାର (ମୋଟେଇ) ବ୍ୟବହାର କରି (AF) ରେ ସେଲ୍ ଆକୃତି ପରିବର୍ତ୍ତନର ଡିଗ୍ରୀ ପରିମାଣ କରାଯାଇଥିଲା |ଚିକିତ୍ସା ହୋଇନଥିବା (NT) SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକ (CCR = 3.46) ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଅପେକ୍ଷା ଯଥେଷ୍ଟ ଲମ୍ବା ଥିଲା (CCR = 1.56, p <6.1 × 10–13) |କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ PI3K-AKT ପଥକୁ ୱର୍ଟଙ୍କ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ସେଲ୍ ଆକୃତିର ସମାନ ବିସ୍ତାର ପାଇଁ ଯଥେଷ୍ଟ ଥିଲା (CCR = 3.61, p <2.4 × 10-9) |ସେହିଭଳି, SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ SC-79 ଦ୍ୱାରା AKT ଆକ୍ଟିଭେସନ୍ ସ୍ତର ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପାଇଁ କୋଷ ବିସ୍ତାରକୁ ପୁନ restored ସ୍ଥାପିତ କଲା (CCR = 1.74, p <6.2 × 10–12) |SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକର ୱର୍ଟମ୍ୟାନ୍ ଚିକିତ୍ସା ଦ୍ ap ାରା ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା କିନ୍ତୁ ଚିକିତ୍ସିତ ହୋଇନଥିବା kd (CCR = 3.46, ns) କିମ୍ବା ୱର୍ଟମ୍ୟାନ୍-ଚିକିତ୍ସିତ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କୋଷ (3.61) ତୁଳନାରେ କୋଷ ଆକୃତିର ପରିବର୍ତ୍ତନ (CCR = 3.60) ରେ ଆଉ ବୃଦ୍ଧି ଘଟିଲା ନାହିଁ |ns = କିଛି ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ନୁହେଁ |+/- 50 ଟି କୋଷ ପାଇଁ SEM ମାପ ଦେଖାଯାଏ |ଛାତ୍ରଙ୍କ ଟି-ଟେଷ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରି ପରିସଂଖ୍ୟାନିକ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା |
(କ) ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଏବଂ PI3K-AKT ପଥର ସକ୍ରିୟତାର ସ୍କିଜେଟିକ୍ ଉପସ୍ଥାପନା, ଯଥାକ୍ରମେ AJ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଏବଂ ଉଦ୍ଧାର କାର୍ଯ୍ୟ |(ଖ) SPECC1L ଦ୍ୱାରା AKT ପ୍ରୋଟିନ୍ ସ୍ଥିରତା ପାଇଁ ପ୍ରସ୍ତାବିତ ମଡେଲ୍ |
ପ୍ରିମିଗ୍ରେଟୋରୀ CNCC ଗୁଡିକ ପୂର୍ବର ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡ ନ୍ୟୁରୋପିଥେଲିଆଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକରୁ ପୃଥକ ହେବା ପାଇଁ AJ ଲାଇସିସ୍ ଆବଶ୍ୟକ କରନ୍ତି 1,15,32 |AJ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକର ଦାଗ ବୃଦ୍ଧି ଏବଂ ଉଭୟ ଭିଟ୍ରୋ ଏବଂ ଭିଭୋରେ SPECC1L- ଅଭାବୀ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଆପିକାଲ୍-ବେସାଲ୍ AJ ଅସୀମେଟ୍ରିକ୍ ବିତରଣର କ୍ଷତି, SPECC1L ର β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ସହିତ ଭ physical ତିକ ନିକଟତରତା, ପରାମର୍ଶ ଦେଇଥାଏ ଯେ AJ ସ୍ଥାନୀୟ ସ୍ଥିରତାକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ବଜାୟ ରଖିବା ପାଇଁ SPECC1L କାର୍ଯ୍ୟ କରିଥାଏ | ସଂଗଠନ ମାଂସପେଶୀ |ଆକ୍ଟିନ୍ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ |ଆକ୍ଟିନ୍ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ ଏବଂ β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ସହିତ SPECC1L ର ଆସୋସିଏସନ ଏବଂ SPECC1L ଅନୁପସ୍ଥିତିରେ ଘନୀଭୂତ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟ ସଂଖ୍ୟା ବୃଦ୍ଧି AJ ଘନତ୍ୱରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ବୃଦ୍ଧି ସହିତ ସମାନ |ଅନ୍ୟ ଏକ ସମ୍ଭାବନା ହେଉଛି SPECC1L- ଅଭାବୀ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ବହୁ ସଂଖ୍ୟକ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫାଇବର ଇଣ୍ଟରସେଲୁଲାର୍ ଟେନସନରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଆଣେ |କାରଣ ସେଲ୍ୟୁଲାର୍ ଷ୍ଟ୍ରେସ୍ AJ 33 ଗତିଶୀଳତାକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରେ, ଭୋଲଟେଜ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଅଧିକ ବିସ୍ତାରିତ AJ 34 ହୋଇପାରେ |ତେଣୁ ଯେକ any ଣସି ପରିବର୍ତ୍ତନ CNCC ସ୍ତର ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇବ |
Wnt1 ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ ପ୍ରକାଶିତ ହୁଏ ଯାହା ସ୍ନାୟୁ କ୍ରେଷ୍ଟ କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ ସୃଷ୍ଟି କରେ |ଏହିପରି, Wnt1-cre lineage tracing ଉଭୟ ପୂର୍ବ ଏବଂ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ NCC35 କୁ ଚିହ୍ନିତ କରେ |ତଥାପି, Wnt1 ମଧ୍ୟ ଡୋରସାଲ୍ ମସ୍ତିଷ୍କ ଟିସୁ କ୍ଲୋନଗୁଡିକ ଚିହ୍ନିତ କରେ ଯାହା ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରୁ 35,36 ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ ହୋଇଥିଲା, ଏହା ସମ୍ଭବତ open ଖୋଲା ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡରେ Wnt1 ମାର୍କର ପାଇଁ E9.5 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟର ଦାଗ CNCC ନୁହେଁ |NCC ମାର୍କର AP2A ଏବଂ SOX10 ପାଇଁ ଆମର ସକରାତ୍ମକ ଦାଗ ନିଶ୍ଚିତ କରିଛି ଯେ Specc11 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣର ଉଦ୍ଭାବିତ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡଗୁଡ଼ିକ ପ୍ରକୃତରେ CNCC ଧାରଣ କରିଛି |ଏହା ସହିତ, ଯେହେତୁ AP2A ଏବଂ SOX10 ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ NCC ର ମାର୍କର୍ ଅଟେ, ସକରାତ୍ମକ ଦାଗ ସୂଚାଇ ଦେଇଛି ଯେ ଏହି କୋଷଗୁଡ଼ିକ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ ପରବର୍ତ୍ତୀ CNCC ଯାହା E9.5 ଦ୍ୱାରା ପୃଥକ ହୋଇପାରିବ ନାହିଁ |
ଆମର ତଥ୍ୟ ସୂଚିତ କରେ ଯେ SPECC1L ଦ୍ A ାରା AJ ର ମଲିକୁଲାର ନିୟନ୍ତ୍ରଣ PI3K-AKT ସିଗନାଲ୍ ଦ୍ୱାରା ମଧ୍ୟସ୍ଥ |SPECC1L ଅଭାବୀ କୋଷ ଏବଂ ଟିସୁରେ AKT ସଙ୍କେତ କମିଯାଏ |Fantauzzo et al ଦ୍ୱାରା ଖୋଜ |କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ମର୍ଫୋଜେନେସିସରେ PI3K-AKT ସଙ୍କେତ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରତ୍ୟକ୍ଷ ଭୂମିକାକୁ ସମର୍ଥନ କରନ୍ତୁ |(2014) ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ PDGFRα- ଆଧାରିତ PI3K-AKT ସଙ୍କେତର ସକ୍ରିୟତାର ଅଭାବ ଏକ ଖଣ୍ଡ ଖଣ୍ଡ ପାଲଟି ଫେନୋଟାଇପ୍ କୁ ନେଇଥାଏ |ଆମେ ଏହା ମଧ୍ୟ ଦେଖାଉ ଯେ U3OS କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ AJ ଏବଂ ସେଲ୍ ଆକୃତି ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିବାକୁ PI3K-AKT ରାସ୍ତାର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଯଥେଷ୍ଟ |ଆମର ଅନୁସନ୍ଧାନ ସହିତ ସ୍ଥିର, କେନ୍ ଏଟ୍ |37 ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ ଏଣ୍ଡୋଥେଲିଆଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ PI3K α110 ସବନିଟ୍ ର ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପେରିସେଲୁଲାର୍ cat- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଦାଗରେ ସମାନ ବୃଦ୍ଧି ଘଟାଏ, ଯାହାକୁ “କନେକ୍ଟିଭିଟି ଇଣ୍ଡେକ୍ସ” ର ବୃଦ୍ଧି ବୋଲି କୁହାଯାଏ |ଅବଶ୍ୟ, ଏଣ୍ଡୋଥେଲିଆଲ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଯାହାର ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟଗୁଡିକ ଅତ୍ୟଧିକ ସଂଗଠିତ ହୋଇସାରିଛି, PI3K-AKT ପଥକୁ ଦମନ କରିବା ଏକ ଖାଲି କୋଷ ଆକାରରେ ପରିଣତ ହୁଏ |ଏହାର ବିପରୀତରେ, SPECC1L-kd U2OS କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଏକ ବିସ୍ତୃତ କୋଷ ଆକୃତି ଦେଖାଇଲେ |ଏହି ପାର୍ଥକ୍ୟ ସେଲ୍ ପ୍ରକାର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ହୋଇପାରେ |PI3K-AKT ସଙ୍କେତର ଦମନ ଆକ୍ଟିନ୍ ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍ ଉପରେ ସ୍ଥାୟୀ ଭାବରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ, କୋଷ ଆକୃତି ଉପରେ ଏହାର ପ୍ରଭାବ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ ଆକ୍ଟିନ୍ ଫାଇବରର ଘନତା ଏବଂ ସଂଗଠନର ପରିବର୍ତ୍ତନ ଦ୍ tension ାରା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଏ |U2OS କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ, ଆମେ କେବଳ SPECC1L- ଅଭାବୀ AJ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଏବଂ ପୁନରୁଦ୍ଧାରର ମାର୍କର ଭାବରେ ସେଲ୍ ଆକୃତିର ପରିବର୍ତ୍ତନ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲୁ |ପରିଶେଷରେ, ଆମେ ଅନୁମାନ କରୁଛୁ ଯେ SPECC1L ଅଭାବରେ AKT ରାସ୍ତାର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ AJ ସ୍ଥିରତା ବ increases ାଇଥାଏ ଏବଂ CNCC ରେ ବିଳମ୍ବକୁ ହ୍ରାସ କରିଥାଏ |
କ Interest ତୁହଳର ବିଷୟ, SPECC1L ଅନୁପସ୍ଥିତିରେ ଫସଫୋରାଇଟେଡ୍ 473-AKT ସ୍ତର ବ୍ୟତୀତ ଭିଟ୍ରୋ ଏବଂ ଭିଭୋରେ ପାନ- AKT ସ୍ତର ହ୍ରାସ କରାଯାଇଥିଲା, AKT ପ୍ରୋଟିନ୍ ସ୍ଥିରତା କିମ୍ବା କାରବାର ସ୍ତରରେ PI3K-AKT ସଙ୍କେତକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦେଇଥିଲେ |SPECC1L ଏବଂ MID1 ଜିନ୍, ଉଭୟ ଓପିଜ୍ / GBBB ସିଣ୍ଡ୍ରୋମ ସହିତ ଜଡିତ, ପ୍ରୋଟିନ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ଏନକୋଡ୍ କରନ୍ତି ଯାହା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ 18,22 ସ୍ଥିର କରିଥାଏ |ଯେଉଁ ଯନ୍ତ୍ରକ SP ଶଳ ଦ୍ୱାରା SPECC1L ଏବଂ MID1 ମଧ୍ୟସ୍ଥ ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ ସ୍ଥିରତା ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ବୁ understood ାପଡେ ନାହିଁ |SPECC1L କ୍ଷେତ୍ରରେ, ଏହି ସ୍ଥିରତା ମାଇକ୍ରୋଟ୍ୟୁବୁଲ୍ 18 ର ଏକ ସବ୍ସେଟର ବର୍ଦ୍ଧିତ ଆସେଟିଲେସନ୍ ଅନ୍ତର୍ଭୂକ୍ତ କରେ |ଏହା ସମ୍ଭବ ଯେ SPECC1L AKT ପରି ଅନ୍ୟ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସ୍ଥିର କରିବା ପାଇଁ ସମାନ ପ୍ରଣାଳୀ ବ୍ୟବହାର କରେ |ଏହା ଦେଖାଯାଇଛି ଯେ AKT ପ୍ରୋଟିନରେ ଲାଇସେନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟଗୁଡିକର ଆସେଟିଲେସନ୍ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଲୋକାଲାଇଜେସନ୍ ଏବଂ ଫସଫୋରୀଲେସନ୍ 38 କୁ ହ୍ରାସ କରିଥାଏ |ଏହା ସହିତ, AKT ରେ ସମାନ ଲାଇସେନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟରେ K63 ଶୃଙ୍ଖଳାର ସର୍ବବ୍ୟାପୀ ଏହାର ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଲୋକାଲାଇଜେସନ୍ ଏବଂ ଆକ୍ଟିଭେସନ୍ 39,40 ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ |ବିଭିନ୍ନ ହାଇ ଥ୍ରୋପୁଟ ଖମୀର ଦୁଇଟି ହାଇବ୍ରିଡ ସ୍କ୍ରିନରେ ଚିହ୍ନିତ SPECC1L ପ୍ରୋଟିନ୍ ସହିତ ଯୋଗାଯୋଗ କରୁଥିବା ଅନେକ କାରଣ ମଧ୍ୟରେ ଚାରି - CCDC841, ECM2942, APC ଏବଂ UBE2I43 - ସର୍ବବ୍ୟାପୀ କିମ୍ବା ସମୋଏଲେସନ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ପ୍ରୋଟିନ୍ କାରବାର କିମ୍ବା ସ୍ଥିରତା ମଧ୍ୟରେ ଜଡିତ |SPECC1L AKT ଲାଇସେନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟଗୁଡ଼ିକର ପରବର୍ତ୍ତୀ ଅନୁବାଦ ରୂପାନ୍ତରଣରେ ଜଡିତ ହୋଇପାରେ, AKT ସ୍ଥିରତାକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିଥାଏ |ତଥାପି, AKT ପ୍ରୋଟିନର ଲୋକାଲାଇଜେସନ୍ ଏବଂ ସ୍ଥିରତା ପାଇଁ SPECC1L ର ଗୁରୁତ୍ role ପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ବର୍ଣ୍ଣିତ ହୋଇ ରହିଛି |
ଭିଭୋରେ SPECC1L ଅଭିବ୍ୟକ୍ତିର ଗୁରୁତର ତ୍ରୁଟି ଯୋଗୁଁ AJ ମାର୍କର ଦାଗ ଏବଂ ତ୍ରୁଟିପୂର୍ଣ୍ଣ CNCC ଓଭରଲେ, ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ଏବଂ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଭ୍ରୁଣ ଜନିତ ମୃତ୍ୟୁ ଘଟିଲା |ପୂର୍ବ ରିପୋର୍ଟଗୁଡିକ ଦର୍ଶାଇଛି ଯେ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ର ବୃଦ୍ଧି ସ୍ତର ସହିତ ମାଉସ୍ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟଗୁଡିକ ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ତ୍ରୁଟି 44,45,46,47 ଏବଂ କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ତ୍ରୁଟି ସହିତ ଜଡିତ |ଏହା ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି ଯେ ସ୍ନାୟୁ ଫୋଲ୍ଡ କିମ୍ବା ଫାରିନେଜ୍ ଆର୍ଚରେ ଅତ୍ୟଧିକ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁ ହୋଇପାରେ, ସଠିକ୍ ମର୍ଫୋଜେନେଟିକ୍ ଗତିବିଧି ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ସଂଖ୍ୟକ କୋଷଗୁଡିକ 48,49,50 ହୋଇପାରେ |ଏହାର ବିପରୀତରେ, ଆମର SPECC1L ଅଭାବୀ ସେଲ୍ ରେଖାଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟମ ଭାବରେ ହ୍ରାସ ହୋଇଥିବା SPECC1L ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ସହିତ କେବଳ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁର ପ୍ରମାଣ ବିନା କେବଳ AJ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଦେଖାଇଲା |ଅବଶ୍ୟ, ଏହି Kd କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ PI3K-AKT ରାସ୍ତାର ରାସାୟନିକ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଲା |ଏହିପରି, SPECC1L ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି କିମ୍ବା କାର୍ଯ୍ୟରେ ମଧ୍ୟମ ହ୍ରାସ କୋଷର ବଞ୍ଚିବା ନିଶ୍ଚିତ କରେ |ଏହା ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ ସହିତ ସମାନ ଅଟେ ଯେ ବିରଳ Specc11 ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣ ଯାହା st ରେ ଗିରଫରୁ ରକ୍ଷା ପାଇଥାଏ |E9.5 - ବୋଧହୁଏ ଜିନ୍ କ୍ୟାପଚର ଦକ୍ଷତା ହ୍ରାସ ହେତୁ - ସେମାନଙ୍କର ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ କରିବାକୁ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ ବିକାଶରେ ବନ୍ଦ କରିବାକୁ ସକ୍ଷମ, ପ୍ରାୟତ cr କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ତ୍ରୁଟି ସହିତ (ଚିତ୍ର S3) |ଏହା ସହିତ ସମାନ ଅଟେ, କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ଅସ୍ୱାଭାବିକତା ସହିତ ହେଟେରୋଜାଇଗସ୍ Specc1l ଭ୍ରୁଣର ବିରଳ ଘଟଣା - ବୋଧହୁଏ ଜିନ୍ କ୍ୟାପଚର ଦକ୍ଷତା ବୃଦ୍ଧି ହେତୁ - ଏବଂ ଜେବ୍ରାଫିସରେ ମିଳିବା ଯେଉଁଥିରେ ଦୁଇଟି SPECC1L ଅର୍ଥୋଲୋଜି (specc1lb) ବିଳମ୍ବ ଭ୍ରୁଣ ଫେନୋଟାଇପ୍ ହରାଇଥାଏ | ନିମ୍ନ ଜହ୍ନ ଏବଂ ଦ୍ୱିପାକ୍ଷିକ ଖଣ୍ଡ 51 |ଏହିପରି, ମାନବ ରୋଗୀଙ୍କଠାରେ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା ହେଟେରୋଜାଇଗସ୍ SPECC1L କ୍ଷତି-ଫଙ୍କସନ୍ ମ୍ୟୁଟେସନ୍ କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ମର୍ଫୋଜେନେସିସ୍ ସମୟରେ SPECC1L କାର୍ଯ୍ୟରେ ଛୋଟ ଦୁର୍ବଳତା ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ, ଯାହା ସେମାନଙ୍କର ଓରୋଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକୁ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରିବାକୁ ଯଥେଷ୍ଟ |ଇଣ୍ଟରସେଲୁଲାର ଯୋଗାଯୋଗର SPECC1L- ଆଧାରିତ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ମଧ୍ୟ ପାଲାଟୋଜେନେସିସ୍ ଏବଂ ଫାରିନେଜ୍ ତୀରର ମିଶ୍ରଣରେ ଏକ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିପାରନ୍ତି |SPECC1L କାର୍ଯ୍ୟର ପରବର୍ତ୍ତୀ ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ ନ୍ୟୁରୋପିଥେଲିଆଲ୍ କୋଷର ଗତିଶୀଳତା ଏବଂ କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ମର୍ଫୋଜେନେସିସରେ ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ ସମୟରେ CNCC ରେ ଅସ୍ଥାୟୀ ଆନ୍ତ cell- ଯୋଗାଯୋଗର ଭୂମିକାକୁ ବର୍ଣ୍ଣନା କରିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିବ |
U2OS osteosarcoma ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ ପୂର୍ବରୁ ବର୍ଣ୍ଣନା କରାଯାଇଛି (Saadi et al।, 2011) |SPECC1L ବିରୁଦ୍ଧରେ ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡିକ ମଧ୍ୟ ପୂର୍ବରୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ ହୋଇଛି (Saadi et al।, 2011) |ଆଣ୍ଟି- cat- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି (ରାବଣ; 1: 1000; ସାଣ୍ଟା କ୍ରୁଜ୍, ଡାଲାସ୍, TX) ), ମୋ) , କାଲିଫର୍ନିଆ), DLX2 (1: 1000; ଆବକମ୍, କେମ୍ବ୍ରିଜ୍, MA), ଫସଫୋ-ସର୍ 473-AKT (1: 1000; ସେଲ୍ ସିଗନାଲିଂ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି, ଡାନଭର୍ସ, MA), ପାନ୍- AKT (1: 1000; ଥର୍ମୋ ଫିସର ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍, ୱାଲଥମ୍, MA ), KI67 (1: 1000; ସେଲ୍ ସିଗନାଲିଂ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି, ଡାନଭର୍ସ, MA), କାସପେଜ୍ 3 (1: 1000; ସେଲ୍ ସିଗନାଲିଂ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି, ଡାନଭର୍ସ, MA) ଏବଂ β- ଆକ୍ଟିନ୍ (1: 2500; ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ୍ ଲୁଇସ୍, MO) ବର୍ଣ୍ଣିତ ପରି ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |।ଆକ୍ଟିନ୍ ଫିଲାମେଣ୍ଟଗୁଡିକ ଆକ୍ଟି-ଦାଗ ରୋଡାମାଇନ୍ ଫାଲୋଏଡାଇନ୍ (ସାଇଟୋସ୍କେଲେଟନ୍, ଡେନଭର, କଲୋରଡୋ) ସହିତ ଦାଗଯୁକ୍ତ |
U2OS କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ ସେଲ୍ ଏବଂ SPECC1L-kd କୋଷଗୁଡିକ ଷ୍ଟାଣ୍ଡାର୍ଡ ହାଇ ଗ୍ଲୁକୋଜ୍ DMEM ରେ 10% ଭ୍ରୁଣ ବୋଭାଇନ୍ ସେରମ୍ (ଲାଇଫ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି, କାର୍ଲସବାଡ୍, CA) ସହିତ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟ କରାଯାଇଥିଲା |AJ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପାଇଁ, 2% 105 କୋଷଗୁଡିକ 0.1% ପର୍ସିନ୍ ଜେଲାଟିନ୍ (ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ୍ ଲୁଇସ୍, MO) ସହିତ ଚିକିତ୍ସିତ କାଚ ଉପରେ ବିହନ ଦିଆଯାଇଥିଲା ଏବଂ କୋଷ ଆକାରର ପରିବର୍ତ୍ତନ ପାଇଁ ଦେଖାଯାଇଥିଲା |ବିଭିନ୍ନ ସୂଚୀତ ସମୟ ପଏଣ୍ଟରେ କୋଷଗୁଡିକ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା: ବିହନର 4 ଘଣ୍ଟା ପରେ (t = 1), ବିହନର 24 ଘଣ୍ଟା ପରେ (t = 2), କୋଷ ଆକାରରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ବିନା ମିଳନ (t = 3), କୋଷ ଆକାରରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ (t = 4) , ସେଲ୍ ଆକୃତି ପରିବର୍ତ୍ତନ ପରେ 24 ଘଣ୍ଟା (t = 5) ଏବଂ ସେଲ୍ ଆକୃତି ପରିବର୍ତ୍ତନ ପରେ 48 ଘଣ୍ଟା (t = 6) (ଚିତ୍ର 1, 2, 3) |PI3K-AKT ପଥକୁ ମଡ୍ୟୁଲେଟ୍ କରିବା ପାଇଁ, PI3K-AKT ଇନହିବିଟର ୱର୍ଟମ୍ୟାନ୍ (TOCRIS ବାୟୋ ସାଇନ୍ସେସ୍, ମିନିନାପଲିସ୍, ମିନେସୋଟା) କିମ୍ବା SC-79 ଆକ୍ଟିଭେଟର୍ (TOCRIS ବାୟୋ ସାଇନ୍ସେସ୍, ମିନିନାପଲିସ୍ ଆଡାମସ୍, ମିନେସୋଟା) ସହିତ ସୂଚିତ ଏକାଗ୍ରତାରେ କୋଷଗୁଡିକ ସଂସ୍କୃତି ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା |ରାସାୟନିକ ପଦାର୍ଥ ଧାରଣ କରୁଥିବା ମାଧ୍ୟମକୁ ପ୍ରତିଦିନ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରାଯାଉଥିଲା |
ସାଧାରଣ ସଂସ୍କୃତି ଅବସ୍ଥାରେ ଲାଇଭ୍ କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ ଏବଂ କେଡି କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଫ୍ରେମ୍-ବାଇ-ଫ୍ରେମ୍ ରେକର୍ଡିଂ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 7 ଦିନ ପାଇଁ ପ୍ରତି 10 ମିନିଟରେ ଫେଜ୍ କଣ୍ଟ୍ରାସ୍ ଚିତ୍ର ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା |ଏକ କମ୍ପ୍ୟୁଟର ନିୟନ୍ତ୍ରିତ Leica DM IRB ଓଲଟା ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଚିତ୍ରଗୁଡ଼ିକ ଏକ ଯାନ୍ତ୍ରିକ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସହିତ ସଜ୍ଜିତ ଏବଂ ଏକ QImaging Retiga-SRV କ୍ୟାମେରା ସହିତ ସଂଯୁକ୍ତ 10 × N-PLAN ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ବ୍ୟବହାର କରି ଅର୍ଜନ କରାଯାଇଥିଲା |ଇମେଜିଙ୍ଗ୍ ସମୟରେ, 5% CO2 ସହିତ ଆର୍ଦ୍ର ପରିବେଶରେ 37 ° C ରେ କୋଷ ସଂସ୍କୃତିର ରକ୍ଷଣାବେକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା |
ଆଞ୍ଚଳିକ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ମାଉସ୍ ରିସୋର୍ସ ସେଣ୍ଟର (UC ଡେଭିସ୍, CA) ରୁ ଦୁଇଟି ଜିନ୍ ଟ୍ରାପ୍ ES ସେଲ୍ ଲାଇନ୍ DTM096 ଏବଂ RRH048 ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇ Specc11 ଅଭାବୀ ମାଉସ୍ ଲାଇନ୍ ସୃଷ୍ଟି କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହା Specc1lgtDTM096 ଏବଂ Specc1lgtRRH046 |ସଂକ୍ଷେପରେ, 129 / REJ ES କୋଷଗୁଡିକ C57BL6 ବ୍ଲାଷ୍ଟୋସିଷ୍ଟରେ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ଦିଆଗଲା |ଫଳସ୍ୱରୂପ ଚିମେରିକ୍ ପୁରୁଷ ମୂଷାମାନେ ମହିଳା C57BL6 ମୂଷାଙ୍କ ସହିତ ବ ag ଼ିଥିଲେ ଯାହାକି ଆଗାଉଟି କୋଟ୍ ରଙ୍ଗ ସହିତ ବଂଶ ଚିହ୍ନଟ କରିଥିଲେ |ହେଟେରୋଜାଇଗୋଟ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ଜିନ୍ ଟ୍ରାପ୍ ଭେକ୍ଟର ସନ୍ନିବେଶର ଉପସ୍ଥିତି ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |ମୂଷାମାନଙ୍କୁ 129 / REJ; C57BL6 ର ମିଶ୍ରିତ ପୃଷ୍ଠଭୂମିରେ ରଖାଯାଇଥିଲା |ଜେନେଟିକ ଟ୍ରାପ ଭେକ୍ଟରର ସନ୍ନିବେଶ ସାଇଟର ଅବସ୍ଥିତି RT-PCR, ଜେନୋମ କ୍ରମ ଏବଂ ଜେନେଟିକ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟେସନ୍ (ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଚିତ୍ର 1) ଦ୍ୱାରା ନିଶ୍ଚିତ କରାଯାଇଥିଲା |ଡବଲ୍ ହେଟେରୋଜାଇଗସ୍ Specc1lGT ମୂଷା, ROSAmTmG (# 007576) ଏବଂ Wnt1-Cre (# 003829) ମୂଷା (ଜ୍ୟାକସନ ଲାବୋରେଟୋରୀ, ବାର୍ ହାରବର୍, ME) ର CNCC ପୀଠକୁ ଚିହ୍ନିବା ପାଇଁ Specc1l ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣରେ ROSAmTmG ଏବଂ Wnt1-Cre allele ଉତ୍ପାଦନ କରାଯାଇଥିଲା |ମୂଷାମାନଙ୍କରେ ସମସ୍ତ ପରୀକ୍ଷଣ କାନସାସ୍ ମେଡିକାଲ୍ ୟୁନିଭରସିଟିର ଅନୁଷ୍ଠାନିକ ପ୍ରାଣୀ ଚିକିତ୍ସା ଏବଂ ବ୍ୟବହାର କମିଟି ଦ୍ୱାରା ଅନୁମୋଦିତ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଅନୁଯାୟୀ କରାଯାଇଥିଲା |
କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ 60 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଭ୍ରୁଣଗୁଡିକ (1% ଫର୍ମାଲଡିହାଇଡ୍, 0.2% ଗ୍ଲୁଟାରାଲଡିହାଇଡ୍, 2 ମିମି MgCl2, 0.02% NP-40, 5 mM EGTA) ରେ ସ୍ଥିର କରାଯାଇଥିଲା |ଏକ୍ସ-ଗାଲ୍ ଦାଗ ସମାଧାନରେ ଫିକ୍ସିଂ ପରେ (5 ମିଟର ପୋଟାସିୟମ୍ ଫେରିସିଆନାଇଡ୍, 5 ମି ମି ପୋଟାସିୟମ୍ ଫେରୋସିୟାନାଇଡ୍, 2 ମି ଏମ MgCl2, 0.01% ସୋଡିୟମ୍ ଡିଅକ୍ସାଇକୋଲେଟ୍, 0.02% NP-40, 1 ମିଗ୍ରା / ମିଲି ଏକ୍ସ-ଗାଲ୍) ଦାଗ ବିକାଶ 37 ° C ରେ କରାଯାଇଥିଲା | ।1-6 ଘଣ୍ଟା ମଧ୍ୟରେ ° Cଭ୍ରୁଣଗୁଡିକ 4% PFA ରେ ପୋଷ୍ଟ-ଫିକ୍ସ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଭିଜୁଆଲାଇଜ୍ କରାଯାଇଥିଲା |
ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲୋଟିଂ ପାଇଁ, କୋଷଗୁଡିକ ପାସିଭ୍ ଲାଇସିସ୍ ବଫର୍ (ପ୍ରୋମେଗା, ଫିଚବର୍ଗ, ଡବ୍ଲୁଇ) ରେ HALT ପ୍ରୋଟିଜ୍ ଇନହିବିଟର (ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ୍ ଲୁଇସ୍, MO) ର ମିଶ୍ରଣରେ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟ କରାଯାଇଥିଲା |ଲାଇସେଟ୍ ଗୁଡିକ 12% ପଲିୟାକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ ମିନି- PROTEAN TGX ପ୍ରସ୍ତୁତ ଜେଲ୍ (ବାୟୋ-ରେଡ୍, ହର୍କ୍ୟୁଲସ୍, CA) ରେ ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଇମ୍ମୋବିଲନ୍ PVDF ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ (EMD ମିଲିପୋର, ବିଲେରିକା, MA) କୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ କରାଯାଇଥିଲା |%। %% କ୍ଷୀରରେ%। %% Tween ଧାରଣ କରିଥିବା br ୁଲା ଗୁଡିକ ଅବରୋଧ କରାଯାଇଥିଲା |ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡିକ ରାତାରାତି 4 ° C ରେ କିମ୍ବା ଏକ ଘଣ୍ଟା ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା |ସିଗନାଲ୍ ଉତ୍ପାଦନ ପାଇଁ ଫେମଟୋ ସୁପର ସାଇନାଲ୍ ୱେଷ୍ଟ୍ ECL ରିଜେଣ୍ଟ୍ (ଥର୍ମୋ ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍, ୱାଲ୍ଟାମ, MA) ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |ପ୍ରତିରୋପଣ ପାଇଁ, ଭ୍ରୁଣଗୁଡିକ ରାତାରାତି 4% PFA / PBS ଏବଂ କ୍ରାଇପ୍ରେସର୍ଭରେ ସ୍ଥିର କରାଯାଇଥିଲା |PBS ରେ 1% ସାଧାରଣ ଛେଳି ସେରମ୍ (ଥର୍ମୋ ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍, ୱାଲଥମ୍, MA) ଏବଂ 0.1% ଟ୍ରିଟନ୍ ଏକ୍ସ -100 (ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ୍ ଲୁଇସ୍, MO) ଧାରଣ କରିଥିବା ପିଏସ୍ଏସ୍ ରେ ଟିସୁ କ୍ରାଇସେକସନ ଅବରୋଧ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ତା’ପରେ 4 ° C ରେ ଇନକ୍ୟୁବେଟରରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା | ରାତିଆଣ୍ଟି-ଆଣ୍ଟିବଡି ଏବଂ ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ୍ ସେକେଣ୍ଡାରୀ ଆଣ୍ଟିବଡି (1: 1000) ସହିତ 1 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 4 ° C ରେ |ଦାଗିତ ବିଭାଗଗୁଡିକ ପ୍ରୋଲୋଙ୍ଗ ସୁନା ମାଧ୍ୟମ (ଥର୍ମୋ ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍, ୱାଲ୍ଟାମ MA) ରେ ରଖାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଏକ ଲାଇକା TCS SPE କନଫୋକାଲ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଫ୍ଲାଟ ଚିତ୍ରଗୁଡ଼ିକ ମିଳିଥିଲା ​​|ପ୍ରତ୍ୟେକ ପ୍ରତିରୋପଣ ଅତିକମରେ ଦୁଇଟି ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟ ଭ୍ରୁଣର ସିରୋସେକ୍ସନ୍ ଉପରେ ତିନୋଟି ସ୍ independent ାଧୀନ ପରୀକ୍ଷଣ ଭାବରେ କରାଯାଇଥିଲା |ଏକ ପ୍ରତିନିଧୀ ପରୀକ୍ଷଣ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି |
ପରିବର୍ତ୍ତିତ RIPA ବଫର୍ (20 mM Tris-HCl, pH 8.0, 1% NP-40, 130 mM NaCl, 10% glycerol, 2 mM EDTA, ଏବଂ HALT protease inhibitor (ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍, ସେଣ୍ଟ୍ ଲୁଇସ୍, MO) ରେ କୋଷଗୁଡିକ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା | ସଂକ୍ଷେପରେ, ପ୍ରୋଟିନ୍ ଜି ଚୁମ୍ବକୀୟ ବିଡ୍ (ଲାଇଫ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି, କାର୍ଲସବାଡ୍, CA) ସହିତ ଲାଇସେଟ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ତା’ପରେ ରାତାରାତି 4 ° C ରେ ଆଣ୍ଟି- SPECC1L କିମ୍ବା IgG ପ୍ରୋଟିନ୍ ଜି ପ୍ରୋଟିନ୍ ବିଡ୍ SPECC1L ବାହାର କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ ଆଣ୍ଟି ବ୍ୟବହାର କରି ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲୋଟିଂ କରାଯାଇଥିଲା | -β- କ୍ୟାଟେନିନ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି ଉପରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ କୋ-ଆଇପି ପରୀକ୍ଷଣଗୁଡିକ ଚାରୋଟି ସ୍ independent ାଧୀନ ପରୀକ୍ଷଣର ପ୍ରତିନିଧୀ |
କାନସାସ୍ ୟୁନିଭରସିଟି ମେଡିକାଲ୍ ସେଣ୍ଟରର ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି କେନ୍ଦ୍ରକୁ ସ୍ଥିର ସଂସ୍କୃତ କୋଷ ବା ମାଉସ୍ ଭ୍ରୁଣ ଟିସୁ ଯୋଗାଇ ଦିଆଯାଉଥିଲା |ସଂକ୍ଷେପରେ, ନମୁନାଗୁଡିକ EMbed 812 ରଜନୀରେ (ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପି ସାଇନ୍ସ, ଫୋର୍ଟ ୱାଶିଂଟନ୍, PA) ଏମ୍ବେଡ୍ କରାଯାଇଥିଲା, ରାତାରାତି 60 ° C ରେ ପଲିମେରାଇଜ୍ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ହୀରା ବ୍ଲେଡ୍ ସହିତ ସଜ୍ଜିତ ଏକ Leica UC7 ଅଲଟ୍ରାମିକ୍ରୋଟୋମ୍ ବ୍ୟବହାର କରି 80 nm ରେ ବିଭାଗ କରାଯାଇଥିଲା |100 କେଭି ଲ୍ୟାବ 6 ବନ୍ଧୁକ ସହିତ ସଜ୍ଜିତ JEOL JEM-1400 ଟ୍ରାନ୍ସମିସନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ ମାଇକ୍ରୋସ୍କୋପ ବ୍ୟବହାର କରି ବିଭାଗଗୁଡ଼ିକ ଭିଜୁଆଲାଇଜ କରାଯାଇଥିଲା |
ଏହି ଆର୍ଟିକିଲକୁ କିପରି ଉଲ୍ଲେଖ କରିବେ: ୱିଲସନ୍, NR ଏବଂ ଅନ୍ୟମାନେ |SPECC1L ର ଅଭାବ ଦ୍ spl ାରା ବିଭାଜିତ ଗଣ୍ଠିର ସ୍ଥିରତା ବୃଦ୍ଧି ହୁଏ ଏବଂ କ୍ରାନିଆଲ୍ ସ୍ନାୟୁ କ୍ରେଷ୍ଟ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ବିଳମ୍ବ କମିଯାଏ |ବିଜ୍ଞାନ6, 17735;doi: 10.1038 / srep17735 (2016) |
ସେଣ୍ଟ-ଜାନେ, ଜେ।ସ୍ନାୟୁ କ୍ରେଷ୍ଟର ଆନେ୍ଦାଳନ ଏବଂ ଭିନ୍ନତା |(ସ୍ପ୍ରିଞ୍ଜର ସାଇନ୍ସ + ବ୍ୟବସାୟ ମିଡିଆ; ଲ୍ୟାଣ୍ଡସ୍ ବାୟୋ ସାଇନ୍ସ / ୟୁରେକା ଡଟ୍ କମ୍, 2006) |
କର୍ଡେରୋ, DR ଏବଂ ଅନ୍ୟମାନେ |ଗତିଶୀଳ କ୍ରାନିଆଲ୍ ସ୍ନାୟୁ କ୍ରେଷ୍ଟ୍ କୋଷଗୁଡିକ: କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ବିକାଶରେ ସେମାନଙ୍କର ଭୂମିକା |ଆମେରିକୀୟ ଜର୍ନାଲ୍ ଅଫ୍ ମେଡିକାଲ୍ ଜେନେଟିକ୍ସ |ଭାଗ A 155A, 270–279, doi: 10.1002 / ajmg.a.33702 (2011) |
ବୋଲାଣ୍ଡ, ଆରପି ନ୍ୟୁରୋକ୍ରିଷ୍ଟୋପାଥିଆ: ଏହାର ଅଭିବୃଦ୍ଧି ଏବଂ ବିକାଶ 20 ବର୍ଷ ମଧ୍ୟରେ |ଶିଶୁରୋଗ ବିଶେଷଜ୍ଞ |ପାଥୋଲୋଜି |ଲାବୋରେଟୋରୀmedicine ଷଧ17, 1-25 (1997)
ମାଙ୍ଗୋଲ୍ଡ ଇ।ମଲିକୁଲାର ମେଡିସିନ୍ ଟ୍ରେଣ୍ଡ 17, 725–733, ଡୋଇ: 10.1016 / j.molmed.2011.07.007 (2011) |
ମିନୁ, ଏମ୍ ଏବଂ ରେଲି, FM କ୍ରାନିଆଲ୍ ସ୍ନାୟୁ କ୍ରେଷ୍ଟ ସେଲ୍ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣର ମଲିକୁଲାର ପ୍ରଣାଳୀ ଏବଂ କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ବିକାଶ ସମୟରେ ପ୍ୟାଟର୍ନିଂ |ବିକାଶ 137, 2605–2621, ଡୋଇ: 10.1242 / dev.040048 (2010) |
ଡିକ୍ସନ୍, ଏମଜେ, ମାରାଜିତା, ଏମ୍.ଏଲ୍, ବିଟି, TH ଏବଂ ମୁରେ, ଜେ.କେ କ୍ଲିଫ୍ଟ ଓଠ ଏବଂ ପାଲଟ୍: ଜେନେଟିକ୍ ଏବଂ ପରିବେଶ ପ୍ରଭାବ ବୁ understanding ିବା |ପ୍ରାକୃତିକ ମନ୍ତବ୍ୟ |ଜେନେଟିକ୍ସ 12, 167–178, ଡୋଇ: 10.1038 / nrg2933 (2011) |
ଇନଗ୍ରାମ, CR ଏବଂ ଅନ୍ୟଚର୍ମ, ଅଙ୍ଗ, ଏବଂ କ୍ରାନିଓଫ୍ୟାସିଆଲ୍ ଅଞ୍ଚଳର ଅସ୍ୱାଭାବିକ ମର୍ଫୋଜେନେସିସ୍ ଇଣ୍ଟରଫେରନ୍-ନିୟନ୍ତ୍ରକ ଫ୍ୟାକ୍ଟର୍ -6 (Irf6) - ଅଭାବୀ ମୂଷା |ଜାତୀୟ ଜେନେଟ୍ |38, 1335–1340, ଡୋଇ: 10.1038 / ng1903 (2006) |
ପେୟାରାର୍ଡ-ଜାନଭିଡ, ଏମ।GRHL3 ରେ ପ୍ରାଧାନ୍ୟ ପରିବର୍ତ୍ତନ, ଭ୍ୟାନ୍ ଡେର୍ ୱାର୍ଡ ସିଣ୍ଡ୍ରୋମ ସୃଷ୍ଟି କରେ ଏବଂ ମ oral ଖିକ ପେରିଡର୍ମର ବିକାଶରେ ବାଧା ସୃଷ୍ଟି କରେ |ଆମ୍ ଜେ ହମ୍ ଜେନେଟ୍ 94, 23–32, ଡୋଇ: 10.1016 / j.ajhg.2013.11.009 (2014) |
ହ୍ୟାରିସ୍, ଏମଜେ ଏବଂ ଜୁରିଲଫ୍, ଡିଏମ୍ ନ୍ୟୁରାଲ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦରେ ତ୍ରୁଟି ଥିବା ମାଉସ୍ ମ୍ୟୁଟାଣ୍ଟଗୁଡିକର ତାଲିକା ଅପଡେଟ୍ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ ବିଷୟରେ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଜେନେଟିକ୍ ବୁ understanding ାମଣା ଆଡକୁ ଅଗ୍ରଗତି କରନ୍ତୁ |ଜନ୍ମ ଦୋଷର ଅନୁସନ୍ଧାନ |ଭାଗ A, କ୍ଲିନିକାଲ୍ ଏବଂ ମଲିକୁଲାର ଟେରାଟୋଲୋଜି 88, 653–669, ଡୋଇ: 10.1002 / bdra.20676 (2010) |
ଫାଣ୍ଟାଜୁଜୋ, କା ଏବଂ ସୋରିୟାନୋ, ପି PI3K- ମଧ୍ୟସ୍ଥ PDGFRalpha ସିଗନାଲ୍ ଏକ p53- ନିର୍ଭରଶୀଳ ଇଣ୍ଟ୍ରାସେଲୁଲାର୍ ପଥ ମାଧ୍ୟମରେ କଙ୍କାଳ ବିକାଶରେ ବଞ୍ଚିବା ଏବଂ ବିସ୍ତାରକୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିଥାଏ |ଜିନ୍ ବିକାଶ 28, 1005-1017, ଡୋଇ: 10.1101 / gad.238709.114 (2014) |
କପ୍, ଏଜେ, ଗ୍ରୀନ୍, ଏନଡି ଏବଂ ମର୍ଡକ, ଜେଏନ୍ ଡିସଭେଲଡ୍: ସ୍ନାୟୁ ଟ୍ୟୁବ୍ ବନ୍ଦ ସହିତ ସମ୍ମିଳିତ ବିସ୍ତାରର ସମ୍ପର୍କ |ସ୍ନାୟୁବିଜ୍ଞାନର ଧାରା |26, 453–455, ଡୋଇ: 10.1016 / S0166-2236 (03) 00212-1 (2003) |